國(guó)慶教案精選(九篇)

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第1篇：國(guó)慶教案范文

1、讓幼兒初步了解中華民族關(guān)于國(guó)慶節(jié)日的有關(guān)知識(shí)，激發(fā)幼兒做一個(gè)中華小公民的自豪之情。

2、幼兒和全體家長(zhǎng)一起過(guò)節(jié)，體驗(yàn)節(jié)日的快樂(lè)。

3、感受第59個(gè)國(guó)慶節(jié)讓孩子們?cè)诠?jié)前感受節(jié)日的氣氛，展開(kāi)以“大中國(guó)我的家”為主題的一系列不同形式的活動(dòng)。

活動(dòng)準(zhǔn)備：

小國(guó)旗一面，小星星若干，墻面設(shè)計(jì)，幼兒節(jié)目，生日蛋糕一個(gè)

活動(dòng)過(guò)程:

1、老師和孩子們一起認(rèn)識(shí)了國(guó)旗和國(guó)徽，孩子們自己動(dòng)手制作國(guó)旗，孩子們驕傲地將自己做的五星紅旗展示給大家看。

2、小朋友們參加升國(guó)旗的儀式?？粗逍羌t旗冉冉升起，更為自己是一個(gè)中國(guó)人而感到驕傲。

3、老師帶領(lǐng)小朋友們認(rèn)識(shí)了我國(guó)各民族的服飾，和風(fēng)俗習(xí)慣，并帶孩子們一起跳了維吾爾族的舞蹈《大阪城的姑娘》，了解了不同民族有不同民族的文化，知道我國(guó)是一個(gè)有56個(gè)民族組成的土地遼闊富饒的國(guó)家。

4、做一個(gè)主題活動(dòng)，給祖國(guó)媽媽過(guò)生日，分享蛋糕

5、幼兒把自己做的五星紅旗可貼在活動(dòng)板區(qū)塊里，供大家一起欣賞，共同慶祝。

第2篇：國(guó)慶教案范文

生命對(duì)每次個(gè)人來(lái)說(shuō)都只有一次，都是值得我們?nèi)フ湎Ш蛺?ài)護(hù)。生命不是畫(huà)在紙上的圖畫(huà)，錯(cuò)了，可以重新畫(huà)過(guò);生命不是一顆長(zhǎng)青樹(shù)，不可以永遠(yuǎn)立在風(fēng)雨中，不可以橫沖直撞。正因生命如，我們就要更加注意安全，保重健康，健康是無(wú)法用金錢(qián)來(lái)買(mǎi)賣(mài)的。這就是我聽(tīng)完安全教育的最大感想。

這次的國(guó)慶節(jié)安全教育講座，第一個(gè)案例是一個(gè)13人組合的犯罪團(tuán)伙。作案已有兩百多例，都是以搶劫，偷盜為主。有一次，他們準(zhǔn)備搶劫，不聽(tīng)受害者勸告，反而惱羞成怒地將其推下河，幸好受害者會(huì)游泳，自己游上了岸。有些受害者不敢報(bào)案，所以他們作案的實(shí)際數(shù)字還沒(méi)有統(tǒng)計(jì)上來(lái)。據(jù)了解，這13人中有11人都生活在單親家庭，父母離婚。有一個(gè)家庭，爸爸死了，媽媽出走，只剩他和他爺爺，爺爺身體不好，沒(méi)有經(jīng)濟(jì)來(lái)源。所以，他養(yǎng)成了懶懶散散的習(xí)慣，想上學(xué)就上，慢慢地就和不良少年混在一起。

第二個(gè)案例是團(tuán)伙殺人案。某區(qū)的保安撥打了110，警察接到了電話(huà)，得知有人被刺傷。110馬上趕到現(xiàn)場(chǎng)，把受害人立即送往醫(yī)院。經(jīng)調(diào)查，是一幫不良少年，錯(cuò)傷到了他人。有一個(gè)王**在網(wǎng)上消息，要報(bào)復(fù)**。帶了十多個(gè)人，乘上了中巴車(chē)，到了兇案地，當(dāng)場(chǎng)殺傷三名中學(xué)生，一人重傷，兩人輕傷。案發(fā)后罪犯坐火車(chē)逃到重慶。過(guò)了一段時(shí)間，他們認(rèn)為沒(méi)事了，就陸續(xù)地回到貴陽(yáng)，結(jié)果全被公安機(jī)關(guān)抓獲。經(jīng)調(diào)查，他們的家庭也都是單親家庭。

家庭，父母，教育都很重要，如果教育不好，危害很大，離婚使孩子過(guò)早地嘗到苦澀，或把孩子當(dāng)成包袱。家長(zhǎng)把昔日的憐愛(ài)變成厭惡，把細(xì)心呵護(hù)變成不聞不問(wèn)。這樣一來(lái)對(duì)于未成年孩子來(lái)說(shuō)是無(wú)法承受的，所以他們就走向犯罪。人生，本來(lái)就是友善的，最重要的就是父母親的教育。不要因?yàn)榇笕碎g的矛盾，而影響孩子，使孩子走上犯罪的道路，走上歧途。

第3篇：國(guó)慶教案范文

一、工作目標(biāo)

確保國(guó)慶及十期間不發(fā)生較大及以上安全責(zé)任事故，確保不突破市政府下達(dá)我局的安全事故控制指標(biāo)，確保完成省、市下達(dá)的重大事故隱患整治任務(wù)，實(shí)現(xiàn)國(guó)慶及十期間交通運(yùn)輸安全。

二、組織領(lǐng)導(dǎo)

局成立以局黨組書(shū)記、局長(zhǎng)、局安委會(huì)主任龍學(xué)淵為組長(zhǎng)，局黨組成員、市公路局局長(zhǎng)，局黨組成員、副局長(zhǎng)、局黨組成員、總工程師牟德明為副組長(zhǎng)，局直屬各單位主要負(fù)責(zé)人和局機(jī)關(guān)科室負(fù)責(zé)人為成員的全市交通運(yùn)輸系統(tǒng)國(guó)慶及十期間安全生產(chǎn)工作領(lǐng)導(dǎo)小組，統(tǒng)一組織領(lǐng)導(dǎo)全市國(guó)慶及十期間交通運(yùn)輸安全工作。領(lǐng)導(dǎo)小組日常工作由局安辦負(fù)責(zé)。各區(qū)縣交通運(yùn)輸局、局直屬各單位成立由主要負(fù)責(zé)人任組長(zhǎng)的國(guó)慶及十期間安全生產(chǎn)工作領(lǐng)導(dǎo)小組。

