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關(guān)鍵詞:近場(chǎng)光學(xué) 顯微技術(shù) 發(fā)展 應(yīng)用 展望
中圖分類號(hào):O43 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1007—3973(2012)009—066—02
1 近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)概述
近場(chǎng)光學(xué)的作用主要是對(duì)束縛在物體表面的非輻射場(chǎng)進(jìn)行探測(cè)。普通光學(xué)的分辨率與近場(chǎng)光學(xué)的分辨率存在不同。在理論上,由于衍射極限的限制,使得普通光學(xué)成像的分辨率低于入射光波長(zhǎng)的一半,根據(jù)估算大概在200 nm左右。近場(chǎng)光學(xué)的分辨率是根據(jù)衍射場(chǎng)的非輻射量而得到提高,大概在一個(gè)波長(zhǎng)以下,其實(shí)它的工作原理是將掃描系統(tǒng)的頻帶拓寬。
近場(chǎng)光學(xué)原理在應(yīng)用中最常見的便是掃描近場(chǎng)光學(xué)顯微鏡,通過對(duì)衍射分辨率的突破,然后收集納米材料表面的光學(xué)信息。掃描近場(chǎng)光學(xué)顯微鏡(SNOM)它主要是由探針、信號(hào)采集和處理、探針—樣品間距反饋控制、X—Y掃描以及圖像處理幾部份組成。對(duì)于SNOM來說,如果要完成超衍射分辨率的工作,必須要能夠精確的掌握及控制探針—樣品間距。截至目前為止,實(shí)現(xiàn)精確控制探針—樣品間距主要有激光光點(diǎn)反饋模式和剪切力反饋模式。這兩種模式存在主要的區(qū)別便是光的問題。激光光點(diǎn)反饋模式是利用激光在探針接近物體表面時(shí)產(chǎn)生的光斑來確定探針—樣品間距。剪切力反饋模式就是根據(jù)樣品間的作用力,使得探針針尖在接近物體表面時(shí)發(fā)生變化,根據(jù)這樣的原理使得探針控制在z=5nm~20nm的范圍之內(nèi)。運(yùn)用剪切力反饋模式的原理得出的光學(xué)成像更具有真實(shí)性。
另外一種以近場(chǎng)光學(xué)原理為主的光學(xué)顯微鏡是光子隧道掃描顯微鏡,這種顯微鏡具有更高的分辨力,它的工作原理是利用光線探針接近近場(chǎng)光信號(hào),分辨率取決于物體表面上光線點(diǎn)的面積。
2 近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)中的問題
2.1 納米級(jí)探針的制作
進(jìn)場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)是利用探針收集光場(chǎng)的信息,分辨率取決于探針尖的粗細(xì)和探測(cè)信息的精細(xì)結(jié)構(gòu)。但是如果探針尖端過細(xì),那么就會(huì)導(dǎo)致光的靈敏度降低。因此,在制作納米級(jí)探針時(shí),必須要做到具體問題具體分析,必須要解決兩個(gè)問題:探針削尖化和亞波長(zhǎng)孔徑的制造。
(1)探針削尖的方法。
通常情況下,在探針削尖的過程中,可以有兩種方法:
腐蝕法。這種方法被廣泛使用,可以利用HF酸和氨水對(duì)光纖芯進(jìn)行腐蝕進(jìn)而制作出不同的探針尖,但是這種方法具有高度的重復(fù)性。探針的圓錐角是可以改變的,取決于HF酸和氨水的綜合比例(1:X),當(dāng)X由0.5增大到1.5時(shí),針尖的圓錐角由15霸齟蟮?0啊5竊擻酶捶ㄖ譜魈秸?,蕼厦光蠂`獯嬖諉絳緯煞稚⑹降納⑸渲行摹8薟歡涎芯糠⑾鄭殼翱梢栽擻靡恢止庀吮;ぬ錐怨餳飩懈矗傭貿(mào)齙奶秸爰獗冉瞎饣???
熔拉法。這種制作方法的原理是利用二氧化碳熔融光纖,在光纖兩端作用力使其形成絲狀,在用大力迅速將其拉斷,這樣形成的斷面是錐面,也可以用作探針尖。運(yùn)用這種方法形成的探針尖比較光滑,在相同孔徑的情況下,腐蝕法卻比熔拉法的傳輸效率更高。熔拉法可以制作不同種類或形狀的針尖,但是相對(duì)來說成本高,設(shè)備昂貴。
(2)亞波長(zhǎng)孔徑的制造方法。
納米光刻法:首先對(duì)要制作的光纖尖鍍膜,然后對(duì)其采用化學(xué)方法進(jìn)行腐蝕,進(jìn)而使用納米光刻法制成亞波長(zhǎng)孔徑。
探針制造法:首先以二氧化碳激光加熱單模光纖,利用熔拉法使光纖頂端形成拋物面型的傳輸鋁尖,然后以5%的HF腐蝕探針尖端的細(xì)纖絲,這樣得到的探針的針尖更適合近場(chǎng)光學(xué)探測(cè)。
2.2 納米級(jí)樣品—探針間距的控制
為了保證近場(chǎng)光學(xué)中的超高分辨率,必須要保證探針在探測(cè)過程中對(duì)樣品的探測(cè)是無接觸掃描探測(cè),這就要求必須要掌控好樣品—探針的間距。
在樣品—探針間距控制的過程中,剪切力調(diào)制是一種最常用的方法。它的工作原理是在亞波長(zhǎng)范圍內(nèi)保證探針—樣品間距的可靠性和穩(wěn)定性,這種方法是一種非光學(xué)調(diào)制法。
剪切力通常是通過光纖頭與樣品表面的振動(dòng)頻率探測(cè)得出的。當(dāng)探針尖靠近樣品時(shí),光纖頭的振動(dòng)幅度是隨著樣品—探針間距和剪切力發(fā)生變化的,以此來測(cè)得探針—樣品間距的大小。在實(shí)際生活中,樣品—探針間距是通過壓電陶瓷的壓電效應(yīng)測(cè)得的。
實(shí)際中通常采用壓電陶瓷的壓電效應(yīng)測(cè)控樣品—探針間距。將高頻振動(dòng)壓電管分為上下兩部分,下半部分以交流電壓激勵(lì)振動(dòng);上半部分有兩個(gè)電極,用于探測(cè)壓電陶瓷管(DPT)的振幅。由于剪切力對(duì)于探測(cè)振動(dòng)的阻礙,DPT內(nèi)部產(chǎn)生張力;又由于壓電效應(yīng)引起感應(yīng)電壓,將感應(yīng)電壓作為反饋信號(hào),經(jīng)鎖相放大器達(dá)到控制樣品—探針間距的目的。利用這種方法,可以使得近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)更簡(jiǎn)單化。除了此種方法可以測(cè)得樣品—探針間距,還可以利用電容傳感器、電壓—聲學(xué)法等來測(cè)得樣品—探針的間距
3 近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)的應(yīng)用
3.1 物理領(lǐng)域的應(yīng)用
近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)是物理領(lǐng)域重要的一部分,并且應(yīng)用范圍極廣。
(1)光學(xué)可以成像,利用近場(chǎng)光學(xué)可以使得成像的分辨率達(dá)到納米量級(jí)。
(2)應(yīng)用近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù),可以使得物理領(lǐng)域的光譜學(xué)研究更加深入。
由于研究發(fā)現(xiàn)的限制性,目前的光譜研究都處在宏觀水平,即使利用微區(qū)光譜也只能達(dá)到微米的程度。但是利用近場(chǎng)光譜儀器,可以實(shí)現(xiàn)納米級(jí)的測(cè)量,并且能夠區(qū)分納米量子線的光發(fā)射極多個(gè)量子線的發(fā)射譜。近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)可以在研究納米晶體、量子點(diǎn)、量子球方面發(fā)揮獨(dú)特而優(yōu)越的作用。
3.2 生物領(lǐng)域的應(yīng)用
近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)在生物領(lǐng)域的應(yīng)用也是很廣泛的。利用近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)的超高分辨率,可以更清晰的測(cè)得生物標(biāo)本中細(xì)胞膜和細(xì)胞壁的厚度以及它們的內(nèi)部存在結(jié)構(gòu),并且還可以測(cè)得細(xì)胞膜內(nèi)部與外部結(jié)構(gòu)在不同環(huán)境下的不同變化。根據(jù)生物技術(shù)的發(fā)展,國(guó)外已經(jīng)利用PSTM測(cè)得納米生物標(biāo)本噬苗體細(xì)菌圖像的橢圓頭直徑為100 nm,圓柱尾直徑為10 nm。這樣精確的分辨率是以前的生物領(lǐng)域中不能做到的。
4 近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)未來前景展望
近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)使得衍射分辨率突破極限,并且促進(jìn)了納米光學(xué)的發(fā)展,而且?guī)?dòng)了高密度光儲(chǔ)存、檢測(cè)生物單分子、細(xì)胞組織生命探測(cè)研究等多個(gè)領(lǐng)域的發(fā)展。
對(duì)于近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)未來的前景展望,應(yīng)進(jìn)一步研究樣品表面離激元產(chǎn)生機(jī)理,將更深入近場(chǎng)光學(xué)成像技術(shù)的創(chuàng)新和應(yīng)用,包括亞波長(zhǎng)和納米材料的應(yīng)用。表面等離子晶體的新型納米光子學(xué)器件將得到迅速的發(fā)展,表面光波導(dǎo)將會(huì)引起科學(xué)領(lǐng)域的高度重視。在生命科學(xué)領(lǐng)域,TIRFM和SNOM的結(jié)合應(yīng)用會(huì)獲得高分辨率的生物單分子光學(xué)圖像。另外,在大規(guī)模集成電路當(dāng)中,利用反射式NSOM,對(duì)SRAM芯片進(jìn)行表現(xiàn)成像來測(cè)量電路的線寬,將有非常廣泛的應(yīng)用前景。
對(duì)于近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)的前景展望有著不可估量的飛躍,也必定會(huì)為各個(gè)領(lǐng)域的科學(xué)研究帶來更大的作用。
參考文獻(xiàn):
[1] 王海潼,劉斐.近場(chǎng)光學(xué)顯微技術(shù)[J].應(yīng)用光學(xué),2005(5).
