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10月26日,名瑞新任掌舵人蔡中涵,攜龍鳳褂裙系列產品亮相中國國際時裝周。本次名瑞的大秀共分為兩個部分,除龍鳳褂秀的中國嫁衣系列作品外,繼續(xù)婚紗禮服作品。值得一提的是,不同于以往婚紗禮服大蓬裙、大廓形的設計手法,名瑞本次的婚紗禮服系列在對蕾絲的使用上更加性感和輕松,這樣符合婚紗禮服未來的國際流行趨勢。
“富山杯”
2016中國3D數(shù)碼服裝設計大賽決賽揭曉
10月28日,“富山杯”2016中國3D數(shù)碼服裝設計大賽在北京751D?PARK79罐舉行。本次大賽以“莫奈花園”為主題。通過評委團篩選,來自北京服裝學院服裝藝術與工程學院姚瑤憑借作品《園中慢煮》斬獲金獎,蘇州大學藝術學院的薛依摘得銀獎,大連工業(yè)大學服裝學院的閻皓玉獲得銅獎。最佳人氣獎由江西服裝學院服裝設計與管理分院的熊歡獲得。
TOPBUYER
明星漾衣
偶像力量引領時尚生活
10月30日,751D?PARK YI HOUSE格瑞斯秀場內上演一場不一樣的會,保險行業(yè)傾力支持TOPBUYER明星漾衣,聯(lián)合明星汪蘇瀧、張瑤、包貝爾和包文婧夫婦了各自的潮牌系列。會從明星、生活方式與時尚潮流入手,用一種時髦、隨性的方式,詮釋了年輕潮流人士的生活態(tài)度。真正讓明星用另一種方式詮釋出自己的生活態(tài)度。
“富山杯”
2016中國3D數(shù)碼服裝設計大賽決賽揭曉
10月28日,“富山杯”2016中國3D數(shù)碼服裝設計大賽在北京751D?PARK79罐舉行。本次大賽以“莫奈花園”為主題。通過評委團篩選,來自北京服裝學院服裝藝術與工程學院姚瑤憑借作品《園中慢煮》斬獲金獎,蘇州大學藝術學院的薛依摘得銀獎,大連工業(yè)大學服裝學院的閻皓玉獲得銅獎。最佳人氣獎由江西服裝學院服裝設計與管理分院的熊歡獲得。
我是今年6月份申請的shell
申請表這一關是過了的
看到現(xiàn)在有些xdjm填的時候覺得有些郁悶
不免也想起了當初自己的感受
現(xiàn)在來念叨念叨
絕對算不上經驗,可能連拋磚引玉也算不上
唉,什么都不算了,大家湊活著看吧
這一次申請的表格應該和6月份的那次一樣吧
我是全中文答的
就說幾個開放性問題吧
無論是挑戰(zhàn)性環(huán)境工作,說服協(xié)調能力還是創(chuàng)新
我當初回答的時候都是遵循著這樣的原則
1。條理清楚,突出重點
大家也知道hr的緊張和辛苦,就算是為了咱們自己著想,也不能太過冗長
我的做法,就是在論述的時候盡量分點描述
1。2。3。也好,a”bc也好
總之就是顯得有條理
而且讓hr即使沒有時間看詳細的內容,只看標題也能知道你想表達什么
2。關鍵是自己的分析
就好像前面有的同學說創(chuàng)新想不出來
我看到后面回文的很多同學支的招都不錯
其實大家都不是什么發(fā)明家
shell也不是想要大家拿專利
關鍵就是我們在某一項活動中
如何靈活并且沒有墨守成規(guī)的完成一項任務
在各種實驗室的任務也好,生活中的技巧也好
關鍵是你怎么說服hr這種活動能反映你的創(chuàng)新思想
3。盡量按照star來描述