三、責(zé)任分工

全市交通運(yùn)輸安全工作由局長(zhǎng)龍學(xué)淵負(fù)總責(zé)，局黨組成員、分管副局長(zhǎng)負(fù)綜合監(jiān)管領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任，承擔(dān)綜合協(xié)調(diào)、監(jiān)督、指導(dǎo)責(zé)任；其它局黨組成員按照“一崗雙責(zé)”的原則，對(duì)分管業(yè)務(wù)范圍內(nèi)交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作負(fù)直接領(lǐng)導(dǎo)責(zé)任。局直屬各單位主要負(fù)責(zé)人對(duì)本部門(mén)、本行業(yè)國(guó)慶及十期間交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作負(fù)總責(zé)。具體職責(zé)按照局安委會(huì)“一崗雙責(zé)”責(zé)任制分工執(zhí)行。

各區(qū)縣交通運(yùn)輸局主要負(fù)責(zé)人對(duì)本轄區(qū)內(nèi)國(guó)慶及十期間交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作負(fù)總責(zé)。

四、工作措施

（一）深入全面開(kāi)展安全生產(chǎn)大檢查。各單位要按照局《關(guān)于開(kāi)展國(guó)慶及十期間交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)大檢查的緊急通知》（市交函〔〕212號(hào)）部署，以更高標(biāo)準(zhǔn)、更嚴(yán)措施、更硬手段，全方位開(kāi)展安全生產(chǎn)大檢查行動(dòng)，重點(diǎn)督促企業(yè)開(kāi)展隱患排查治理工作。堅(jiān)決落實(shí)“誰(shuí)檢查誰(shuí)負(fù)責(zé)”的安全生產(chǎn)檢查責(zé)任制。

（二）認(rèn)真排查治理安全隱患。一是加強(qiáng)重大隱患排查治理。各區(qū)縣交通運(yùn)輸局、局直屬各單位要將此次排查出的重大隱患于9月28日前上報(bào)市局，由市局匯總上報(bào)市安委會(huì)掛牌督辦。二是加強(qiáng)公路隱患排查治理。市公路局結(jié)合這次省公路局安全大檢查一并對(duì)全市公路橋梁隱患及安保設(shè)施進(jìn)行一次全面排查，于9月28日前向局安辦上報(bào)年波形護(hù)欄建設(shè)任務(wù)完成情況。同時(shí)，各單位要結(jié)合局《關(guān)于做好中秋國(guó)慶兩節(jié)期間交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作的通知》（市交函〔〕211號(hào)）中的重點(diǎn)監(jiān)管內(nèi)容，加大隱患排查治理力度。

（三）嚴(yán)厲打擊非法違法行為。繼續(xù)深化“打非治違”專(zhuān)項(xiàng)行動(dòng)，保持高壓態(tài)勢(shì)，嚴(yán)格做到“四個(gè)一律”，即對(duì)非法生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)建設(shè)和停產(chǎn)整頓仍未達(dá)到要求的，一律關(guān)閉取締；對(duì)非法生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)建設(shè)的有關(guān)單位和責(zé)任人，一律按規(guī)定上限予以經(jīng)濟(jì)處罰；對(duì)存在非法生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)建設(shè)的單位，一律責(zé)令停產(chǎn)整頓，并嚴(yán)格落實(shí)監(jiān)管措施；對(duì)觸犯法律的有關(guān)單位和人員，一律依法嚴(yán)格追究法律責(zé)任。

（四）廣泛開(kāi)展宣傳教育。通過(guò)電視、宣傳欄、板報(bào)等宣傳形式，加大宣傳力度，開(kāi)展溫馨提示、應(yīng)急自救、互救知識(shí)宣傳和交通運(yùn)輸安全集中宣傳教育等活動(dòng)，提高安全意識(shí)和自我保護(hù)能力，讓安全深入人心，讓廣大職工和群眾深受教育。

（五）嚴(yán)格應(yīng)急值守。各區(qū)縣交通運(yùn)輸局、局直屬各單位要針對(duì)國(guó)慶及十期間交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作特點(diǎn)，制訂完善相關(guān)應(yīng)急預(yù)案，因地制宜落實(shí)好安全監(jiān)管措施。國(guó)慶及十期間，各單位主要領(lǐng)導(dǎo)原則上不得離開(kāi)轄區(qū)，確需離開(kāi)必須向市局分管領(lǐng)導(dǎo)請(qǐng)假并報(bào)主要領(lǐng)導(dǎo)同意后方可離開(kāi)。要嚴(yán)格執(zhí)行領(lǐng)導(dǎo)干部到崗帶班和24小時(shí)值班制度，嚴(yán)格執(zhí)行事故信息報(bào)告制度，一旦發(fā)生突發(fā)事件和事故險(xiǎn)情，按相關(guān)規(guī)定和程序及時(shí)上報(bào)并妥善處置，科學(xué)有效應(yīng)對(duì)。

五、工作制度

（一）認(rèn)真落實(shí)周例會(huì)制度。各單位要每周召開(kāi)一次交通運(yùn)輸安全例會(huì)，總結(jié)分析本周交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作進(jìn)展情況，研究制定下周重點(diǎn)工作，協(xié)調(diào)解決當(dāng)前交通運(yùn)輸安全生產(chǎn)工作中出現(xiàn)的有關(guān)問(wèn)題。例會(huì)要形成紀(jì)要存檔。

第4篇：國(guó)慶教案范文

為了加強(qiáng)愛(ài)國(guó)主義教育，增強(qiáng)學(xué)生愛(ài)國(guó)熱情，培養(yǎng)學(xué)生良好的愛(ài)國(guó)情操。在國(guó)慶周年到來(lái)之際，我校將組織全體少先隊(duì)員開(kāi)展以“迎國(guó)慶  頌祖國(guó)”為主題的系列教育活動(dòng)。

活動(dòng)一：組織各年級(jí)觀看愛(ài)國(guó)主義影片。

活動(dòng)二：“祖國(guó)在我心中”。為了提高我校學(xué)生了解、使用地圖的能力，自覺(jué)維護(hù)國(guó)家版圖的尊嚴(yán)，要求每個(gè)班張貼標(biāo)準(zhǔn)的中國(guó)地圖，老師上好一堂關(guān)于國(guó)家版圖知識(shí)的主題班會(huì)教育課。

活動(dòng)三：低年級(jí)國(guó)歌班班唱。本周利用音樂(lè)課和綜合實(shí)踐課時(shí)間各班統(tǒng)一唱國(guó)歌，以宏壯的歌聲迎接國(guó)慶。

活動(dòng)四：中年級(jí)書(shū)畫(huà)賽。本周請(qǐng)美術(shù)老師舉行看祖國(guó)變化書(shū)畫(huà)賽，優(yōu)秀作品在櫥窗展覽。

第5篇：國(guó)慶教案范文

歷經(jīng)了一個(gè)月緊張的工作與學(xué)習(xí)，我們迎來(lái)了十月一日的國(guó)慶節(jié)。今年是祖國(guó)母親61歲的生日，它是一個(gè)令全國(guó)人民矚目的節(jié)日，更是每一個(gè)中國(guó)人引以為榮的節(jié)日。為了慶祝這個(gè)盛大的節(jié)日，我校將舉行詩(shī)歌朗誦比賽，在此我先預(yù)祝比賽能取得圓滿(mǎn)的成功。為了歡度這個(gè)美好的節(jié)日，經(jīng)國(guó)務(wù)院安排，按上級(jí)文件精神，我校放假8天，具體時(shí)間為10月1日——10月8日。10月9日全體返校上課。