目前,生物醫(yī)學(xué)圖像信息技術(shù)主要包括生物醫(yī)學(xué)圖像傳輸、圖像管理、圖像分析、圖像處理幾方面。這些技術(shù)同以前的圖像技術(shù)、醫(yī)學(xué)影像技術(shù)都有一定的聯(lián)系,其在涵蓋以往圖像技術(shù)、醫(yī)學(xué)影像技術(shù)的同時(shí),也具有自身的特點(diǎn),與傳統(tǒng)的圖像和醫(yī)學(xué)影像技術(shù)相比,生物醫(yī)學(xué)圖像信息技術(shù)更加強(qiáng)調(diào)在醫(yī)學(xué)圖像信息收集、處理等過程中應(yīng)用計(jì)算機(jī)信息技術(shù)。
1.1圖像成像
從本質(zhì)上來看,生物醫(yī)學(xué)圖像成像技術(shù)(下文簡(jiǎn)稱“圖像成像技術(shù)”)與醫(yī)學(xué)影像技術(shù)的區(qū)別并不大,僅僅是人們更習(xí)慣將其表達(dá)為醫(yī)學(xué)影像。生物醫(yī)學(xué)圖像成像技術(shù)的研究?jī)?nèi)容為:利用染色方法和光學(xué)原理,清晰地表達(dá)出機(jī)體內(nèi)的相關(guān)信息,并將其轉(zhuǎn)變?yōu)榭梢晥D像。圖像成像技術(shù)研究的圖像對(duì)象有:人體的標(biāo)本攝影圖像、觀察手繪圖像、斷層圖像(如ECT、CT、B超、紅外線、X光)、臟器內(nèi)窺鏡圖像、激光共聚焦顯微鏡圖像、活細(xì)胞顯微鏡圖像、熒光顯微鏡圖像、組織細(xì)胞學(xué)光學(xué)顯微鏡圖像、基因芯片、核酸、電泳等顯色信息圖像、納米原子力顯微鏡圖像、超微結(jié)構(gòu)的電子顯微鏡圖像等等。
圖像成像技術(shù)主要包括2個(gè)部分:現(xiàn)代數(shù)字成像和傳統(tǒng)攝影成像。通常可采用掃描儀、內(nèi)窺鏡數(shù)碼相機(jī)、采集卡、數(shù)字?jǐn)z像機(jī)等進(jìn)行數(shù)字圖像采集;顯微圖像采集則可應(yīng)用光學(xué)顯微鏡成像設(shè)備及超微結(jié)構(gòu)電子顯微鏡成像設(shè)備;特殊光源采集可應(yīng)用超聲成像儀器、核磁共振成像儀器及X光成像設(shè)備。目前,各種醫(yī)學(xué)圖像技術(shù)的發(fā)展都十分迅速,特別是MRI、CT、X線、超聲圖像等技術(shù)。在醫(yī)學(xué)圖像成像技術(shù)方面,如何提高成像分辨力、成像速度、拓展成像功能,尤其是在生理功能及人體化學(xué)成分檢測(cè)方面,已經(jīng)引起了相關(guān)領(lǐng)域的重視。
1.2圖像處理
生物醫(yī)學(xué)圖像處理技術(shù),是指應(yīng)用計(jì)算機(jī)軟硬件對(duì)醫(yī)學(xué)圖像進(jìn)行數(shù)字化處理后,進(jìn)行數(shù)字圖像采集、存儲(chǔ)、顯示、傳輸、加工等操作的技術(shù)。圖像處理是對(duì)獲取的醫(yī)學(xué)圖像進(jìn)行識(shí)別、分析、解釋、分割、分類、顯示、三維重建等處理,以提取或增強(qiáng)特征信息。目前,醫(yī)學(xué)領(lǐng)域所應(yīng)用的圖像處理技術(shù)種類較多,統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)、成像技術(shù)知識(shí)、解剖學(xué)知識(shí)、臨床知識(shí)等的圖像處理均得到了較快的發(fā)展。另外,人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、模糊處理等技術(shù)也引起了圖像處理研究領(lǐng)域的廣泛重視。
1.3圖像分析及圖像傳輸
生物醫(yī)學(xué)圖像分析技術(shù),是指測(cè)量和標(biāo)定醫(yī)學(xué)圖像中的感興趣目標(biāo),以獲取感興趣目標(biāo)的客觀信息,建立相應(yīng)的數(shù)據(jù)描述。通過計(jì)算測(cè)定的圖像數(shù)據(jù),可揭示機(jī)體功能及形態(tài),推斷損傷或疾病的性質(zhì)及其與其他組織的關(guān)系,進(jìn)而為臨床診斷、治療提供可靠依據(jù)。生物醫(yī)學(xué)圖像傳輸技術(shù),是指應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)技術(shù),在互聯(lián)網(wǎng)上開展醫(yī)學(xué)圖像信息的查詢與檢索。通過網(wǎng)上傳輸圖像,在異地間進(jìn)行圖像信息交流,可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程診斷。同時(shí),在院內(nèi)通過PACS(數(shù)字醫(yī)學(xué)系統(tǒng)—醫(yī)學(xué)影像存檔與通信系統(tǒng)),也能在醫(yī)院內(nèi)部實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)圖像的網(wǎng)絡(luò)傳遞。
2總結(jié)
電暈放電是輸變電系統(tǒng)運(yùn)行中出現(xiàn)的主要問題之一,嚴(yán)重影響人身和設(shè)備安全,及時(shí)準(zhǔn)確地檢測(cè)電暈放電的位置和強(qiáng)弱對(duì)保證電力系統(tǒng)可靠運(yùn)行有重要意義。傳統(tǒng)的紅外檢測(cè)難以在白天使用,且可靠性低、誤檢率高、抗干擾能力差、響應(yīng)速度慢,不能滿足輸變電系統(tǒng)的革新性發(fā)展。
紫外雙光譜成像檢測(cè)技術(shù)和紫外雙光譜成像儀的出現(xiàn)解決了這一難題,該技術(shù)具備響應(yīng)速度快,分辨率高,作用距離遠(yuǎn),不受日光、霧天的干擾,可準(zhǔn)確定位等優(yōu)點(diǎn),克服了紅外檢測(cè)的弊端,特別適用于高壓電系統(tǒng)、高壓輸電線路的巡檢和航拍等各種惡劣環(huán)境。
暨南大學(xué)理工學(xué)院光電工程系教授龐其昌,潛心光電工程研究,在紫外圖像檢測(cè)、圖像處理、光譜成像檢測(cè)領(lǐng)域作出突出貢獻(xiàn)。據(jù)介紹,紫外光譜成像檢測(cè)技術(shù)能夠觀察和檢測(cè)到日盲紫外光信號(hào),并將紫外圖像信號(hào)轉(zhuǎn)換成可見光圖像信號(hào),便于觀察和測(cè)量。而紫外雙光譜成像儀就是結(jié)合了紫外成像技術(shù),圖像轉(zhuǎn)換和微光增強(qiáng)技術(shù),CCD攝像和計(jì)算機(jī)圖像疊加、處理以及平板圖像顯示等多種高技術(shù)開發(fā)出的新型監(jiān)測(cè)儀器。該儀器不僅可以檢測(cè)紫外信號(hào)的強(qiáng)弱、存在與否,更主要的是可以獲取紫外源或被測(cè)對(duì)象的兩維圖像,能夠觀察到許多用傳統(tǒng)光學(xué)儀器觀察不到的物理、化學(xué)、生物現(xiàn)象;又因?yàn)槠涔ぷ髟谌彰ぷ贤獠ǘ危什皇苋展飧蓴_,能夠在日光下檢測(cè)到通常我們?cè)诎滋臁㈧F天看不到的現(xiàn)象和景物,如輸變電線路的電暈放電等。除電暈檢測(cè)外,該技術(shù)在火災(zāi)檢測(cè)、公安偵破、環(huán)保監(jiān)測(cè)、生物及醫(yī)學(xué)研究中的測(cè)量分析、微電子及超精細(xì)檢測(cè)等領(lǐng)域也存在廣闊的應(yīng)用空間。
該項(xiàng)目獲得了2004年廣東省重點(diǎn)項(xiàng)目資助,解決了紫外成像、光路和系統(tǒng)設(shè)計(jì)、圖像融合和處理,完成了試驗(yàn)樣機(jī)的研制,并申請(qǐng)獲得了發(fā)明和實(shí)用新型兩項(xiàng)專利(專利號(hào):CN200310117583.8和ZL 03 2 25025.8)。利用該技術(shù)研制的紫外數(shù)碼相機(jī)能夠用于指紋與痕跡檢測(cè),已進(jìn)入小批量生產(chǎn);紫外雙光譜檢測(cè)儀也已轉(zhuǎn)入實(shí)用儀器開發(fā)階段。