star就是我們上人力資源課上的時候,老師講過的一個面試方法
可能很多同學都聽過
s=situation
t=task
a=action
r=result
關鍵就是大家要盡量把至少這幾個方面描述清楚
而且不要用我們代替我,因為hr更關注的是你的行為和決策
并且其實你的敘述很可能在后面的面試中用到
所以最好在回答問題的時候就想清楚
4。關于環(huán)境保護和業(yè)務經理的問題
其實這兩個問題絕對和專業(yè)沒有關系
考察的都是分析問題的能力和思路
如果大家進入后面的面試階段,就知道在分析topic的時候思路有多重要了
不過這個方面我也沒有什么太多的感受
不過感覺在分析業(yè)務經理的問題的時候
還是很順手的
所以我覺得經管的學生可能在這方面會有更多的話要說
外系的同學如果覺得實在沒有思路
可以找經管的同學聊聊,因為一些分析選址問題等等的
還是有一些比較基礎的經典思路的
有了這些分析的切入口
可能后面發(fā)揮起來會比較容易
以上只是俺的一些個人感受
如果能幫上大家的忙最好
關鍵詞:古詩詞 鑒賞 內容情感 意象
古詩詞是中華文化之瑰寶,幾千年來我國詩人輩出,佳作如林。這些古代詩詞,或寫景或敘事,或豪放或委婉,以簡潔明了的詞語表現(xiàn)豐富多彩、深邃的意境,讓讀者產生無限空間的遐想,給人以美的享受。因此近幾年的古詩詞鑒賞題在高考中幾乎從未缺席。
《考試大綱》對詩歌鑒賞提出的是兩方面的要求:一是“鑒賞文學作品的形象、語言、表達技巧”;二是“評價文學作品的思想內容和作者的觀點態(tài)度”。下面具體談談從意象入手鑒賞古詩詞的內容和情感。
意象通常是指自然意象,即取自大自然的借以寄托情思的物象,也可以是人文意象?!耙庀蟆币辉~是中國古代文論中的一個重要概念。古人以為意是內在的抽象的心意,象是外在的具體的物象;意源于內心并借助于象來表達,象其實是意的寄托物。中國傳統(tǒng)詩論實指寓情于景、以景托情、情景交融的藝術處理技巧。詩歌創(chuàng)作過程是一個觀察、感受、醞釀、表達的過程,是對生活的再現(xiàn)過程。作者對外界的事物心有所感,便將之寄托給一個所選定的具象,使之融入作者自己的某種感彩,并制造出一個特定的藝術天地,使讀者在閱讀詩歌時能根據這個藝術天地在內心進行二次創(chuàng)作,在還原詩人所見所感的基礎上滲透自己的感彩。
意象在詩中的作用主要有以下幾點:作用之一,是將抽象的主觀情思寄托于具體的客觀物象,使之成為可感可觸的的藝術形象,使情思得到鮮明生動的表達;作用之二,是借助各自的獨創(chuàng)性的意象,使相同或相似的情思得到獨特的藝術表現(xiàn);作用之三,是“言不盡意,立象盡之”,使難抒之情、難言之理,由意象代抒代言,產生邏輯語言所無法達成的“言有盡而意無窮”的藝術效果;作用之四,是如《毛詩正義》所說,是“見今之失,不敢斥言,取比類以言之?!薄叭”阮悺本褪侨∫庀?。在一個沒有言論自由的時代,詩人想要傾訴對社會陰暗面的一腔義憤,又不致于以言獲罪被割斷喉管,一個可能的選擇,就是借助意象,藏匿鋒芒,作委婉的表達;作用之五,是與現(xiàn)實社會政治保持一定距離,從而避免因為當時對某一社會理想、社會力量、社會人物的判斷上的天真,缺乏遠見,后來在該理想幻滅,該力量、該人物走向反面時,使作者尷尬,使作品成為殉葬品。需要強調的是,意象入詩也不是萬能的。人的豐富深邃微妙的精神世界,與客觀物質世界不可能一一對應,人的情思不可能隨時都找得到恰當?shù)囊庀髞肀憩F(xiàn)。有時,意象表現(xiàn)也可能還沒有“快人快語”的直抒胸臆來得痛快。因而,片段的甚至通篇的直言其意,包括直述其懷,直發(fā)其論,直贊其美,就成為必要。