聽(tīng)到這個(gè)消息，同學(xué)們一定非常高興，也許已在心中構(gòu)思假日活動(dòng)了，為了讓你們這個(gè)假日過(guò)得充實(shí)而有意義，我在此向同學(xué)們提出幾點(diǎn)建議，希望同學(xué)們能接受并自覺(jué)遵守。

1、中秋節(jié)將至，但天氣還是比較炎熱，同學(xué)們不得私自或結(jié)伴到河邊、塘邊玩?；蛴斡荆h(yuǎn)離不安全場(chǎng)所，不參加沒(méi)有安全保障的活動(dòng)。

2、同學(xué)們?cè)诩乙貏e注意用火、用電、用氣的安全，防止在使用家電的觸電事故，防止使用液化氣時(shí)的泄露事故。要牢記火警、盜警和傷病急救電話(huà)，在發(fā)生意外事故時(shí)能獲取緊急救助。

3、國(guó)慶假期如外出旅游或外活動(dòng)時(shí)，必須由家長(zhǎng)帶領(lǐng)，選擇正規(guī)部門(mén)的交通工具，不乘坐“三無(wú)”車(chē)輛，特別是嚴(yán)禁搭乘無(wú)證駕駛或超速駕駛的摩托車(chē):請(qǐng)記住我站域名，時(shí)刻注意交通安全。十一長(zhǎng)假期間交通肯定是非常擁擠的，因此更有必要提醒我們的同學(xué)們?cè)趪?guó)慶假期中注意交通安全，在此提倡同學(xué)們做到以下幾點(diǎn)：不在馬路中間行走，要走馬路兩旁人行道；過(guò)馬路不得翻越欄桿和隔離墩，要走人行橫道線(xiàn)，還要注意來(lái)往車(chē)輛；在十字路口，要做到紅燈停、綠燈行；騎車(chē)不帶人、不在公路上騎飛車(chē)，乘車(chē)時(shí)不將頭手伸向窗外、乘車(chē)須抓緊扶手、車(chē)上擁擠時(shí)注意保管好隨身物品、車(chē)停穩(wěn)后再下車(chē)。

4、國(guó)慶期間，街上游人較多，尤其是有文藝演出活動(dòng)時(shí)，同學(xué)們要注意遠(yuǎn)離人員密集的場(chǎng)所，避免擁擠和踩踏事件的發(fā)生。

5、國(guó)慶假期要注意飲食和飲用水衛(wèi)生，不吃變質(zhì)食品，防止病從口入。尤其最近甲型h1n1傳染病比較嚴(yán)重，要多注意自己的衛(wèi)生。

6、國(guó)慶假期如父母外出不在家時(shí)，一定要提高警惕，防止壞人詐騙獨(dú)自在家的同學(xué)。

第6篇：國(guó)慶教案范文

【關(guān)鍵詞】慶安縣；紅辣椒；露地生產(chǎn)；技術(shù)規(guī)程

慶安縣是黑龍江省糧食生產(chǎn)區(qū)和全國(guó)商品糧大縣之一，連續(xù)8年被評(píng)為全省糧食生產(chǎn)先進(jìn)縣。自實(shí)施綠色食品經(jīng)濟(jì)戰(zhàn)略以來(lái)，綠色食品已成為慶安縣的一大增效名品，遠(yuǎn)銷(xiāo)國(guó)際市場(chǎng)，享譽(yù)國(guó)內(nèi)外。被國(guó)家確定為綠色食品生產(chǎn)保護(hù)區(qū)。到1997年，全縣綠色食品作物面積發(fā)展到14000hm2，綠色食品產(chǎn)量達(dá)到4.8萬(wàn)品種達(dá)到7個(gè)。其中慶安縣的美國(guó)紅辣椒露地生產(chǎn)技術(shù)也進(jìn)一步規(guī)范化。

1 環(huán)境條件

1.1 產(chǎn)地環(huán)境

產(chǎn)地環(huán)境良好，遠(yuǎn)離污染源，交通便利，并且有可持續(xù)生產(chǎn)能力的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)區(qū)域。

1.2 自然環(huán)境

1.2.1 溫度

無(wú)霜期110d以上，≥10℃活動(dòng)積溫2100℃以上，晝夜溫差大。發(fā)芽適溫，20～25℃，低于15℃發(fā)芽困難。

1.2.2 光照

辣椒屬短日照作物，在每天10～12h的光照條件下，開(kāi)花結(jié)果早而正常，但對(duì)較長(zhǎng)的日照也能適應(yīng)。要求中等強(qiáng)度的光照，光照不足會(huì)降低坐果率，強(qiáng)光直射，植株生長(zhǎng)減緩，果實(shí)易發(fā)生日灼病。

1.2.3 水分

根系較弱，既不耐旱也不耐澇，需經(jīng)常供應(yīng)水分才能生長(zhǎng)良好。但田間不能積水，田間積水少時(shí)植株就會(huì)萎蔫，嚴(yán)重時(shí)成片死亡。

1.2.4 土壤

選擇地勢(shì)較高、耕層深厚、透氣性好、肥沃、排灌方便的壤土或砂壤土為好，pH值為6.5～7.0，避免選擇低洼積水的地塊，忌與茄科作物連作。

2 整地與施肥

2.1 整地

秋翻秋整地：前作收獲后，及時(shí)滅茬施肥秋翻，整平耙細(xì)，耕層深18～25cm，及時(shí)起壟、鎮(zhèn)壓，達(dá)可定植狀態(tài)。整地應(yīng)達(dá)到“地平、土碎、墑足、壟齊”的標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 施肥

每畝施入優(yōu)質(zhì)農(nóng)家肥4000kg、過(guò)磷酸鈣30～40kg、硫酸鉀型復(fù)合肥30～40kg，廄肥均勻施入田內(nèi)，磷肥、復(fù)合肥集中施于移栽壟內(nèi)。當(dāng)基肥不足需追肥時(shí)，應(yīng)在培土前進(jìn)行追施，每667用250kg打碎的土雜肥拌入25～30kg硫酸鉀型復(fù)合肥、500g復(fù)合硼鋅肥，刨施在植株一邊，蓋好壓實(shí)，應(yīng)注意盡量不傷根系。

3 育苗移栽定植

3.1 溫室內(nèi)及溫室土壤消毒

⑴溫室消毒：每立方米用硫磺4g、鋸末8g混勻，放在容器內(nèi)燃燒，時(shí)間宜在晚上7時(shí)左右進(jìn)行，熏煙密閉24h。也可以按每立方米用25%百菌清1g、鋸末8g混勻，點(diǎn)燃熏煙消毒。⑵土壤消毒：營(yíng)養(yǎng)土選用肥沃園田土60%，腐熟無(wú)害化堆肥40%，兩者拌勻。按百菌清20g對(duì)細(xì)土20kg，拌成藥土，與剩余的營(yíng)養(yǎng)土充分拌勻備用。

