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1材料與方法
1.1標(biāo)本來源
大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院2012年1月1日—2013年12月31日送檢的尿液標(biāo)本2231份,采用培養(yǎng)鑒定、半定量計(jì)數(shù)和藥敏一體化的方法進(jìn)行支原體分離培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn),并檢測9種抗菌藥物對(duì)解脲脲原體的抑制作用。患者年齡18~75歲,其中男481例(21.6%),女1750(78.4%),均有不同程度的臨床癥狀或不潔性行為史。
1.2標(biāo)本采集
尿液標(biāo)本采集前夜>6h未排尿,患者清潔外陰后,留取中段尿液2~5mL置于無菌試管中,即刻送細(xì)菌室培養(yǎng)。
1.3試劑
支原體培養(yǎng)鑒定藥敏試劑盒(珠海麗珠試劑股份有限公司生產(chǎn),批號(hào):2012084920),試劑條配有3大類9種常用抗生素藥敏檢測孔,分別賦有高、低2種濃度藥物,強(qiáng)力霉素、米諾環(huán)素為8,4mg•L-1,交沙霉素為8,2mg•L-1,克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星均為4,1mg•L-1,支原體數(shù)量≥104CFU作為陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)。
1.4檢測方法
嚴(yán)格按照試劑盒說明書的要求進(jìn)行操作。將標(biāo)本培養(yǎng)瓶和藥敏試劑條同時(shí)在37℃溫箱培養(yǎng)24h(解脲脲原體)和48h(人型支原體)。藥敏試劑條鑒定小孔內(nèi)的培養(yǎng)液由清亮黃色轉(zhuǎn)為清亮紅色者為陽性,不變色為陰性。藥敏試驗(yàn)結(jié)果判定:高、低濃度微孔均未變色,表示敏感;高、低濃度微孔均變紅色,表示耐藥;低濃度微孔變紅,高濃度微孔不變色,表示中介。
1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS16.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1感染情況
2231份標(biāo)本中支原體感染775份,陽性率為34.7%。其中單純解脲脲原體陽性標(biāo)本628份,陽性率為28.1%;單純?nèi)诵椭гw陽性標(biāo)本116份,陽性率為5.2%;混合感染的標(biāo)本31份,陽性率為1.4%。
2.2性別分布情況
628例單純解脲脲原體感染的患者中,男98例(15.6%);女530例(84.4%)。二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2.3年齡分布情況
628例單純解脲脲原體感染的患者中,年齡<18歲75例(11.9%),年齡18~45歲318例(50.6%),年齡46~64歲185例(29.5%),年齡≥65歲50例(8.0%)。
3討論
隨著新型抗菌藥物、激素和(或)免疫抑制藥在臨床上的廣泛應(yīng)用,以及泌尿系統(tǒng)介入診療技術(shù)的開展,泌尿系統(tǒng)支原體感染發(fā)病率逐年增高,病原菌譜也發(fā)生了明顯改變,其中解脲脲原體成為其主要的病原微生物,但在臨床上往往容易被忽視,嚴(yán)重影響患者的預(yù)后。支原體是一種介于細(xì)菌和病毒之間的原核細(xì)胞型微生物。解脲脲原體是較為常見的支原體。由于沒有細(xì)胞壁,形態(tài)無定形,不能被革蘭染料所染色,姬姆薩染色也不能將支原體與標(biāo)本中的碎片顆粒區(qū)別,支原體培養(yǎng)是診斷支原體感染的金標(biāo)準(zhǔn)。本研究所用的試劑盒為培養(yǎng)、鑒別、定量、藥敏一體化試劑盒,提供一種快速、簡便、準(zhǔn)確的檢測方法,對(duì)2231份尿液標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng),陽性率為34.7%,其中解脲脲原體陽性標(biāo)本659份(單純解脲脲原體陽性標(biāo)本628份,混合感染的標(biāo)本31份),占支原體感染的85%,因此,解脲脲原體是泌尿系統(tǒng)支原體感染中的主要病原微生物。本研究結(jié)果表明,泌尿系統(tǒng)解脲脲原體感染的患者中以女性多見,年齡主要分布在18~45歲之間,因此,中年女性患者是泌尿系統(tǒng)解脲脲原體感染的主要人群。解脲脲原體對(duì)青霉素及頭孢菌素類天然耐藥,而對(duì)干擾蛋白質(zhì)合成及DNA復(fù)制的藥物敏感。因此,臨床上將四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類和喹諾酮類作為治療的一線藥物。由于抗菌藥物的濫用及治療的不規(guī)范等諸多因素,解脲脲原體對(duì)上述抗菌藥物的耐藥性問題日益突出。本研究通過對(duì)628例泌尿系統(tǒng)單純解脲脲原體感染的藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn),解脲脲原體對(duì)四環(huán)素類藥物強(qiáng)力霉素和米諾環(huán)素非常敏感,敏感率平均達(dá)98.2%;大環(huán)內(nèi)酯類藥物敏感性差異較大,克拉霉素最為敏感(85.4%),其次是交沙霉素(62.3%),阿奇霉素和羅紅霉素的敏感性僅為34.1%和20.7%??赡苁怯捎诎⑵婷顾睾土_紅霉素臨床使用較普遍,故耐藥性較高,而克拉霉素和交沙霉素臨床使用較少,故仍有較高的敏感性。喹諾酮類藥物耐藥率最高,可能與其臨床應(yīng)用較為普遍及解脲脲原體拓?fù)洚悩?gòu)酶基因突變有關(guān)。因此,在我院泌尿系統(tǒng)解脲脲原體感染的治療中應(yīng)以四環(huán)素類為首選,大環(huán)內(nèi)酯類藥物的使用必須以藥敏結(jié)果為依據(jù),喹諾酮類藥物治療可能無效。此結(jié)果與YE等報(bào)道一致。綜上所述,治療泌尿系統(tǒng)解脲脲原體感染,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行支原體培養(yǎng)和體外藥敏試驗(yàn),這樣提高診斷的準(zhǔn)確性,并根據(jù)藥敏結(jié)果指導(dǎo)臨床用藥,可以提高療效,避免盲目用藥,防止耐藥菌株產(chǎn)生,為臨床醫(yī)師治療泌尿系統(tǒng)解脲脲原體感染提供有力的依據(jù)。
作者:陳吉林 石玲 謝華 趙光本 王金玲