意象是構成詩歌意境的一些具體的、細小的單位。明朝詩評家胡應麟曾說過:“古詩之妙,專求意象?!睂旁娫~中的意象進行深入剖析,可以幫助我們把握詩歌的思想內容和作者的觀點態(tài)度。下面就結合一些詩詞來分析幾個古詩詞中常見意象。
月亮:在我國古代詩歌中,用月亮烘托情思是常用的筆法。一般說來,古詩中的月亮是思鄉(xiāng)的代名詞。如杜甫《月夜憶舍弟》:“露從今夜白,月是故鄉(xiāng)明?!甭犊偸前椎?,但今夜更白,因為感受在今夜;月無處不明,但故鄉(xiāng)更明,因為憶弟思家。詩人以幻作真,為的是突出對故鄉(xiāng)的思念,把握了月,也就把握了作者的情感。
:雖不能與國色天香的牡丹相媲美,也不能與身價百倍的蘭花并論,但作為傲霜之花,它一直得到文人墨客的親睞,有人稱贊它堅強的品格,有人欣賞它清高的氣質。如唐人元稹《》:“秋叢繞舍似陶家,遍繞籬邊日漸斜。不是花中偏愛菊,此花開盡更無花?!北磉_了詩人對堅貞、高潔品格的追求。
梅花:梅花在嚴寒中最先開放,然后引出爛漫百花散出的芳香,因此梅花與一樣,受到了詩人的敬仰與贊頌。王安石《梅花》:“遙知不是雪,為有暗香來?!痹娋浼葘懗隽嗣坊ǖ囊蝻L布遠,又含蓄地表現(xiàn)了梅花的純凈潔白,收到了香色俱佳的藝術效果。
松:松樹是傲霜斗雪的典范,自然是眾人謳歌的對象。三國人劉楨《贈從弟》:“豈不罹凝寒,松柏有本性?!痹娙艘源司涿銊钐玫芤袼退砂啬菢訄载?,在任何情況下保持高潔的品質。
蓮:由于“蓮”與“憐”音同,所以古詩中有不少寫蓮的詩句,借以表達愛情。如南朝樂府《西洲曲》:“采蓮南塘秋,蓮花過人頭;低頭弄蓮子,蓮子青如水?!薄吧徸印奔础皯z子”,“青”即“清”。這里是實寫也是虛寫,語意雙關,采用諧音雙關的修辭,表達了一個女子對所愛的男子的深長思念和愛情的純潔。
梧桐:梧桐則是凄涼悲傷的象征。如元人徐再思《雙調水仙子?夜雨》:“一聲梧葉一聲秋,一點芭蕉一點愁,三更歸夢三更后。”以梧桐葉落和雨打芭蕉寫盡愁思。其他如“一葉葉,一聲聲,空階滴到明”(唐人溫庭筠《更漏子》)、“梧桐更兼細雨,到黃昏、點點滴滴”(李清照《聲聲慢》)等。
杜鵑鳥:古代神話中,蜀王杜宇(即望帝)因被迫讓位給他的臣子,自己隱居山林,死后靈魂化為杜鵑。于是古詩中的杜鵑也就成為凄涼、哀傷的象征了。李白《聞王昌齡左遷龍標遙有此寄》:“楊花落盡子規(guī)啼,聞道龍標過五溪。我寄愁心與明月,隨風直到夜郎西。”子規(guī)鳥即杜鵑鳥。起句寫即目之景,在蕭瑟悲涼的自然景物中寄寓離別感傷之情。三、四句以寄情明月的豐富想象,表達對友人的無限懷念與深切同情。
鷓鴣鳥:鷓鴣的形象在古詩詞里也有特定的內蘊。鷓鴣的鳴聲讓人聽起來像“行不得也哥哥”,極容易勾起旅途艱險的聯(lián)想和滿腔的離愁別緒。如“落照蒼茫秋草明,鷓鴣啼處遠人行”(唐人李群玉《九子坡聞鷓鴣》)、“江晚正愁余,山深聞鷓鴣”(辛棄疾《菩薩蠻?書江西造口壁》)等,詩中的鷓鴣都不是純客觀意義上的一種鳥。