3.2 浸種催芽

⑴浸種消毒：把種子放人清水浸泡10min，撈出再放人55℃熱水浸泡15min不斷攪動(dòng)至水溫降到30℃左右，撈出后用溫水浸泡15～24h。⑵催芽：浸泡好的種子撈出放在紗布上包好置于25～30℃的條件下催芽，每天翻動(dòng)、投洗1～2次。4～5d后，當(dāng)有60%種子出芽時(shí)即可播種。

3.3 播種

將經(jīng)過(guò)消毒的土壤裝入營(yíng)養(yǎng)缽中，裝入量為營(yíng)養(yǎng)缽體積的三分之二，當(dāng)日平均氣溫在5～6℃時(shí)即可播種，每缽播種2～3粒，播完種子以后覆土1.0cm，并澆透水。營(yíng)養(yǎng)缽要整齊地?cái)[放平整的苗床上。每667m2需苗床60，用種量約80g，根據(jù)溫室、大棚內(nèi)溫度情況也可扣小棚保溫保濕。

3.4 苗期管理

播種至出苗前要密封保溫，溫室內(nèi)白天溫度25～28℃，夜間18～20℃。出苗后及時(shí)將保濕的塑料膜揭開(kāi)，溫度降至21～25℃，一般情況下不需要澆水。心葉始現(xiàn)至2葉1心，苗床保持相對(duì)濕度不超過(guò)50%，少澆水，保持缽中營(yíng)養(yǎng)土見(jiàn)干見(jiàn)濕即可。當(dāng)苗高5～6cm后要逐漸通風(fēng)煉苗，控制秧苗高度，提高抗逆性，保證移栽成活率。

3.5 露地移栽定植

3.5.1 移栽定植時(shí)間

當(dāng)日平均氣溫穩(wěn)定通過(guò)10℃時(shí)開(kāi)始移栽定植，慶安地區(qū)一般在4月下旬至5月初進(jìn)行移栽定植。

3.5.2 起壟栽培

由于干辣椒生長(zhǎng)在整個(gè)夏季，高溫干旱或陰雨連綿，而辣椒根系較淺，極易造成病害流行和根系腐爛。起壟栽培，便于集中施肥，促進(jìn)植株盡快生長(zhǎng)，同時(shí)又可防止雨澇災(zāi)害。

3.5.3 定植密度

⑴采用大壟雙行栽培：壟距110 cm，行距40～50cm，壟高20～25cm，穴距15～20cm。每穴2株。⑵采用單行拐子苗栽培：壟距60～65cm，穴距25～30cm，每穴2株。

4 田間管理

4.1 鏟趟除草

整個(gè)生育期要做到三鏟三趟。鏟地時(shí)要鏟凈苗眼草；趟地時(shí)要逐漸培土，最后一遍要多培土。地膜覆蓋的地塊進(jìn)行壟溝人工除草。

4.2 灌水

定植后3～7d內(nèi)要澆一次緩苗水，水量不宜過(guò)大。緩苗后，結(jié)合第一次鏟趟進(jìn)行一次灌水；開(kāi)花時(shí)要少澆水或不澆水，待門(mén)椒坐住并開(kāi)始膨大時(shí)，結(jié)合追肥進(jìn)行灌水，保持土壤濕潤(rùn)。雨季來(lái)臨前應(yīng)培土扶壟，以利排水。視墑情及時(shí)澆水，雨后及時(shí)排水。

4.3 追肥

及時(shí)追肥，提倡配方施肥，除施足氮、磷、鉀三元復(fù)合肥外，每667還應(yīng)追施硼肥1kg、鐵肥2kg、鋅肥2kg、鉬肥2kg。做到追二次肥，門(mén)椒坐果肥：667m2施尿素8kg、硫酸鉀8kg。盛果期追肥：尿素6kg、二銨5kg、硫酸鉀8kg，追肥后澆水。結(jié)果后期進(jìn)行葉面追肥，用0.2%的磷酸二氫鉀等肥料進(jìn)行葉面噴灑。

4.4 整枝

門(mén)椒開(kāi)花前后將門(mén)椒以下的老葉和分杈全部去除，以利田間通風(fēng)透光和防止對(duì)椒以下分杈。

5 病蟲(chóng)害防治

5.1 農(nóng)業(yè)防治

（1）因地制宜選用抗（耐）病優(yōu)良品種。

（2）合理布局，實(shí)行輪作倒茬，加強(qiáng)中耕除草，剔除老葉、病葉，及時(shí)拔除中心病株，及時(shí)排澇，清潔田園，降低病蟲(chóng)源數(shù)量。

（3）培育無(wú)病蟲(chóng)害壯苗，播前種子應(yīng)進(jìn)行消毒處理。

（4）采用銀灰色地膜可以驅(qū)避蚜蟲(chóng)。

5.2 化學(xué)防治

辣椒整個(gè)生育期主要病害有炭疽病、疫病、病毒病。蟲(chóng)害有紅蜘蛛、蚜蟲(chóng)。定植初期用1∶1∶200（生石灰∶硫酸銅∶水）波爾多液防治真菌及細(xì)菌病害。

6 化控措施

當(dāng)辣椒初花期生長(zhǎng)過(guò)旺徒長(zhǎng)時(shí)，可用多效唑、矮壯素或縮節(jié)胺等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑進(jìn)行化控，為提高辣椒的坐果率，可用生長(zhǎng)素或防落素進(jìn)行處理，保花保果效果較好，上午10時(shí)以前抹花效果比較好。

7 采收

7.1 采收時(shí)間

辣椒一般在8月中旬開(kāi)始轉(zhuǎn)為紅色，當(dāng)85%果實(shí)轉(zhuǎn)紅時(shí)即可收獲。

7.2 采收標(biāo)準(zhǔn)

深紅色，無(wú)病斑、蟲(chóng)蛀、無(wú)霉?fàn)€變質(zhì)、無(wú)花皮椒，色素含量達(dá)標(biāo)。

第7篇：國(guó)慶教案范文

[關(guān)鍵詞]聚丙烯酰胺水凝膠；并發(fā)癥；取出方法（抽吸術(shù)）

[中圖分類(lèi)號(hào)]R622[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A[文章編號(hào)]1008-6455（2008）10-1439-03

Discusion of the method of suction to remove PAHG in the body

LI DE-xin,CAI Bing,ZHA Yuan-kun

(Department of Plastic Surgery, ZhuhaiPing'an Hospital, Zhuhai 519020 Guangdong,China)

Abstract： ObjectiveTo explored the complications of removing operations after injecting PAHG in order to remove it effectively and quickly. The place injected is better recover.It can avoid new and more large injury to patient.Methods110 patients had been treated from 1998.5 to 2008.3 who injected PAHG. Their clinical date were analyzed and put forward our opinion with the document. Results102 patients were cured by suction clinically；4 patients were cured by two suctions；4 patients by suction with operation. All suction-patients may apply together with lavation, squeeze or drain. Followed up 6～12 months, all patients after operations were well.ConclusionsThe method of suction is main way to remove PAHG, of course together with other methods in some patients.