此外,龐其昌還開展了光譜成像技術(shù)的研究,他借助液晶濾光器和光柵光譜儀研制了凝視式光譜成像裝置和推掃式光譜成像裝置,并研制成功相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)備,建立了實(shí)驗(yàn)條件較為完善的研究平臺(tái),并在此基礎(chǔ)上開展了中藥材成分分析和品質(zhì)評(píng)價(jià)的研究,獲得國(guó)家青年科學(xué)基金和廣州市科學(xué)基金的資助。
關(guān)鍵詞:
顯微鏡; 掃描; 采集; 同步; 隨機(jī)噪聲
中圖分類號(hào): O 436文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: Adoi: 10.3969/j.issn.10055630.2013.05.014
引言
激光共焦掃描顯微鏡(LCSM)廣泛應(yīng)用在生物醫(yī)學(xué)和材料科學(xué)等領(lǐng)域[1],因其具有三維成像能力和良好的橫向分辨率和縱向分辨率[24]受到了廣泛的關(guān)注。傳統(tǒng)的掃描共焦顯微鏡,一般采用光束掃描式[5],利用兩個(gè)相互垂直的平面掃描振鏡實(shí)現(xiàn)光學(xué)切片二維掃描[6];然而,對(duì)于超大視場(chǎng)的成像,光束掃描方式由于在掃描過程中使光束發(fā)生偏轉(zhuǎn),會(huì)在視場(chǎng)邊緣產(chǎn)生球差,引起視場(chǎng)邊緣成像與中心成像分辨率的不一致,從而容易導(dǎo)致光斑的空間輪廓形狀凹凸不平[7]。近年來,提出了一種采用數(shù)字微鏡器件的并行共焦檢測(cè)系統(tǒng)[810]提高成像速度的方法,但是在微透鏡陣列焦平面上得到的焦點(diǎn)是非均勻分布的,產(chǎn)生了一些畸變,與理想的焦點(diǎn)發(fā)生了位移。因此,采用工作臺(tái)運(yùn)動(dòng)實(shí)現(xiàn)掃描,即激發(fā)光的會(huì)聚焦點(diǎn)靜止而載物臺(tái)進(jìn)行二維或三維運(yùn)動(dòng)實(shí)現(xiàn)連續(xù)掃描。這種工作臺(tái)運(yùn)動(dòng)掃描方式,優(yōu)點(diǎn)是在對(duì)超大視場(chǎng)的逐點(diǎn)掃描成像時(shí),可以在整個(gè)視場(chǎng)區(qū)域?qū)崿F(xiàn)一致的高分辨率成像,缺點(diǎn)則是成像速度慢。
為了提高成像速度,本文對(duì)工作臺(tái)運(yùn)動(dòng)掃描方式LCSM中傳統(tǒng)的多幀取平均的方法進(jìn)行了改進(jìn),設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)了一種基于工作臺(tái)連續(xù)運(yùn)動(dòng)的LCSM系統(tǒng),并且提出了單幀成像濾除隨機(jī)噪聲的方法。
1反射式LCSM的工作原理
圖1是設(shè)計(jì)的反射式LCSM系統(tǒng)原理圖,該系統(tǒng)主要由幾大模塊組成,包括:光學(xué)成像模塊、光電轉(zhuǎn)換及放大模塊、機(jī)械掃描模塊、數(shù)據(jù)采集及數(shù)據(jù)處理模塊。
其中光學(xué)成像模塊采用無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng),由于其系統(tǒng)中存在一段平行光路,在光學(xué)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)和像差矯正上具有一定的優(yōu)勢(shì)。入射光波為405 nm的激光,該波長(zhǎng)不僅不會(huì)殺傷細(xì)胞,而且滿足高分辨率的要求。采用共軛技術(shù)成像,使光源、被測(cè)樣品及探測(cè)器處于彼此對(duì)應(yīng)的共軛位置上。入射激光經(jīng)過分光鏡反射后聚焦到樣品的某點(diǎn)處,由該點(diǎn)激發(fā)出來的熒光透過顯微物鏡,光束經(jīng)過分光鏡與高通濾波器后,僅有熒光波段通過,熒光通過成像透鏡聚焦于針孔處,非焦平面上的雜散光被濾掉,通過針孔的熒光被光電倍增管接收,工作臺(tái)通過作三維掃描便可以完成對(duì)光學(xué)斷層成像。
2影響LCSM分辨率的因素
2.1針孔大小及取樣間隔的選擇
針孔的大小與愛里斑的直徑相關(guān),許多人對(duì)LCSM的三維光學(xué)傳遞函數(shù)與探測(cè)器前方針孔直徑之間的關(guān)系進(jìn)行了研究[1112]。結(jié)果表明[11],該針孔直徑不必非常小。當(dāng)針孔直徑恰好等于一個(gè)愛里斑所成像的大小時(shí),探測(cè)器接收到的光能量較高,既可以提高信噪比,又不會(huì)對(duì)分辨率造成特別大的影響。愛里斑經(jīng)過無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)放大后,其像的大小為:
其中,β為系統(tǒng)的放大倍率,λ為入射光波長(zhǎng),NA為數(shù)值孔徑。已知β=40倍,λ=405 nm,NA=0.95,根據(jù)式(1)計(jì)算得到愛里斑像的大小約為20 μm。因此,該系統(tǒng)選用20 μm針孔直徑。取樣間隔遵循的原理是奈奎斯特采樣定理,將愛里斑作為周期信號(hào),能夠區(qū)分兩個(gè)愛里斑的取樣間隔為0.25個(gè)愛里斑直徑,將取樣間隔定位在100~125 nm之間,即可滿足還原高分辨率圖像的要求。
2.2數(shù)據(jù)分配消除隨機(jī)噪聲
隨機(jī)噪聲具有很寬的頻譜,若采用低通濾波,必然會(huì)造成圖像的高頻成分損失。傳統(tǒng)的做法是多幀平均,根據(jù)隨機(jī)噪聲互不相關(guān)的特點(diǎn),且均值為零,可以有效的壓縮噪聲。具體的方法就是在被測(cè)實(shí)驗(yàn)樣本熒光極弱的情況下可通過多幀平均的方法來提高信噪比。盡管納米位移臺(tái)的重復(fù)精度很高(小于5 nm),但是多幀平均會(huì)使掃描時(shí)間成倍增加,為了在一次掃描時(shí)間內(nèi)完成濾除隨機(jī)噪聲的任務(wù),提出了利用數(shù)據(jù)分配濾除隨機(jī)噪聲的方法,即在每一點(diǎn)附近采集多次,再將這些值累加或加權(quán)取平均得到該點(diǎn)的能量值。具體原理如下所述。
在任意時(shí)刻采集的數(shù)據(jù)為:
累加后的信噪比提高了K倍。
采集卡的型號(hào)是NI6120(12 bit),采樣率單位為S/s,表示每秒鐘采集的次數(shù)。最高采樣率可以達(dá)到10 000 000 S/s。當(dāng)采樣率足夠高時(shí),可以近似認(rèn)為在一點(diǎn)處取得的平均值,就每一行而言,具體采集方法如圖2所示。
若采集范圍為50 μm,需要500個(gè)像素,工作臺(tái)掃描速度為100 μm/s,當(dāng)采樣率設(shè)置為1 000 000 S/s時(shí),每行可以得到500 000個(gè)點(diǎn),取樣間隔為100 nm,每個(gè)間隔內(nèi)有1 000個(gè)采集點(diǎn)可供分配,若將1 000個(gè)采集點(diǎn)都取平均,相當(dāng)于低通濾波器掩膜尺寸太大,導(dǎo)致細(xì)節(jié)被濾掉,圖像變得很平滑。為了避免這種情況,只取其中的前十分之一的數(shù)據(jù),即100個(gè)采集點(diǎn)做加權(quán)平均,這100個(gè)采集點(diǎn)分布在10 nm范圍內(nèi),對(duì)分辨率不會(huì)造成影響。
如圖3所示,兩幅圖均取了50次平均,圖3(a)的采樣率為10 000 S/s;圖3(b)的采樣率為100 000 S/s可以看出隨著采樣率的提高,平滑效果減弱。事實(shí)上,當(dāng)采樣率可以設(shè)置為10 000 000 S/s時(shí),取樣平均的次數(shù)也可以增加,使均值趨于零。利用這種方法有效地濾掉了隨機(jī)噪聲,同時(shí)還保留了圖像細(xì)節(jié)。
3同步系統(tǒng)設(shè)計(jì)
3.1同步采集方法研究
該系統(tǒng)選用PI公司的3軸壓電陶瓷驅(qū)動(dòng)納米位移臺(tái),型號(hào)是P545,3個(gè)軸移動(dòng)范圍均為200 μm,由于具有長(zhǎng)量程和型面不高的特點(diǎn),非常容易整合進(jìn)高分辨率的顯微鏡內(nèi),并且位移精度可以達(dá)到1 nm,完全滿足高分辨成像的需要。