寒蟬:秋后的蟬是活不了多久的,一番秋雨之后,蟬兒便剩下幾聲若斷若續(xù)的哀鳴了,命折旦夕。因此,寒蟬就成為悲涼的同義詞。如宋人柳永《雨霖鈴》開篇是:“寒蟬凄切,對長亭晚,驟雨初息?!边€未直接描寫別離,“凄凄慘慘戚戚”之感已充塞讀者心中,釀造了一種足以觸動離愁別緒的氣氛。
鴻雁:鴻雁是大型候鳥,每年秋季南遷,常常引起游子思鄉(xiāng)懷親之情和羈旅傷感。如隋人薛道衡《人日思歸》:“人歸落雁后,思發(fā)在花前?!痹缭诨ㄩ_之前,就起了歸家的念頭;但等到雁已北歸,人還沒有歸家。詩人在北朝做官時,出使南朝陳,寫下這思歸的詩句,含蓄而又婉轉。
手機和手機文化的浪潮奔涌,也日益劇烈地沖擊和影響著中小學學校教育,學生利用手機上網、看電子書、考試作弊等行為的負面影響日益突出,引起了學校、老師和家長的不安和恐慌,給學生的教育和管理帶來了新的挑戰(zhàn)。各個學校不得不制定相關制度采取相關措施,要求教師嚴防死守,發(fā)現(xiàn)學生攜帶手機立即沒收或摔壞,堅決杜絕手機進校園。
學校的制度一出臺,立即招致學生們的反對,社會反響也頗為強烈,人們議論紛紛,莫衷一是,學生到底該不該帶手機進校園?教師該不該動輒就摔壞學生的手機?
我所在的學校是一所農村中學,學生帶手機的現(xiàn)象極為普遍,學校對此也采取了禁絕的態(tài)度,經常出現(xiàn)一些老師特別是班主任老師摔壞學生手機或者把學生手機丟進污水桶的情況,導致教學矛盾突出師生關系緊張,給學校教育帶來了諸多困難和不利影響。那么,該如何處置學生帶手機和使用手機的行為呢?
我認為,學校和老師都不應該簡單粗暴的搞“一風吹”、“一刀切”,應做到具體問題具體分析。我們應當看到,信息化是當今社會的不可逆轉的發(fā)展趨勢,學生使用手機是不可能靠打壓和禁絕的方式能夠阻擋的,因為學生確實也離不開手機。在農村,家長大多外出打工,學生就成了留守青少年,他們一年或者幾年當中才能和父母相聚一次,手機成了他們維系親情交流思想的唯一工具;學生在遇到突發(fā)事件如搶劫、車禍等時還可以通過手機報警、向老師學校求助;再者,我校的學生基本上都在校外借宿,宿主看護不到位,學生住處經常發(fā)生偷盜事件,把手機放在校外住處極不安全,前幾周我班上一女生還因為手機被偷,猜疑同院住宿學生打架事件:當然手機也可以用來上網查找資料,對學習也有幫助。
看來,學生的學習、生活的確離不開手機,我們武斷地禁絕學生使用機,甚至搜查學生身體檢查學生口袋,只要一發(fā)現(xiàn)學生手機就立刻摔在地上或者扔進污水桶的行為其實是有失偏頗的不理智的,只會讓學生反感和憤怒,是教學關系緊張。事實上,手機是學生的私人物品,《物權法》規(guī)定,公民的私有財產是受法律保護的,我們教師和學校是無權損毀的,而且把手機摔在地上或扔進污水桶,手機電池還會引發(fā)爆炸危機財產和人生安全。這樣做只能說明,我們的一些教育者缺乏法律意識和安全意識,缺乏教師應有的職業(yè)修養(yǎng),從這個意義上說,我們摔壞的不是手機,而是我們的職業(yè)修養(yǎng),是我們師生關系。