Key words: polyacrylamide hydrogel（PAHG）;complications; suction

盡管?chē)?guó)家食品與藥品監(jiān)督管理局于2006年4月30日做出了撤消聚丙烯酰胺水凝膠作為注射用軟組織充填材料的醫(yī)療器械注冊(cè)登記的決定。但臨床上還遺留此前許多注射后并發(fā)癥的患者有待處理?，F(xiàn)將筆者于1998年5月～2008年3月，對(duì)注射PAHG后出現(xiàn)并發(fā)癥的110例患者，采用了抽吸，抽吸+灌洗+引流或切除等處理方法，效果滿(mǎn)意?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1臨床資料

本組110例。男性8例，女性102例；年齡18～55歲。其中，胸部82例，顳部11例，面、頰部5例，頦部5例，鼻部7例。一位患者可能同時(shí)有兩種以上并發(fā)癥。其中，外形不良者102例；疼痛、硬結(jié)者93例；PAHG明顯移位者11例；破潰并發(fā)嚴(yán)重感染者5例；注射部位反復(fù)腫脹者10例（顳部6例，胸部4例）。采用一次抽吸法（并用灌洗、擠壓或引流）治愈者102例；經(jīng)2次抽吸治愈者4例；抽吸結(jié)合手術(shù)治愈者4例。

2治療方法

2.1抽吸術(shù)：局麻，右手持18號(hào)硬膜外腰椎穿刺針，左手固定包塊，于皺襞下方皮膚刺孔進(jìn)針，經(jīng)皮下、乳腺至包塊，落空感后注入適量生理鹽水，再用20ml注射器抽吸，即見(jiàn)PAHG，如此反復(fù)操作至回抽液體清澈為止。遇多個(gè)包塊者需逐一處理。

2.2 抽吸+灌洗：抽吸方法同上。灌洗術(shù)，于的上、下緣處設(shè)計(jì)灌洗管的出入口。為隱蔽也可將上口位于腋前皺襞處。灌洗管為一輸液頭皮針管（管的中部剪幾個(gè)小孔），將管固定于沖洗腔內(nèi)，上、下兩端外露，上管接輸液器灌洗，每次灌洗量在1 000ml以上。次日仍需灌洗者，管的兩端應(yīng)暫時(shí)封閉。

2.3 抽吸+擠壓：對(duì)于大小不同，層次各異，數(shù)量不等的包塊，除應(yīng)用抽吸為主的方法外，有時(shí)輔助擠壓術(shù)，效果特好。其適用于孤立、較淺較小的包塊。方法是左手固定包塊后，右手用11號(hào)刀片將皮膚刺1～2mm小孔并直達(dá)包塊腔，擠捏流出PAHG, 鹽水沖洗干凈即可，切口不必縫合。

2.4 抽吸+手術(shù)切除：對(duì)于抽吸術(shù)無(wú)法達(dá)到的包塊或質(zhì)地較硬、不整，或懷疑有病變的包塊，則應(yīng)采用乳暈緣半弧形切口切除包塊。筆者取乳暈上半弧形切口取出的一例包塊經(jīng)病理證實(shí)為纖維瘤樣病變，病理意見(jiàn)為繼續(xù)觀察。術(shù)中見(jiàn)PAHG同包塊比鄰，但未見(jiàn)包塊包裹材料。此包塊發(fā)生原因以及同PAHG的關(guān)系，就本例材料無(wú)法確定。該例患者術(shù)后已追蹤10個(gè)月，尚無(wú)復(fù)發(fā)。

2.5 抽吸+引流：對(duì)有明顯感染的病例抽吸灌洗后還需按外科原則置放引流管。

3結(jié)果

3.1 本組110例。其中，102例經(jīng)一次抽吸并用灌洗、擠壓或引流達(dá)臨床治愈；4例經(jīng)2次抽吸而愈；4例抽吸結(jié)合手術(shù)而愈。手術(shù)病例中2例切口Ⅰ期愈合；2例切口邊緣部分壞死，傷口經(jīng)換藥而愈。本組病例術(shù)后隨診6～12個(gè)月，局部疼痛緩解或消失，硬結(jié)基本消退，軟硬度恢復(fù)正常，形態(tài)改善，達(dá)臨床治愈。

3.2 典型病例：某女,40歲 在外院注射PAHG隆胸已6年，近3個(gè)月增大、疼痛（圖2A ），局麻下抽出部分變性的乳腺組織（圖1）及已變性的PAHG（圖1）。抽吸術(shù)后1周疼痛基本消退，胸部情況（圖2B、C）。電話(huà)隨訪(fǎng)8個(gè)月，情況良好。

4討論

4.1 關(guān)于處理方法：對(duì)注射后并發(fā)癥的處理方法不外乎抽吸法和開(kāi)放式的手術(shù)切除法兩種。各自的主張者時(shí)有爭(zhēng)論[1-2]。筆者認(rèn)為：由于PAHG在體內(nèi)病理階段不同，因而處理方法各異。例如，未變質(zhì)的PAHG處于單一包膜腔時(shí)用抽吸法既簡(jiǎn)單又有效，極少發(fā)生新的并發(fā)癥。在此，應(yīng)強(qiáng)調(diào)術(shù)者掌握抽吸技巧特別重要。對(duì)材料已變質(zhì)，組織液化者（多為無(wú)菌性壞死）[3]用抽吸法+灌洗法效果較好。我們對(duì)一例材料變質(zhì)，腺體部分變性（圖1）的患者，采用較粗吸管抽吸+擠壓+灌洗+引流也取得良好效果。當(dāng)然，本例抽吸是有一定難度的，主要是吸管常被堵塞，手術(shù)持續(xù)了5個(gè)小時(shí)，一般抽吸病例只需約1個(gè)小時(shí)。PAHG可能有幾個(gè)抑或幾十個(gè)包塊時(shí)手術(shù)也難以切凈，因其包囊必須逐個(gè)打開(kāi)，才能擠出材料并灌洗干凈。組織一旦切開(kāi)，負(fù)壓?jiǎn)适?，抽吸則幾乎無(wú)效。乳暈緣下半部的弧形切口，對(duì)上方或近腋窩處的包塊也很難做到直視，完全除凈材料。除非擴(kuò)大切口將腺體、肌肉組織一并切除，這將造成患者難以接受的巨大畸形?；谏鲜銮闆r，對(duì)PAHG包塊采用抽吸并結(jié)合其他外科手段為宜。這一觀點(diǎn)是否正確有待更多的臨床實(shí)踐和科學(xué)檢驗(yàn)。