連續(xù)掃描是指工作臺(tái)可以從初始位置連續(xù)移動(dòng)到目標(biāo)位置,同時(shí)采集卡不間斷的采集數(shù)據(jù),因此,工作臺(tái)與采集卡實(shí)現(xiàn)同步尤為重要。工作臺(tái)P545的單向重復(fù)性優(yōu)于雙向。因此,采用如圖4所示的單向梳狀掃描路徑,并以100 μm/s的速度運(yùn)動(dòng)的,在這個(gè)速度下運(yùn)動(dòng),工作臺(tái)狀態(tài)比較穩(wěn)定。
采集卡需要工作在有限連續(xù)采集模式下,具體方法:給每一行分配一個(gè)指定大小的緩存區(qū),當(dāng)工作臺(tái)運(yùn)動(dòng)到每一行的目標(biāo)位置時(shí),恰好使采集到的數(shù)據(jù)填滿緩存區(qū),讀取后清空緩存區(qū);工作臺(tái)沿縱向只移動(dòng)步距,不采集數(shù)據(jù)。每行采集均重復(fù)此過程,采集卡在該模式下工作,沒有任何數(shù)據(jù)被覆蓋掉。除此之外,為了實(shí)現(xiàn)工作臺(tái)運(yùn)動(dòng)與數(shù)據(jù)采集同步,還需將工作臺(tái)與采集卡參數(shù)匹配設(shè)置,表1列舉了一些工作臺(tái)與采集卡設(shè)置的參數(shù),根據(jù)不同的需求,選擇合適的掃描范圍。其中,掃描范圍、掃描速度與像素?cái)?shù)目決定了成像時(shí)間,掃描范圍與像素?cái)?shù)目決定了取樣間隔,繼而影響了分辨率,表1給出的參數(shù)滿足實(shí)現(xiàn)高分辨率成像的要求。根據(jù)實(shí)際情況對(duì)分辨率的不同要求,調(diào)整表中的參數(shù),在相同掃描范圍與像素?cái)?shù)目下,采樣率越高,賦值范圍越小,去噪效果越好。
3.2系統(tǒng)軟件設(shè)計(jì)
為數(shù)據(jù)同步采集模塊的軟件設(shè)計(jì)流程圖。首先,設(shè)置工作臺(tái)掃描速度與掃描范圍;然后,設(shè)置采樣率,使采樣率、掃描速度和掃描范圍完全匹配,即保證工作臺(tái)運(yùn)動(dòng)到目標(biāo)位置時(shí),采集卡緩存區(qū)剛好被填滿,其中,循環(huán)次數(shù)由像素?cái)?shù)決定。
操作控制界面如圖6所示,主要包括光源控制模塊、采集參數(shù)設(shè)置、工作臺(tái)控制器參數(shù)設(shè)置、實(shí)時(shí)顯示模塊。
4實(shí)驗(yàn)結(jié)果
本文所研究的顯微鏡實(shí)驗(yàn)裝置如圖7所示,鑒于穩(wěn)定性的要求,加工了三維支架,保證了絕對(duì)水平和垂直。為了方便尋找細(xì)胞,將分光鏡分離的另一束光成像在CCD上,并且在工作臺(tái)下方安裝了粗調(diào)X,Y兩個(gè)方向的底座。
實(shí)驗(yàn)中所采用的樣品是老鼠腦細(xì)胞,細(xì)胞的平均尺寸約為10 μm。將表1中的參數(shù)輸入軟件中,完成圖像掃描,可獲得如圖8(b)所示的共焦掃描圖像,并與蔡司寬場(chǎng)顯微鏡對(duì)該細(xì)胞拍攝的圖像進(jìn)行對(duì)比,如
5結(jié)論
本文研制的基于工作臺(tái)連續(xù)運(yùn)動(dòng)的LCSM系統(tǒng),完成了系統(tǒng)控制和數(shù)據(jù)采集的任務(wù),利用有限連續(xù)采集模式,解決了機(jī)械控制與數(shù)據(jù)采集難以同步的問題,并在此基礎(chǔ)上完成了軟件系統(tǒng)的開發(fā)工作。與傳統(tǒng)的多幀取平均掃描方式相比,大大地提高了成像速度。本文所述的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是在納米位移臺(tái)單向掃描方式下獲得的,若納米位移臺(tái)雙向重復(fù)性好,能夠?qū)崿F(xiàn)雙向掃描,還可以進(jìn)一步提高成像速度。
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【關(guān)鍵詞】納米材料生物醫(yī)學(xué)生物安全性
一、引言
納米材料主要是指結(jié)構(gòu)單元在納米尺寸范圍(1~100nm)內(nèi)的一類材料,由于表面原子具有很大的比表面積,其表面能極高,從而獲得較多的表面活性中心,化學(xué)性質(zhì)十分活潑,因此納米材料通常具有特異的性能。納米材料的發(fā)現(xiàn)始于20世紀(jì)80年代初期,隨后人們逐步發(fā)現(xiàn)其在光學(xué)、磁學(xué)、電學(xué)和力學(xué)方面具有比普通材料更加優(yōu)越的特性,進(jìn)而得到了多個(gè)領(lǐng)域的關(guān)注并逐漸發(fā)展起來,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境、航空航天和石油鉆探等領(lǐng)域的研究。尤其是在生物醫(yī)學(xué)方面,基于納米技術(shù)的藥物和傳感器已經(jīng)應(yīng)用到實(shí)際的醫(yī)學(xué)應(yīng)用中,而且能夠得到是理想的治療和診斷結(jié)果。通過從納米尺度進(jìn)行精確地制備納米材料,人們打開了更小的微觀世界,特別是生物體細(xì)胞層面上的化學(xué)反應(yīng)都發(fā)生在納米的度,納米材料的使用能有效地檢測(cè)或調(diào)控微觀的生理和病理過程。納米材料發(fā)展對(duì)醫(yī)學(xué)診斷和醫(yī)學(xué)治療具有重大意義,已經(jīng)成為醫(yī)學(xué)界關(guān)注的熱點(diǎn)和前沿,具有廣泛的應(yīng)用前景和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展空間[1]。
二、納米材料在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用
2.1納米生物傳感器
納米生物傳感器是一種由納米材料制成的檢測(cè)裝置,主要根據(jù)將檢測(cè)到的信息按一定規(guī)律變換為電信號(hào)或以其他的形式輸出,使人們能定量定性地分析檢測(cè)物質(zhì)。生物傳感器的研發(fā)中人們使用納米材料,能夠提高生物傳感器的靈敏度以及檢測(cè)范圍。同時(shí)以納米材料制備的新型傳感器具有穩(wěn)定性好,成本低,生物相容性好等優(yōu)點(diǎn),在醫(yī)學(xué)的臨床診斷方面得到了高度重視,特別是作為一項(xiàng)新興的前沿技術(shù),納米生物傳感器的研發(fā)能夠進(jìn)行早期癌癥的診斷。納米傳感器可以利用高靈敏度的特點(diǎn),在血液中可通過微小的電流變化反映出癌細(xì)胞的種類和濃度。這種對(duì)癌細(xì)胞進(jìn)行的精確分析,有望實(shí)現(xiàn)特殊疾病的無創(chuàng)、快速診斷,今后人們只需將納米材料注入人體內(nèi),便能在短時(shí)間內(nèi)完成確診。
2.2納米生物成像技術(shù)
在臨床診斷中,通過對(duì)生物體內(nèi)的細(xì)胞或特定組織進(jìn)行直觀的圖像分析,能夠迅速高效且準(zhǔn)確地獲得生理和病理信息。隨著納米技術(shù)的飛速發(fā)展,新型的納米材料被不斷制備出來,并且廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)成像領(lǐng)域。碳納米管具有良好的發(fā)光性能,而且毒性極低,具有良好的生物相容性,能夠制備成生物熒光探針用于癌細(xì)胞的成像[2]。氧化鐵磁性材料具有良好的超順磁性,能夠應(yīng)用于核磁共振成像的研究中,由于其能在生物體內(nèi)特異性的分布,該部位的腫瘤與正常組織的對(duì)比度能夠顯著提高。目前氧化鐵磁性材料可作為造影劑廣泛應(yīng)用于臨床的腫瘤及其他疾病的診斷[1]。另外,稀土離子摻雜的納米材料具有良好的光學(xué)性質(zhì),能夠?qū)崿F(xiàn)多種顏色的可調(diào)發(fā)光,同時(shí)能夠避免生物體自身產(chǎn)生的熒光干擾,極大地提升光學(xué)成像效果。總之,在未來的生物成像領(lǐng)域,新型功能的納米材料將發(fā)揮至關(guān)重要的作用。
三、納米材料在醫(yī)學(xué)治療中的應(yīng)用
3.1納米載藥技術(shù)