對于學生帶手機進校園,學校和教師要進行疏導教育,讓學生在上課期間把手機關機或者調整到靜音狀態(tài),只要學生上課期間不玩手機、不聊、不看電子書就不會影響學習,不會影響我們的課堂秩序。這樣既便于手機保管又不會挫傷學生的感情,才會達到“雙贏的”結果。
當然,讓學生帶手機進校園,我們決不能放任自流。教師課堂教學和班主任老師的日常管理,要勤于觀察了解學生狀況,對于學生在上課期間玩手機聊的行為要及時制止,堅持原則,嚴肅處理,以儆效尤,以理服人,樹立教師威信,贏得學生的尊重和信任。有一次,我在所教的高一(12)班上課時,發(fā)現(xiàn)一女生始終低著頭,不專心聽講,就躡手躡腳走到她跟前,把她的手機拿過來時,我發(fā)現(xiàn)她正在聊微信,話題里赫然有“老婆”、“老公”的親昵稱呼。學生上課期間微信聊天,怎么能不影響學習呢?我當即沒收了該女生的手機,下課以后對其曉之以理動之以情,陳以利害,進行了耐心的說服教育。該生也認識到了自己的錯誤,并表示今后上課期間再不玩手機,同意她的手機暫由我“保管”一個月后還給她。
上周的班會課上,我正言辭懇切的給班上學生進行心理引導和養(yǎng)成教育,突然第一排的座位上響起了手機聊天的消息提示音,我掃視了一下前排學生,發(fā)現(xiàn)其他同學的目光集中在了女生鄭某身上,我馬上意識到鄭某一定在玩手機!但我并沒有停止班會,一邊講一邊觀察鄭某。結果我發(fā)現(xiàn),鄭某還在把手機放在課桌上的一摞書后面繼續(xù)玩,我只好走下講臺,把鄭某的手機拿了上來,然后繼續(xù)開班會。
班會結束,我并沒有立即處理鄭某玩手機的事,我想該給她一個自省的時間。
晚自習前,我把鄭某叫到了辦公室,給她講清了玩手機的危害和她的行為給班上帶來的惡劣影響,然后給了她兩個選擇,一是自己把手機摔壞,二是立刻叫來她的家長,把手機交給家長,讓她回家反省、接受家長教育!鄭某聽了當即淚流滿面,連連認錯,央求我不要通知家長,同意把手機摔壞,但她說自己不想在老師面前摔東西,讓我替她摔。我想,這畢竟是學生的東西,摔壞了就等于破壞了人家的財產,但我又不得不摔,上課玩手機,此風不可長,必須敲山震虎,嚴格班規(guī)。我決定摔了,但我留了個心眼,把手機后蓋朝下,橫著丟了下去,“啪”的一聲,手機的后蓋、電池、機體立刻分了家。手機摔了,鄭某的選擇有了結果,我便讓她回到了教室繼續(xù)上晚自習。鄭某走后,我撿起手機,裝好電池,發(fā)現(xiàn)手機完好無損,就放進辦公桌里。
晚自習結束前,我進教室給學生們通報了對鄭某玩手機事件的處理過程和結果,同學們都表示理解和接受,也表示這是他們的前車之鑒,一定會引以為戒的。然后我又把鄭某叫到了教室外,對鄭某進行了疏導和教育,并承諾,只要鄭某今后學習進步行為規(guī)范,學期末的時候我會還給她一個同樣的手機。鄭某情緒上放松了不少,表示今后一定好好學習遵守紀律,不辜負我的期望。
鄭某玩手機的事處理結束了,我終于出了一口長期,心頭輕松了不上,因為這樣的事處理不好,往往會給學生的情緒帶來極大波動,存在著極大的安全隱患。
“媽媽,為什么不能玩游戲?別的媽媽都讓的”
“這……不許!就是不許玩!媽媽皺著眉,無視我的反抗,“蠻橫”地把電腦關了。
“為什么,為什么??”