4.2 關(guān)于PAHG的毒性問(wèn)題：這也是長(zhǎng)期存在爭(zhēng)論的問(wèn)題。有作者認(rèn)為PAHG的毒性來(lái)自殘留的丙烯酰胺單體和生產(chǎn)過(guò)程中帶有的有毒重金屬。純凈的PAHG對(duì)哺乳動(dòng)物、水產(chǎn)物和農(nóng)田作物是無(wú)毒的。作為臨床工作者，筆者觀察到PAHG在體內(nèi)常達(dá)6年之久，還表現(xiàn)出明顯的毒性反應(yīng)（病例1）?；裘先A等[4]通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討PAHG應(yīng)用于人體的安全性。得出結(jié)論：PAHG對(duì)細(xì)胞及腎臟有不同程度的毒副作用。我們從大量臨床病例觀察，得出的印象是PAHG對(duì)人體具有低毒毒性?；谶@一認(rèn)識(shí)，如果能基本清除體內(nèi)的PAHG后，患者一般不會(huì)再發(fā)生排斥或毒性反應(yīng)。抽吸術(shù)是既簡(jiǎn)單又能達(dá)到基本清除PAHG的主要方法。這一認(rèn)識(shí)是否妥當(dāng)，有待同道更多的追蹤觀察和報(bào)道來(lái)驗(yàn)證。

[參考文獻(xiàn)]

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[2]岳 穎,欒 杰,喬 群,等.聚丙烯酰胺水凝膠注射隆乳術(shù)后取出方法探討[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2008,17（6）:805-807.

[3]王友彬,黃金井,喬 群,等.聚丙烯酰胺水凝膠注射后不良反應(yīng)的剖析[J].中華整形外科雜志,2003,19（5）:328-329.

第8篇：國(guó)慶教案范文

【關(guān)鍵詞】 維胺脂膠囊； 一清膠囊； 痤瘡； 臨床效果

中圖分類(lèi)號(hào) R758.73 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2016）24-0129-02

doi：10.14033/ki.cfmr.2016.24.074

隨著我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們對(duì)于醫(yī)療條件的要求也在逐漸提高，具體到痤瘡治療的方面，隨著人們對(duì)于痤瘡認(rèn)識(shí)的不斷加深，原本的治療方法在臨床治療的效果相對(duì)有限，已經(jīng)不能滿(mǎn)足患者的需要[1-3]。痤瘡因?yàn)槎嗖“l(fā)于青少年的面部，伴隨著粉刺、膿包等出現(xiàn)，而且易于發(fā)作，嚴(yán)重的可以在面部形成較大的疤痕，極大地影響人們的心理，對(duì)患者的身心造成極大地影響[4]。筆者所在醫(yī)院為加強(qiáng)對(duì)痤瘡治療的研究，隨機(jī)選取2014年12月-2015年12月于皮膚科就診的痤瘡患者50例，分為對(duì)照組和觀察組進(jìn)行對(duì)照治療，取得了很好的臨床效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取筆者所在醫(yī)院皮膚科2014年12月-2015年12月收治的痤瘡患者50例為研究對(duì)象。所有患者入院時(shí)均調(diào)查有無(wú)既往病史，保證治療前1個(gè)月內(nèi)未使用抗生素及含抗生素的藥物，未使用皮質(zhì)類(lèi)固醇激素以及維甲酸等藥物；排除有系統(tǒng)性的疾病、妊娠期、哺乳期的患者；患者的年齡保證在12周歲以上，能夠有效的接受治療；檢查患者的身體體征，保證其可以順利的完成相關(guān)的治療，并能及時(shí)的進(jìn)行復(fù)診和相關(guān)數(shù)據(jù)的采集。所有患者男25例，女25例，年齡18～45歲，平均（28.13±3.2）歲，病程3個(gè)月～6年。按照pillsburv標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分型，其中Ⅰ度患者為24例，Ⅱ度患者12例，Ⅲ度患者9例，Ⅵ度患者5例。將所選患者隨機(jī)分為觀察組與對(duì)照組各25例，其中對(duì)照組患者平均年齡（28.02±3.0）歲，觀察組患者平均年齡（28.31±3.4）歲。兩組患者的年齡、性別、病程及其身體體征等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

對(duì)照組的痤瘡患者給予口服維胺脂膠囊50 mg/次，3次/d，維胺脂膠囊為重慶華邦制藥股份有限公司生產(chǎn)，規(guī)格25 mg×24粒，治療過(guò)程中每周進(jìn)行1次復(fù)診，4周為一療程，記錄患者的皮損消退及其出現(xiàn)的副作用。

觀察組的患者給予維胺脂膠囊結(jié)合一清膠囊治療。口服維胺脂膠囊50 mg/次，3次/d，一清膠囊1.0 g/次，3次/d，維胺脂膠囊為重慶華邦制藥股份有限公司生產(chǎn)，規(guī)格25 mg×24粒，一清膠囊為成都康弘藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，規(guī)格0.5 g×30粒?；颊呙恐苓M(jìn)行一次復(fù)診，記錄其皮損狀況及用藥副作用。

兩組患者在進(jìn)行治療的期間，不能輔助其他藥物和方法進(jìn)行治療，保證研究的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)痤瘡患者治療前、治療中、治療后具體的粉刺、膿包、丘疹、囊腫、結(jié)節(jié)等消退的情況進(jìn)行記錄，對(duì)其整體的治療情況進(jìn)行針對(duì)性的綜合評(píng)價(jià)，判斷其療效。具體的標(biāo)準(zhǔn)為：皮損消退超過(guò)90%，炎癥狀況基本消失為痊愈；皮損消退70%～90%，不包含90%，炎癥明顯有好轉(zhuǎn)為顯效；皮損消退30%～69%，炎癥減輕為有效。皮損狀況消退在30%及以下，炎癥狀況無(wú)好轉(zhuǎn)為無(wú)效。總有效率=（痊愈例數(shù)+顯效例數(shù)+有效例數(shù)）/總例數(shù)×100%。另外自制問(wèn)卷，對(duì)患者的治療滿(mǎn)意度進(jìn)行調(diào)查，比較兩組患者對(duì)治療的滿(mǎn)意度。滿(mǎn)意度=（滿(mǎn)意例數(shù)+較滿(mǎn)意例數(shù)）/總例數(shù)×100%[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，以P

2 結(jié)果

2.1 兩組患者療效比較

所有患者總有效率為76.00%。兩組患者總有效率比較，觀察組優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.2 兩組患者不良反應(yīng)比較

觀察組的不良反應(yīng)率低于對(duì)照組，但是其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。

2.3 兩組患者治療滿(mǎn)意度比較

觀察組和對(duì)照組兩組患者對(duì)于治療的滿(mǎn)意度比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3 討論