納米載藥是指首先制備納米級(jí)的載體,荷載藥物后輸入人體,最終在人體內(nèi)控制釋放的技術(shù)。作為一種新型的給藥技術(shù),納米載藥是多學(xué)科包括藥理學(xué)、化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)交叉研究發(fā)展的產(chǎn)物,其最大的優(yōu)點(diǎn)是具有靶向性和緩釋性。靶向性可以使給藥更加精確,不僅可以在增加生物體局部藥物濃度的,而且同時(shí)可以控制其他部位的藥物濃度,減少對(duì)其他組織部位的副作用。緩釋可在保證藥效的前提下減少藥量,同時(shí)減少用藥頻率,進(jìn)而減輕藥物引起的不良反應(yīng)。對(duì)于某些難溶性藥物,納米藥物載體可有效減小藥物粒徑,從而增加其溶解度和溶出度,提高藥物的溶解性提高治療效果。另外,納米載體提供了封閉包覆環(huán)境,藥物能在到達(dá)作用部位之前盡量保持自身結(jié)構(gòu)的完整性,維持較高的生物活性。目前,能夠作為藥物載體的納米材料有介孔二氧化硅、納米多孔硅和碳納米管等,盡管短時(shí)間內(nèi)對(duì)生物體無毒性,但其在生物體內(nèi)的降解情況不理想。為了提高藥物載體的降解特性,人們開始關(guān)注更易體內(nèi)分解的高分子納米材料,如聚合乳酸、乳酸-乙醇酸共聚物、聚丙烯酸酯類等,這些材料能在人體內(nèi)可水解,降解成無毒產(chǎn)物,是十分有發(fā)展前景的藥物載體。
3.2納米生物醫(yī)用材料和納米生物相容性器官
納米材料和生物組織在尺寸上存在著密切的聯(lián)系,如核酸指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成過程種形成的核糖核酸蛋白的尺寸就在15-20nm之間,影響人體健康的病毒尺寸也在納米的范圍之內(nèi)。納米材料和生物醫(yī)學(xué)的緊密結(jié)合,制備納米醫(yī)用復(fù)合材料及相容性器官,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)治療的研究中,如制備人造皮膚、血管以及組織工程支架等[3]。在人造骨中,納米鈦合金具有促進(jìn)骨細(xì)胞發(fā)育的功能,使骨細(xì)胞緊密貼壁生長(zhǎng),同時(shí)加速材料和組織的融合。同時(shí),納米級(jí)的羥基磷灰石或聚酰胺復(fù)合骨充填材料可以有效填補(bǔ)骨缺損,具有良好的生物相容性,并且能夠促進(jìn)骨細(xì)胞生長(zhǎng)。根據(jù)血液中的紅細(xì)胞具有運(yùn)載氧氣的功能,人們開發(fā)出納米級(jí)的人造紅細(xì)胞,實(shí)現(xiàn)了比普通紅細(xì)胞更高的氧氣運(yùn)載能力。如果人體心臟因意外而停止跳動(dòng),可以立刻注入人工的納米紅細(xì)胞,提供更加充足的氧氣[4]。此外該技術(shù)在貧血癥和呼吸功能受損的治療中發(fā)揮著重要的作用。
四、納米材料的生物安全性問題
隨著科技水平的不斷提升,納米材料在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域越來越廣泛,但是納米材料與人類接觸的過程中依然受到安全性問題的困擾。某些納米材料可以穿透皮膚,透過細(xì)胞膜破壞正常細(xì)胞引發(fā)炎癥,造成免疫、生殖和腦部組織的損傷,如超小的TiO2納米顆粒能引起嚴(yán)重的呼吸道組織變化,導(dǎo)致上皮組織滲透性增加,引起多種炎癥。此外,許多物質(zhì)在普通條件下并無生物毒性,而在降低到納米尺寸下材料因難以通過正常代謝途徑排出體外表現(xiàn)出蓄積毒性,因此納米材料的生物安全性是亟需解決的問題。目前已經(jīng)很多科研工作者積極致力于研究納米材料的安全性問題,研究發(fā)現(xiàn)碳基納米材料(如碳納米管和石墨烯)會(huì)引起生物體內(nèi)細(xì)胞膜磷脂的破壞,造成結(jié)構(gòu)損傷破壞,引起細(xì)胞的功能異常;金屬氧化物(氧化鋅和二氧化鈦)易發(fā)生氧化還原反應(yīng),因該過程會(huì)釋放電子,會(huì)產(chǎn)生一定的細(xì)胞毒性,而且其納米材料的尺寸越小,其比表面積越大活性越高,產(chǎn)生的電子所引起的毒性越強(qiáng)[5]。為了真正實(shí)現(xiàn)納米材料在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用,人們采取了一系列策略降低納米材料的毒性,如對(duì)納米材料進(jìn)行表面修飾提高其生物相容性,降低材料的使用劑量和暴露時(shí)間,調(diào)整納米材料的反應(yīng)環(huán)境,以及開發(fā)可降解的納米材料。但是大多數(shù)納米材料的毒性問題依然沒有徹底解決,其生物安全問題依然是限制納米材料臨床使用的重要因素。
本書是關(guān)于太赫茲物理學(xué)的一部適于大學(xué)生教學(xué)采用的教材,是對(duì)科學(xué)與工程專業(yè)的學(xué)生首次展示這一新領(lǐng)域的第一部著作。它涵蓋了很少被深入探索過但內(nèi)容異常豐富的這一特殊電磁波段的物理學(xué)知識(shí)。作者以一種清晰的寫作風(fēng)格,側(cè)重于理解太赫茲頻率的基本物理原理和應(yīng)用,具有適當(dāng)?shù)纳疃群蛨?jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。作者按照教學(xué)需要把全書內(nèi)容劃分為部分、章和節(jié)。為了適應(yīng)不同的學(xué)習(xí)風(fēng)格,書中提供有豐富的圖表,簡(jiǎn)潔表達(dá)的數(shù)學(xué)語言和說明抽象概念的眾多例題。在書中的適當(dāng)?shù)胤蕉⒎嵌荚谡?、?jié)末尾編排了大量的練習(xí)題,求解這些習(xí)題可以提供對(duì)于新概念的實(shí)踐機(jī)會(huì)和最好的學(xué)習(xí)方法。在每一章的結(jié)束對(duì)于關(guān)鍵術(shù)語、關(guān)鍵方程和重要的符號(hào)表給出簡(jiǎn)要的總結(jié)。
全書內(nèi)容分成3個(gè)部分,11章。1.引言。其后是第1部分 基礎(chǔ),含第2-6章:2.振蕩;3.組合振蕩;4.光;5.物質(zhì);6.光與物質(zhì)的相互作用。第2部分 組件,含第7-9章:7.源;8.光學(xué);9.探測(cè)器。第3部分 應(yīng)用,含第10-11章:10.光譜學(xué);11.成像.全書末尾附有術(shù)語詞表。
這本書內(nèi)容新穎、敘述通暢、概念精確,解釋明確,例證和插圖極富啟發(fā)性,非常適合高年級(jí)本科選修課以及從事太赫茲物理相關(guān)專業(yè)學(xué)習(xí)的研究生課程選作教材。此外,本書假設(shè)讀者具備諸如復(fù)數(shù)、向量、偏導(dǎo)數(shù)、二重積分等基礎(chǔ)數(shù)學(xué)知識(shí)。作者使用這些簡(jiǎn)單的數(shù)學(xué)工具非常巧妙地?cái)⑹鰪?fù)雜的現(xiàn)代概念,很適合讀者自學(xué)。
光學(xué)相干斷層成像(opticalcoherencetomography,OCT)是一種新型光學(xué)成像技術(shù),其應(yīng)用近紅外光干涉成像,使用干涉儀記錄不同深度生物組織的反射光,通過計(jì)算機(jī)構(gòu)建能夠讓人簡(jiǎn)單識(shí)別的圖像,具有較高的分辨率。自2000年開始應(yīng)用于在體冠狀動(dòng)脈病變檢測(cè)以來,OCT以其較高的安全性和極高的分辨率在世界范圍內(nèi)迅速普及,從最初作為冠狀動(dòng)脈造影的替補(bǔ)逐漸成為血管內(nèi)檢測(cè)技術(shù)的主力之一。
1、1OCT在冠狀動(dòng)脈中的應(yīng)用