“……遲疑片刻,你似乎也解釋不清楚,“反正對你好就是了。”
“哼!你這就是不愛我!”
青春期的孩子就是這樣——你越不讓他干嘛,她就越是要這樣做。‘天龍壓不住地頭蛇’趁你不注意,我便玩上那么幾局,而你發(fā)現(xiàn)了便是無休止地管教,有時還打我那么幾下??墒沁@只能加劇我的叛逆心理,只是讓我漸漸淡忘、模糊你對我的愛。
敏感的心隨著視線的模糊也漸漸看不太分明了。
終于,我的世界也模糊起來。還好你發(fā)現(xiàn)及時,連忙放下干了幾天的工作,硬是把當時執(zhí)拗的我給拖到了醫(yī)院配眼鏡。
“‘我不要戴眼鏡,戴上眼鏡丑死了!”
“不行,不戴上,你怎么學習,你以后怎么辦!”
我還在胡思亂想,卻忽略了你語氣里的焦慮。
最后,我極不情愿地戴上了我認為很俗的眼鏡。可是眼前的景象卻讓我驚訝起來:原來左邊掛著的是時鐘,而時針已經指到1了;原來我右前方那團白乎乎的東西是一個花瓶;原來陽光下的葉子泛著光澤。
帶上你,這幅我覺得有點俗的眼鏡,我竟然發(fā)現(xiàn)原來周圍的世界是這樣的,這樣細致,這樣豐富,這樣美麗。
“喂,怎么樣,看得清楚嗎,舒不舒服,合適不?
我皺眉,不耐煩地轉過身看去:媽媽站在我身后,她的眼睛下已有了一圈黑暈,她的皮膚早不似原先那樣白哲,她的眼角已有了細紋,幾絲枯黃的碎發(fā)在風中飛舞,使她顯得有些憔悴。她此時正一臉關切地望著我,眼里是那深深的愛意。
是的,我看清楚了,那愛意是那樣的清晰。心似乎被什么敲了一下,有些沉悶,有些難過,還有些羞愧。“還好,很清楚……那什么,謝謝媽媽了。”
文/張 磊
凱姆波蒂邁勒,位于意大利南部羅馬和那不勒斯之間。在那里,90歲的老人騎著摩托車在年輕人中間穿行,或者在破曉時分的農田里勞作,并不是一件很稀奇的事情。要不然,它怎么能被稱為歐洲“青春常駐的村莊”呢!這里很少有人在85歲前去世。他們經常到了90歲,甚至過了100歲,也沒有拜訪過醫(yī)生。
帶著熱忱享用食物
凱姆波蒂邁勒人帶著熱忱和趣味享用他們的食物。通過在輕松的環(huán)境下進食,凱姆波蒂邁勒人也給了他們的消化系統(tǒng)輕松的時間――他們坐在一起進餐,花充足的時間享用他們可口的烹飪。他們會津津樂道地談論即將享用的餐點:白葡萄酒蒜燒牛肝菌蝸牛、橄欖油檸檬燒朝鮮薊、配著新鮮西紅柿和野豬肉沙司制成的碎肉卷,這些都是凱姆波蒂邁勒人經典的美食。
完美平衡的飲食
羅馬大學的一項研究表明,凱姆波蒂邁勒人的飲食達到了“完美的平衡”。它擁有良好的蛋白質、脂肪和碳水化合物比例,而且蛋白質主要來源于像豆類這樣的蔬菜,而不是動物。所以,人體對8種必需氨基酸的需求得到完美滿足。由于肉類攝入量很低,而橄欖油等的攝入量很高,所以,他們的飲食中有害的飽和脂肪含量低,有益的不飽和脂肪酸含量卻很高。
水果、蔬菜種類多
水果和蔬菜是凱姆波蒂邁勒人的驕傲和快樂,他們大量種植和食用數(shù)量眾多、種類豐富的水果和蔬菜。
他們喜歡自己果園里出產的蘋果、梨、葡萄和檸檬。蔬菜則包含多種美味的地中海品種,如蘆筍、茴香、芝麻菜、辣椒、芹菜、豌豆和胡蘿卜。從山坡上還可以采集到像牛肝菌這樣的野生菌類,把它們在鹽水和醋里腌制,用作意大利面條和湯團的調味沙司。