新時(shí)期，隨著人們對(duì)于痤瘡認(rèn)識(shí)的加深，以及醫(yī)療技術(shù)的不斷進(jìn)步，單純利用的維胺脂膠囊治療痤瘡已經(jīng)不能滿(mǎn)足患者的需要，在治療效果上存在一定的局限性，不能很好的滿(mǎn)足患者的治療要求[6-8]。筆者所在醫(yī)院選取痤瘡患者50例，分為觀察組和對(duì)照組，對(duì)兩組患者采取不同的治療方法，其中對(duì)照組口服維胺脂膠囊，觀察組的患者在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上配合使用一清膠囊進(jìn)行聯(lián)合用藥，分別治療1個(gè)療程，期間每周對(duì)比兩組患者治療前、治療中、治療后粉刺、膿包、丘疹、囊腫、結(jié)節(jié)等消退的具體情況差異，并對(duì)兩個(gè)小組的患者進(jìn)行治療滿(mǎn)意度的調(diào)查。結(jié)果顯示觀察組患者實(shí)施維胺脂膠囊結(jié)合一清膠囊治療痤瘡的總有效率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。與此同時(shí)兩組患者對(duì)于治療的滿(mǎn)意度比較，觀察組顯著優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

綜上所述，維胺脂膠囊結(jié)合一清膠囊治療痤瘡有著很好的臨床效果，可以在臨床中推廣和應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

[1]鐘浩明，鄒興梅，張彩虹.異維A酸膠囊和0.1%阿達(dá)帕林凝膠治療尋常性痤瘡療效觀察[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2009，7（14）：6-7.

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第9篇：國(guó)慶教案范文

關(guān)鍵詞：過(guò)氧化氫；混合氨基酸；谷胱甘肽；發(fā)酵

中圖分類(lèi)號(hào)：TQ920.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1672-979X(2008)07-0019-04

Study on Effects of Mixed Amino Acids and Hydrogen Peroxide on Production of Glutathione by Saccharomyces cerevisiae

CHEN Shan, HE Xiao-xian, PAN Ya-lei

(College of Life Science and Engineering, Shaanxi University of Science and Technology, Xi’an, 710021, China)

Abstract：Objective To investigate the effects of mixed amino acids and hydrogen peroxide on the production of glutathione（GSH）by mutant strain YF（ZnCl2r, Ethr）. Methods At the shake flask level, the concentration of GSH and the weight of dry cell were measured with different adding amount of mixed amino acids and hydrogen peroxide at different time points. Results After fermentation for 9 hrs, mixed amino acids of 12mmol/L was added into the medium with the concentration of GSH to be increased by 99.6%. However, hydrogen peroxide could not obviously enhance the intracellular GSH level. After fermentation for 12 hrs, hydrogen peroxide of 0.3mmol/L and mixed amino acids of 18mmol/L were both added into the medium with the concentration of GSH to be increased by 114%. Conclusion Mixed amino acids can enhance the intracellular GSH accumulation in shaking flask culture and the synergy of mixed amino acids and hydrogen peroxide can also increase the intracellular GSH accumulation.

Key words：hydrogen peroxide; mixed amino acids; glutathione; fermentation

谷胱甘肽（glutathione，GSH），即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸，是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸經(jīng)肽鍵縮合而成，具有γ-谷氨?；蛶€基生物活性的一種三肽化合物。本課題用H2O2刺激突變株YF（ZnCl2r，Ethr），研究它對(duì)GSH合成的影響。

微生物細(xì)胞是一個(gè)經(jīng)濟(jì)的體系，不會(huì)在胞內(nèi)過(guò)量積累某一代謝產(chǎn)物。細(xì)胞只有處于不正常的生理狀態(tài)下，出于保護(hù)自身的本能和抵御外界傷害時(shí)，才會(huì)對(duì)其代謝產(chǎn)物做出調(diào)整。人為提供適當(dāng)?shù)沫h(huán)境刺激，極有可能促進(jìn)細(xì)胞合成目標(biāo)代謝產(chǎn)物的能力。Riccillo[1]指出在極端環(huán)境下GSH對(duì)Rhizobium tropici的生存起著至關(guān)重要的作用。Duwat[2]也說(shuō)明在L.lactis中外界脅迫作用下GSH對(duì)保護(hù)細(xì)胞生存具有重要意義。表明GSH在微生物細(xì)胞面臨外界環(huán)境條件刺激和脅迫時(shí)，存在至關(guān)重要的抵御作用和響應(yīng)機(jī)制，是細(xì)胞抗損傷及代謝調(diào)節(jié)的關(guān)鍵物質(zhì)之一?；诖嗽砝眠^(guò)氧化氫刺激細(xì)胞可提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)率。

此外，H2O2作為攜氧劑可以分解成水和氧氣，給細(xì)胞提供生長(zhǎng)和代謝所需的氧。突變株YF（ZnCl2r，Ethr）發(fā)酵是好氧發(fā)酵，添加H2O2的同時(shí)也起到提高溶氧的作用，有助于細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝[3]。加入H2O2還有細(xì)胞毒性低、成本低、操作簡(jiǎn)單及不會(huì)為產(chǎn)物分離帶來(lái)困難等優(yōu)點(diǎn)。

培養(yǎng)基中添加谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸可能會(huì)促進(jìn)酵母胞內(nèi)積累GSH。通常條件下的GSH發(fā)酵生產(chǎn)所需的這3種氨基酸是通過(guò)微生物細(xì)胞在糖類(lèi)代謝基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)一系列生化反應(yīng)后自身合成的，其合成途徑很容易受到細(xì)胞自身性能、狀況以及外界營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境條件的影響。添加氨基酸前體物質(zhì)可有效的解除限制GSH高產(chǎn)的因素。譚天偉等[4]在S.cerevisiae T65發(fā)酵生產(chǎn)GSH過(guò)程中，采取先加入半胱氨酸再加入谷氨酸、絲氨酸、甘氨酸混合物的策略，GSH含量達(dá)到1 875 mg/ L，比不加提高了55.2 %。在搖瓶條件下，我們考察了不同濃度和不同添加時(shí)間的氨基酸混合液對(duì)誘變得到的突變株YF（ZnCl2r，Ethr）細(xì)胞生長(zhǎng)和GSH合成的影響。這對(duì)利用酵母生產(chǎn)谷胱甘肽的研究有著重要意義。

1材料

1.1菌種

突變株YF（ZnCl2r，Ethr），由本院生物工程實(shí)驗(yàn)室保藏。

1.2試劑和培養(yǎng)基

保藏培養(yǎng)基（g／L）：葡萄糖20；蛋白胨20；酵母膏10；瓊脂1.5%~2%；pH自然，0.1 Mpa，滅菌15 min。

種子培養(yǎng)基（g／L ）：葡萄糖20；蛋白胨20；酵母膏10；pH自然，0.1 MPa，滅菌15 min。

發(fā)酵培養(yǎng)基（g／L）：（NH4）2SO46；葡萄糖35；K2HPO4?3H2O3；KH2PO40.5；酵母粉11；MnSO40.1；KCl0.1；FeSO40.1；MgSO4?7H2O0.1。