OCT可在體觀察冠狀動(dòng)脈粥樣斑塊的特點(diǎn),進(jìn)而可幫助我們判定斑塊的穩(wěn)定性,對(duì)病變風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估做出準(zhǔn)確的判斷。OCT檢測(cè)到的斑塊定義為三類:纖維斑塊、纖維鈣化斑塊及脂質(zhì)斑塊。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn),OCT的檢測(cè)結(jié)果與病理學(xué)對(duì)照表現(xiàn)出較高的一致性,OCT對(duì)脂質(zhì)斑塊和纖維鈣化斑塊的敏感性和特異性分別是90%和92%,96%和97%;對(duì)纖維斑塊的敏感性和特異性分別為79%和97%。因此,OCT也獲得了“光學(xué)活檢”的美譽(yù)。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂及血栓形成是大多數(shù)急性冠狀動(dòng)脈綜合征的原因。因此,檢測(cè)具有高破裂風(fēng)險(xiǎn)的斑塊(即易損斑塊),對(duì)預(yù)防急性冠狀動(dòng)脈綜合征的發(fā)生有著重要的意義。易損斑塊的主要特征之一是薄纖維帽,在一項(xiàng)對(duì)比OCT、IVUS,以及冠狀動(dòng)脈血管鏡(coronaryangioscopy,CAS)的研究中,OCT是唯一能夠進(jìn)行精確測(cè)量易損斑塊纖維帽厚度的檢查手段。在體OCT研究也發(fā)現(xiàn)急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者使用OCT所測(cè)量得到的纖維帽厚度明顯小于那些穩(wěn)定型心絞痛患者。除纖維帽厚度之外,易損斑塊的另一特點(diǎn)就是大的脂質(zhì)核心。一般認(rèn)為脂質(zhì)核心的大小與斑塊的穩(wěn)定性相關(guān),脂核越大,穩(wěn)定性越差。OCT圖像中,大脂質(zhì)核心的斑塊顯示為模糊邊緣的低密度信號(hào)。同時(shí)OCT對(duì)脂質(zhì)成分的檢測(cè)準(zhǔn)確性也明顯優(yōu)于IVUS。在上述基礎(chǔ)上,OCT定義了薄帽纖維粥樣斑塊(thincapfibro-atheromas,TCFA),即OCT圖像顯示脂核角度≥2個(gè)象限和纖維帽厚度<65μm的脂質(zhì)斑塊。OCT對(duì)斑塊破裂的定義為斑塊纖維帽的連續(xù)性中斷,并在斑塊上形成空腔或伴有血栓形成。在對(duì)ST段抬高性急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者的研究中發(fā)現(xiàn),使用OCT能觀察到73%的斑塊破裂,IVUS只觀察到了40%,而CAS是47%。如果僅僅是內(nèi)皮連續(xù)性的中斷,繼發(fā)形成血栓,則稱為管腔侵蝕(erosion)。OCT檢測(cè)侵蝕在急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者罪犯病變的發(fā)生率為16.3%,亦是急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者管腔內(nèi)血栓形成的重要機(jī)制之一。OCT檢測(cè)血栓無論從血栓成分、形態(tài)或位置上,均表現(xiàn)出了與病理學(xué)較高的一致性,OCT定義的紅色血栓呈現(xiàn)為突入管腔中信號(hào)不強(qiáng),高背反射并伴有陰影的組織圖像;白色血栓呈現(xiàn)為突入管腔中的強(qiáng)信號(hào),低背反射無陰影的組織圖像;混合血栓介于紅白血栓之間的反射信號(hào)。隨后的研究完善了OCT對(duì)血栓的定義,同時(shí)使斑塊和血栓的鑒別更加容易可靠。使用OCT發(fā)現(xiàn)100%的急性心肌梗死患者罪犯病變伴有血栓形成,而IVUS僅發(fā)現(xiàn)了33%。OCT還能夠識(shí)別脂質(zhì)斑塊中巨噬細(xì)胞的密度以及分布情況。巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)在OCT圖像所表現(xiàn)的是斑塊上的強(qiáng)反射信號(hào)。已有研究證實(shí)了OCT所采集的纖維帽上的巨噬細(xì)胞密度數(shù)據(jù)與病理學(xué)所獲得的數(shù)據(jù)具有很高的相關(guān)性。
2、頻域OCT相關(guān)新技術(shù)
頻域OCT采用光纖導(dǎo)管,成像速度是上一代時(shí)域OCT的10倍左右,掃描成像5mm的目標(biāo)血管只需要不到3s的時(shí)間,同時(shí)可獲得更多的有效清晰的截面數(shù)。并且由于掃描截面直徑由原來的8mm增加至10mm,使得OCT在左主干病變中的應(yīng)用成為了可能。分叉病變向來是冠狀動(dòng)脈支架置入失敗率較高的一種復(fù)雜病變,對(duì)這些病變的處理并沒有統(tǒng)一的最佳治療策略。分叉開口處的貼壁不良是分叉病變支架置入的一種常見現(xiàn)象,未貼壁小梁或者重疊支架處的藥物洗脫支架小梁的內(nèi)皮化會(huì)發(fā)生延遲,這兩種現(xiàn)象能夠被OCT很好地觀察到。在分叉病變支架置入過程中應(yīng)用OCT能夠觀察到主支血管和分支開口處的斑塊分布情況以及斑塊成分,這些信息都將對(duì)指引術(shù)者選擇適當(dāng)?shù)闹委煼桨妇哂兄匾囊饬x。
二、CAS
CAS是利用光學(xué)成像纖維直接在血管腔內(nèi)觀察血管壁的形態(tài)和顏色等來判定斑塊形狀、血栓、潰瘍、撕裂等情況。目前CAS仍需阻斷血管血流,操作過程有可能引起冠狀動(dòng)脈副損傷和血栓形成等并發(fā)癥,限制了CAS在冠狀動(dòng)脈疾病診治中的應(yīng)用。但CAS在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊和血栓的檢測(cè)中仍為一種重要研究手段。正常血管壁表現(xiàn)為均勻光亮的白色,而動(dòng)脈粥樣硬化斑塊在血管鏡下可呈現(xiàn)為白色和黃色。斑塊表面的顏色決定了斑塊脂質(zhì)成分含量的多少。平滑的白色斑塊因帶有相對(duì)較厚的纖維帽,多為穩(wěn)定斑塊;而黃色提示為斑塊富含脂質(zhì),覆蓋薄的纖維帽,多為易損斑塊。CAS也可用于檢測(cè)冠狀動(dòng)脈內(nèi)血栓。應(yīng)用CAS在大多數(shù)的急性心肌梗死患者冠狀動(dòng)脈內(nèi)均發(fā)現(xiàn)了紅色血栓。斑塊破裂部位形成的富含血小板的血栓常表現(xiàn)為白色顆粒樣,而富含紅血球的血栓則表現(xiàn)為紅色的不規(guī)則結(jié)構(gòu)。
三、多層螺旋CT
自多層螺旋CT(multi-slicedetectorspiralcompu-tedtomography,MSCT)投入臨床使用以后,利用MSCT技術(shù)評(píng)價(jià)冠狀動(dòng)脈管腔狹窄程度的研究一直備受關(guān)注。隨著技術(shù)的進(jìn)步,CT冠狀動(dòng)脈血管造影(coronaryCTangiography,CCTA)檢查已經(jīng)成為冠心病的重要篩查手段。CCTA通過靜脈注射碘對(duì)比劑,能直觀地顯示冠狀動(dòng)脈管腔內(nèi)外情況。應(yīng)用256層螺旋CT作為無創(chuàng)性檢查對(duì)冠狀動(dòng)脈狹窄診斷率較高。CCTA憑借著良好的圖像質(zhì)量,可以對(duì)低危及無癥狀人群冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度進(jìn)行檢測(cè),完成其在介入治療前的篩選,從一定程度上避免不必要的有創(chuàng)性冠狀動(dòng)脈檢測(cè)。應(yīng)用CCTA可判斷冠狀動(dòng)脈內(nèi)斑塊類型,根據(jù)CT值的不同來反映斑塊的病理組成。冠狀動(dòng)脈斑塊按CT值可分為三類:脂肪斑塊(軟斑塊)、纖維斑塊和鈣化斑塊。此外CCTA還可以清晰地顯示斑塊的形態(tài)、位置和范圍,從而對(duì)冠狀動(dòng)脈病變治療方案的確立提供幫助。
四、冠狀動(dòng)脈核磁成像
冠狀動(dòng)脈核磁成像(coronaryMRangiography,CMRA)具有無創(chuàng)、無輻射的優(yōu)勢(shì),憑借著其良好的組織對(duì)比度及任意的三維成像優(yōu)勢(shì),不僅能準(zhǔn)確診斷冠狀動(dòng)脈管腔的狹窄,血管壁的異常,而且對(duì)易損斑塊的診斷有著獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。由于冠狀動(dòng)脈較細(xì),容易被周圍脂肪組織掩蓋,且與周圍心肌、靜脈的信號(hào)相似,要想充分顯示冠狀動(dòng)脈需要利用一些特殊技術(shù)及脈沖序列。其中3.0T核磁共振對(duì)比增強(qiáng)全心冠狀動(dòng)脈成像技術(shù)對(duì)診斷冠狀動(dòng)脈病變具有較高的敏感性和特異性。目前對(duì)嚴(yán)重鈣化病變的診斷及動(dòng)脈粥樣硬化斑塊成分的鑒別已超過了CCTA。
五、冠狀動(dòng)脈病變生理學(xué)評(píng)價(jià)
無創(chuàng)評(píng)價(jià)心肌缺血的方法主要有運(yùn)動(dòng)負(fù)荷試驗(yàn)、核素心肌灌注顯像及藥物張力超聲心動(dòng)圖等。這些經(jīng)典的檢測(cè)手段對(duì)進(jìn)行篩查冠狀動(dòng)脈病變的患者十分有益。但在患者存在分支病變臨界病變等,無創(chuàng)檢測(cè)結(jié)果的實(shí)用價(jià)值表現(xiàn)出其有限性,既不能準(zhǔn)確地判斷罪犯病變特點(diǎn),也不能準(zhǔn)確地判定病變引起心肌缺血的程度。冠狀動(dòng)脈造影(coronaryangiography,CAG)、IVUS及OCT等有創(chuàng)性冠狀動(dòng)脈病變檢測(cè)手段僅依據(jù)影像學(xué)結(jié)果來判斷病變性狀及是否需要介入治療,不能從功能上準(zhǔn)確判斷病變與心肌缺血的相關(guān)性。
1、FFR
通過壓力檢測(cè)推算冠狀動(dòng)脈血流情況的新指標(biāo)———FFR,定義為存在狹窄病變的情況下,該冠狀動(dòng)脈所提供給心肌區(qū)域能獲得的最大血流量與同一區(qū)域在正常情況下所能獲得的最大血流量的比值。FFR在不受血壓、心率及心肌收縮力等情況的影響下,理論正常值為1.0。當(dāng)FFR值<0.75時(shí),對(duì)冠狀動(dòng)脈阻塞性病變檢測(cè)表現(xiàn)出較高的特異性和敏感性,確定病變誘發(fā)心肌缺血的特異性可達(dá)100%。FFR可直接評(píng)價(jià)受冠狀動(dòng)脈病變影響的血管供血生理,在CAG等檢測(cè)技術(shù)難以確定診斷時(shí),F(xiàn)FR可提供有效的信息幫助進(jìn)行診斷和制定治療策略。多項(xiàng)研究已證實(shí)基于FFR指導(dǎo)下的冠狀動(dòng)脈病變介入治療有著更好的臨床效果,F(xiàn)FR指導(dǎo)策略可減少支架使用的數(shù)量,減少了X線暴露時(shí)間及造影劑的用量,降低了手術(shù)相關(guān)費(fèi)用。
2、FFR在冠狀動(dòng)脈病變檢測(cè)中的應(yīng)用
關(guān)鍵詞 納米點(diǎn) 應(yīng)用
近幾年,射頻磁控濺射制備金屬納米顆粒復(fù)合膜是許多方法中最好方法之一,可以在可控條件下和低溫環(huán)境中獲得均勻的覆蓋薄膜,可以將金屬顆粒均勻分散到半導(dǎo)體襯底中,這樣就比其它方法更能有效的控制金屬含量,而使復(fù)合膜中的金屬量達(dá)到很高的值。也可以用生長(zhǎng)的Au/SiO2一維納米材料作為模板,基于VLS生長(zhǎng)機(jī)制催化生成理想的納米點(diǎn)或者納米線。這種用模板催化方式生長(zhǎng)納米線或者納米點(diǎn)的工藝較其它方法更簡(jiǎn)單。利用模板合成納米結(jié)構(gòu)的方法給我們創(chuàng)造了更好的條件來控制復(fù)合納米的性質(zhì),進(jìn)而在納米機(jī)械器件和納米電子制備方面有重要意義。本文淺述了納米點(diǎn)的可能的發(fā)展應(yīng)用前景并初探了自組裝生成Au納米點(diǎn)工藝。
一、復(fù)合材料納米點(diǎn)的發(fā)展應(yīng)用前景
納米點(diǎn),也稱半導(dǎo)體量子點(diǎn)(納米微晶),是一種比較小的納米微粒。納米微晶的基本性質(zhì)基于本身量子點(diǎn)的量子效應(yīng),當(dāng)微粒尺寸進(jìn)入到納米級(jí)別時(shí),將會(huì)引起宏觀量子隧道效應(yīng)、尺寸效應(yīng)和表面效應(yīng),進(jìn)而展現(xiàn)出許許多多不同于宏觀材料的物理化學(xué)性質(zhì),在生命科學(xué)、量子器件、醫(yī)藥等方面具有非常好的應(yīng)用前景,同時(shí)將對(duì)電子信息技術(shù)、生命科學(xué)的發(fā)展產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。
(一)在生命科學(xué)中的應(yīng)用
在生命科學(xué)領(lǐng)域納米微晶的主要應(yīng)用前景就是在生物科學(xué)中作熒光探針,傳統(tǒng)的熒光探針激光光譜窄,且不連續(xù),而納米微晶的激光光譜寬且連續(xù),顏色可調(diào),而且量子點(diǎn)的光化學(xué)穩(wěn)定性高,不易分解。同時(shí)納米點(diǎn)很有可能使篩選藥物成為可能。將不同光譜的納米點(diǎn)與不同靶分子的藥物相結(jié)合,就可以一次性檢測(cè)藥物分子。納米點(diǎn)還可以應(yīng)用在醫(yī)學(xué)成像方面。因?yàn)榭梢姽庵荒艽┩负穸葹楹撩准?jí)的組織,而紅外光線則可以穿透厚度為厘米級(jí)的組織,因此我們可將在紅外區(qū)發(fā)光的納米點(diǎn)標(biāo)記到要檢測(cè)組織的組分上,同時(shí)用紅外光激發(fā),通過成像的方法來檢測(cè)組織內(nèi)部的情況,從而達(dá)到診斷的目的。納米點(diǎn)在生物芯片發(fā)展歷程中也可以大顯身手。例如在研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的生物芯片中,盡管生物芯片上有非常非常多的蛋白質(zhì),可是由于受傳統(tǒng)熒光探針性能的限制,通常一次只能將一種或幾種標(biāo)記了熒光探針的蛋白質(zhì)與生物芯片相作用,從而進(jìn)行檢測(cè)。要研究多個(gè)蛋白質(zhì)就必須重復(fù)操作,降低了效率。如果我們?cè)谛酒膽?yīng)用中引入了納米點(diǎn)情況則可能不同,基本可以做到“很多”對(duì)“很多”。納米微晶還可以應(yīng)用于溶液矩陣,即將不同的納米點(diǎn)或納米點(diǎn)微粒標(biāo)記在每一種生物分子上,并置于溶液中,形成所謂溶液矩陣。進(jìn)行標(biāo)記了的生物分子在溶液狀態(tài)下很容易保持生物分子的正常三維構(gòu)象,從而具備了正常的生物功能,這是其優(yōu)于平面芯片的地方。
(二)半導(dǎo)體納米點(diǎn)的器件應(yīng)用
納米點(diǎn)的生長(zhǎng)工藝及其性質(zhì)成為當(dāng)今納米材料的研究熱點(diǎn),目前最常用的制備納米點(diǎn)的方法是自組織生長(zhǎng)方式。納米點(diǎn)中較低的態(tài)密度和能級(jí)的尖銳化,導(dǎo)致了納米點(diǎn)的結(jié)構(gòu)對(duì)其中的載流子產(chǎn)生三維量子限制效應(yīng),從而使其光學(xué)性能和電學(xué)性能發(fā)生了變化,而納米點(diǎn)在正入射情況下才能發(fā)生明顯的帶內(nèi)躍遷。這些性質(zhì)都使納米點(diǎn)在各種光電器件、單電子器件以及其他器件方面具有極為廣闊的應(yīng)用前景。
納米點(diǎn)復(fù)合材料及納米點(diǎn)激光器是半導(dǎo)體技術(shù)領(lǐng)域中的一個(gè)前沿性課題。納米點(diǎn)復(fù)合材料基于它的量子隧穿、尺寸效應(yīng)、以及非線性光學(xué)效應(yīng)等是新一代固態(tài)量子器件的基礎(chǔ),在未來的光電子學(xué)、新一代超大規(guī)模集成電路和納米電子學(xué)等方面有著極其重要的應(yīng)用前景。我們采用自組裝方法直接生長(zhǎng)納米點(diǎn)復(fù)合材料,可將納米點(diǎn)的橫向尺寸縮小到幾十納米之內(nèi),接近縱向尺寸,并可獲得無位借、無損傷的納米點(diǎn),現(xiàn)己成為納米點(diǎn)復(fù)合材料制備技術(shù)的重要手段之一,缺點(diǎn)就是納米點(diǎn)的均勻性不好控制。以納米點(diǎn)結(jié)構(gòu)為有源區(qū)的納米點(diǎn)激光器理論上具有更高的光增益、更寬的調(diào)制帶寬、更高的特征溫度和更低的閡值電流密度等優(yōu)點(diǎn),將使激光器件的性能有一個(gè)質(zhì)的飛躍,對(duì)未來半導(dǎo)體激光器件市場(chǎng)的發(fā)展方向產(chǎn)生巨大的影響。近幾年來,日本、歐洲、美國(guó)等國(guó)家都開展了自組裝納米點(diǎn)材料和納米點(diǎn)激光器件的研究,取得了很大進(jìn)展。