其他試劑均為進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)分析純。

1.3儀器及設(shè)備

GT10-1高速臺(tái)式離心機(jī)（北京時(shí)代北利離心機(jī)公司）；SW-CJ-1F型單人雙面凈化工作臺(tái)（蘇州凈化設(shè)備公司）；FA 2104S電子天平（上海電子天平儀器公司）；752紫外光柵分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠(chǎng)）；HZQ-F160振蕩培養(yǎng)箱（哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)公司）

2方法

2.1種子培養(yǎng)

用接種環(huán)劃線(xiàn)接種突變株YF（ZnCl2r，Ethr）菌種于保藏培養(yǎng)基的固體平板上，30℃培養(yǎng)24 h，即得所需種子。

2.2擴(kuò)大培養(yǎng)

250 mL三角瓶?jī)?nèi)裝10 mL液體培養(yǎng)基，挑取一環(huán)生長(zhǎng)良好的種子接種，150 r/min，30℃培養(yǎng)18 h，即得所需種子液。

2.3搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)

250 mL三角瓶?jī)?nèi)裝30 mL液體培養(yǎng)基，10％的接種量，150 r/min，30℃培養(yǎng)30 h，培養(yǎng)基初始pH 7.0。

2.4測(cè)定

生物量測(cè)定：取發(fā)酵液5mL，5 000r/min離心5 min，水洗2次，將濕菌體和離心管一起經(jīng)105 ℃烘干至恒重后稱(chēng)量W1，離心管經(jīng)105 ℃烘干至恒重后稱(chēng)量為WO，細(xì)胞量W(g)= W1-WO。谷胱甘肽測(cè)定用四氧嘧啶法[5]。

3結(jié)果

3.1添加氨基酸混合液對(duì)谷胱甘肽發(fā)酵的影響

根據(jù)搖瓶發(fā)酵合成谷胱甘肽的曲線(xiàn)，在發(fā)酵0，6，9，12，18 h時(shí)在發(fā)酵液中分別加入總濃度為6，12，18，24，30 mmol/L的3種氨基酸混合液（L-谷氨酸、L-半胱氨酸和甘氨酸，摩爾比為1∶1∶1），發(fā)酵30 h后測(cè)得細(xì)胞干重（圖1）和GSH濃度（圖2），根據(jù)單位質(zhì)量酵母產(chǎn)谷胱甘肽濃度求得GSH的含量（圖3）。

由圖可見(jiàn)氨基酸混合液對(duì)GSH的影響較大。圖1、圖2顯示，在發(fā)酵9 h時(shí)添加12 mmol/L的氨基酸混合液可有效的提高GSH濃度，并且細(xì)胞干重也有所提高，GSH濃度125.53 mg/L時(shí)，相比于對(duì)照（不添加氨基酸混合液，30 h測(cè)得GSH濃度為62.88 mg/L）提高了一倍多。由圖1可見(jiàn)，發(fā)酵不同時(shí)間段添加高濃度氨基酸混合液，會(huì)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，表現(xiàn)為細(xì)胞干重降低。在發(fā)酵6，18 h時(shí)添加氨基酸混合液前體對(duì)GSH合成的影響不大。

3.2過(guò)氧化氫對(duì)谷胱甘肽發(fā)酵的影響

由于細(xì)胞在生長(zhǎng)不同時(shí)期對(duì)H2O2的敏感度不同，因此，在GSH搖瓶發(fā)酵過(guò)程的不同階段，即發(fā)酵6，9，12，18 h，分別添加0.3，0.6，0.9，1.2，1.5 mmol/L濃度的H2O2，發(fā)酵30 h后測(cè)得細(xì)胞干重（圖4）和GSH濃度(圖5)，根據(jù)單位質(zhì)量酵母產(chǎn)谷胱甘肽的濃度求得GSH含量（圖6）。

由圖4、圖5可見(jiàn)，發(fā)酵6 h時(shí)添加不同濃度的H2O2，細(xì)胞干重和GSH濃度隨著H2O2濃度增加而降低。發(fā)酵12 h時(shí)添加0.3mmol/LH2O2，GSH胞內(nèi)含量和GSH產(chǎn)量較高，并且添加H2O2時(shí)的細(xì)胞干重和GSH濃度高于不添加H2O2（細(xì)胞干重8.36 g/L，GSH濃度62.88 mg/L），表明此時(shí)H2O2起了一定的作用。由圖6可見(jiàn)，在發(fā)酵18 h時(shí)添加H2O2對(duì)GSH胞內(nèi)含量和GSH濃度的影響不大， 對(duì)GSH發(fā)酵的影響明顯小于氨基酸混合液，但是添加H2O2可以提高GSH產(chǎn)率。為了獲得更高濃度的GSH，進(jìn)一步考察添加H2O2和氨基酸混合液共同作用對(duì)GSH發(fā)酵的影響。

3.3H2O2和氨基酸混合液的協(xié)同作用對(duì)谷胱甘肽發(fā)酵的影響

上述表明，添加H2O2和氨基酸混合液均可增加GSH濃度和含量，為了考察H2O2和氨基酸混合液是否通過(guò)協(xié)同作用，取得增加GSH濃度和含量的效果，我們?cè)诩?xì)胞生長(zhǎng)的不同階段，添加一定濃度的H2O2和氨基酸混合液發(fā)酵30 h后，測(cè)得的數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

由表1可見(jiàn)，H2O2和氨基酸混合液前體的協(xié)同作用可有效的提高GSH的濃度和細(xì)胞干重。

并且當(dāng)發(fā)酵12 h時(shí)，添加0.3 mmol/LH2O2和18mmol/L氨基酸混合液對(duì)GSH發(fā)酵有一定的作用，比未添加提高了114%。表明H2O2和氨基酸混合液前體共同作用可有效的促進(jìn)GSH合成。

4結(jié)論

氨基酸混合液前體可有效的促進(jìn)GSH合成，在發(fā)酵9 h時(shí)添加12 mmol/L的氨基酸混合液，比不添加的GSH濃度提高了99.6 %。添加H2O2對(duì)促進(jìn)GSH合成沒(méi)有很大的作用，但是，發(fā)酵12 h時(shí)添加0.3 mmol/L H2O2和18mmol/L氨基酸混合液時(shí)，其協(xié)同作用有效的促進(jìn)了GSH的合成，比不添加兩者的GSH濃度提高114%。

參考文獻(xiàn)

[1]Riccillo P, Muglia C, de Bruijn FJ, et al. Glutathione is involoved in envirnonmental stress responses in Rhizobium tropici, including acid，tolerance[J]. J Bacteriol, 2000,182(6):1748-1753.

[2]Duwat P, Cesselin B, Sourice S, et al. Lactococcus lactis, a bacterial model for stress responses and survival[J]. Int J Food Microbiol, 2000, 55:83-86.

[3]歐杰，李柏林. 攜氧劑(H2O2)對(duì)野油菜黃單胞菌合成黃原膠的影響[J]. 食品科學(xué)，2004，25（11）：215-217.