當(dāng)然在除了采用面發(fā)射激光器、納米點(diǎn)材料研制邊發(fā)射外,在其他的光電子器件上納米點(diǎn)也得到了非常非常廣泛的應(yīng)用。
二、自組裝法生長(zhǎng)Au納米點(diǎn)工藝
【關(guān)鍵詞】光電倍增管 性能研究 應(yīng)用研究 研究進(jìn)展
光電倍增管的縮寫為PMT,其是一種基于光電子發(fā)射、電子光學(xué)以及二次電子發(fā)射等理論,將微弱入射光轉(zhuǎn)變?yōu)楣怆娮油瑫r(shí)得到一定倍增的一種高靈敏性的增益器件。對(duì)于光探測(cè)領(lǐng)域而言,光電倍增管擁有著獨(dú)特超高的靈敏度,同時(shí)還擁有快速響應(yīng)等眾多技術(shù)優(yōu)勢(shì)。而光電子技術(shù)一定會(huì)發(fā)展成新的知識(shí)經(jīng)濟(jì),以此在新技術(shù)領(lǐng)域產(chǎn)生更多的生產(chǎn)力。
1 光電倍增管具有的特性
第一,暗電流。光電倍增管即使在沒有光入射的情況下,也有微弱電流流過。將其稱為暗電流。作為微小電流、微弱光使用的光電倍增管,希望暗電流盡可能小。因熱電子發(fā)射受到光陰極面的直接影響,因此使光電倍增管所具有的溫度加以降低,可以有效地降低暗電流。但是用冷卻法降低暗電流時(shí),只能減到漏電電流的水平,并不是可以無限制的降低暗電流。
第二,時(shí)間特性。對(duì)時(shí)間分辨率有較高要求的試驗(yàn),要求時(shí)間特性一定要好。一般上升時(shí)間被定義為輸出脈沖高度值從10%達(dá)到90%的時(shí)間。下降時(shí)間則反之,輸出從90%回到10%的時(shí)間。在響應(yīng)時(shí)間測(cè)試過程中,上升時(shí)間和下降時(shí)間測(cè)試條件很苛刻。脈沖輸出信號(hào)會(huì)發(fā)生波形失真的現(xiàn)象,容易引起誤差。而渡越時(shí)間是指從入射光入射到光陰極面起,到輸出脈沖出現(xiàn)為止的時(shí)間。
第三,穩(wěn)定性。穩(wěn)定性受到其自身特性、環(huán)境條件、光陰極面種類以及工作狀態(tài)等眾多因素所決定。造成光電倍增管出現(xiàn)輸出不穩(wěn)定現(xiàn)象的原因主要是光電倍增管內(nèi)殘余堿金屬、殘余氣體、焊接不良、接觸不良、跳火、結(jié)構(gòu)松動(dòng)以及極間放電等。北京濱松光子技術(shù)股份有限公司測(cè)試穩(wěn)定性時(shí),使用連續(xù)入射光,記錄直流輸出信號(hào)隨時(shí)間的變化。一般,光電倍增管的穩(wěn)定性在工作初期變化較大,隨時(shí)間推移而穩(wěn)定。因此應(yīng)用時(shí)建議先將光電倍增管穩(wěn)定(預(yù)熱)30分鐘后再進(jìn)入工作狀態(tài)。
第四,脈沖線性,光電倍增管所具有的一個(gè)非常重要的指標(biāo)便是脈沖線性,出現(xiàn)空間電流、電壓再分配、光電陰極所具有電阻率、信號(hào)電流導(dǎo)致的負(fù)載電阻出現(xiàn)負(fù)反饋等均會(huì)造成非線性狀況的發(fā)生。如果正常合理使用時(shí),多數(shù)的光電倍增管可以實(shí)現(xiàn)在較大范圍內(nèi)進(jìn)行線性工作。諸如北京濱松光子技術(shù)股份有限公司CR364型號(hào)的光電倍增管,當(dāng)其輸出偏離2%時(shí),脈沖線性可達(dá)100mA以上。可應(yīng)用于高能物理方面的研究。
2 光電倍增管應(yīng)用研究進(jìn)展
人們對(duì)于光電倍增管已經(jīng)研究了幾十年,其應(yīng)用的范圍也較為廣泛,如光學(xué)、自動(dòng)化等領(lǐng)域。隨著相關(guān)技術(shù)的進(jìn)一步改革和發(fā)展,其生產(chǎn)工藝、設(shè)備、技術(shù)水平也會(huì)逐步隨著更新,在參數(shù)上也得到不斷提高。在此基礎(chǔ)之上,還會(huì)出現(xiàn)很多具有特殊結(jié)構(gòu)和功能的光電倍增管。
楊昆(2013年)[1]提到,多陽極倍增管是一類新型光電輸出元器件,因其具有緊密空間構(gòu)造、低噪聲以及高增益等獨(dú)特性能,使其在列探測(cè)器以及位置探測(cè)器中擁有著非常廣泛的使用,特別是采取金屬通道結(jié)構(gòu)的倍增極結(jié)構(gòu)之后,多陽極倍增管所具有的性能獲得了極大的改善,每條輸出存在的串?dāng)_不大于2%,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)大量的應(yīng)用在陣列探測(cè)器中。日本HAMAMATSU研制的R5900系列的金屬通道形式的倍增極結(jié)構(gòu)是最為典型的器件,已經(jīng)在國(guó)際上取得了非常廣泛的應(yīng)用。
買買提吐送?買買提明(2013年)[2]提到,任何生物都是一個(gè)發(fā)光源,只是由于不同生物發(fā)光的能力都相對(duì)較弱,人們?nèi)庋弁ǔ6伎床灰?,才?huì)認(rèn)為生物不會(huì)發(fā)光。一般光強(qiáng)在幾百光子以下時(shí),被人們稱為是超微弱光。生物體所發(fā)出超微弱光的光強(qiáng)都是恒定不變的,如果光強(qiáng)發(fā)生了變化,則說明生物體發(fā)生了病變。因此,在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究通過利用光電倍增管制作探測(cè)光強(qiáng)的儀器,并利用生物體的這種特性來測(cè)試生物體是否發(fā)生了病變。所制作出來的這種儀器通常都會(huì)將設(shè)備前端制作成一個(gè)暗室的形式,這主要是因?yàn)樯矬w所發(fā)出的光較為微弱。
表面污染監(jiān)測(cè)儀包含全身α、β表面污染監(jiān)測(cè)儀(C2門)、手足α、β表面污染監(jiān)測(cè)儀和便攜式α、β表面污染測(cè)量?jī)x。之前該類產(chǎn)品采用的探測(cè)器為流氣式正比計(jì)數(shù)器,相比于閃爍計(jì)數(shù)器,其優(yōu)點(diǎn)是無本底。但由于需要充氣,需要攜帶儲(chǔ)存工作氣體的鋼瓶,進(jìn)而對(duì)儀器工作壽命和便攜性帶來了不足?,F(xiàn)在表面污染監(jiān)測(cè)儀逐漸采用閃爍計(jì)數(shù)法,通過光電倍增管和復(fù)合閃爍體(塑料閃爍體+ZnS(Ag))來對(duì)監(jiān)測(cè)對(duì)象表面α、β進(jìn)行計(jì)數(shù),進(jìn)而實(shí)現(xiàn)表面污染檢測(cè)。
北京濱松光子技術(shù)股份有限公司研制的小型端窗雙堿光電倍增管CR332型光電倍增管,采用環(huán)形聚焦+直線聚焦結(jié)構(gòu)(Circular and Linear-focused ,C+L),這個(gè)結(jié)構(gòu)兼具了環(huán)形聚焦結(jié)構(gòu)的緊湊與直線聚焦良好的線性特性,并且迎合市場(chǎng)小尺寸便攜式表面沾污儀的需求。受到市場(chǎng)的一致好評(píng)。CR332型光電倍增管具有高增益、高信噪比、高穩(wěn)定性、時(shí)間響應(yīng)快、低本底、能量分辨率好等諸多特性集于一身,主要應(yīng)用于核輻射測(cè)量、液位監(jiān)測(cè)、核素識(shí)別、手腳表面沾污儀、體外診斷等。
3 結(jié)語
綜上所述,光電倍增管作為諸多領(lǐng)域研究的重要探測(cè)工具,諸如分析化學(xué)、天文學(xué)、分子物理學(xué)、醫(yī)學(xué)成像以及高能物理學(xué)等。隨著今后科技的不斷進(jìn)步,光電倍增管能夠應(yīng)用的領(lǐng)域也將不斷地?cái)U(kuò)大,而其對(duì)科技進(jìn)步有著極大的推動(dòng)作用。
參考文獻(xiàn):
[1]Photomultiplier Tubes. HAMAMATSU (2015).
[2]楊昆,劉新新,李曉葦.基于硅光電倍增管探測(cè)器的小動(dòng)物正電子發(fā)射斷層成像裝置的研究進(jìn)展[J].山東醫(yī)藥,2013,06(13):95-96+98.
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