在諸多蔬果中,西紅柿可以說是凱姆波蒂邁勒人的最愛。他們的意大利面條沙司醬、燉菜和湯里,都有大量的西紅柿,其中含有大量有效防止衰老的抗氧化番茄紅素。
大蒜、洋蔥增強免疫力
大蒜既可以生吃又可以熟吃,可用作從沙拉到蝸牛大餐的每一種菜的調味料。凱姆波蒂邁勒有一種特產,是一種小洋蔥,它被認為有特別豐富的營養(yǎng),飲食中也經常食用。大蒜和洋蔥都可以增加免疫力、抵抗癌癥、通過防止血液凝結來保護心臟。
日本感冒偏方:干香菇煎汁退燒
日本自古就有食療祛感冒的傳統(tǒng),一直流傳至今。其中,三種吃法對預防和緩解感冒初期癥狀有幫助。
干香菇煎汁能退燒研究表明,香菇的成分中含有抗病毒物質,把干香菇煎成汁飲用,自古以來就被日本人看成是治療初期感冒的良藥,對緩解感冒初期發(fā)燒、咳嗽等癥狀很有幫助。如果感覺干香菇汁口感不是很好,飲用的時候可加點蜂蜜。
【關鍵詞】 雌激素;,SR
關鍵詞】 雌激素;SRB(B族清道夫受體);可變剪接
0 引言
小鼠和人類血漿中高密度脂蛋白(HDL)膽固醇的水平與動脈粥樣硬化性心血管病的發(fā)病率呈顯著負相關[1]. 清道夫受體B族II型(SRBII)是SRBI的異構體,具有與SRBI不同的細胞定位與功能[2],SRBI和SRBⅡ的表達都可被雌激素調節(jié)[3]. 我們檢測不同類型雌激素對大鼠肝臟SRBI 和SRBⅡ表達水平的影響,并構建SRB微基因,旨在分析雌激素對可變剪接作用調節(jié)的分子機制.
1 材料和方法
1.1材料
25日齡去卵巢SD大鼠麻醉后,無菌硅膠囊分別注入17β雌二醇(E2)或17α乙炔雌二醇(EE)后植入背部皮下,對照組植入空的無菌硅膠囊. 于0,3,7,10,14 d分別取肝臟組織,并抽取靜脈血,用于免疫印跡分析和雌激素水平測定. SRBI和SRBII抗體購自Novus Biologicals.
1.2方法
凍存肝組織在緩沖液中勻漿后,超速離心提取細胞膜進行SRBI/Ⅱ免疫印跡分析. SRB微基因的構建采用PCR擴增大鼠基因組DNA的SRB基因片段,PCR產物克隆至TA克隆載體并按順序連接外顯子11到外顯子13片斷. 其中內含子11和內含子12為部分缺失片斷. 最后將SRB微基因插入pSG5載體的EcoR I和Not I之間,用于細胞轉染和可變剪接的分析. 采用Titan One Tube RT PCR 試劑盒進行SRB微基因mRNA表達的RTPCR分析,引物為pSG5載體序列5′TAATACGACTCACTATAGGGC3′和5′GCTGCAAATAAAC AAGTTCTGC3′.
2 結果
植入膠囊后大鼠血清中E2和EE的水平均提高,其中前者明顯高于后者(10~20倍). 免疫印跡分析表明,EE和E2使內源性SRBI蛋白表達水平不同程度下調,EE引起的蛋白水平變化與E2相比更顯著. 同時,SRBI和SRBII均可檢測到糖基化和非糖基化兩種表型. 雌激素可以引起糖基化和非糖基化SRBI的表達下調和非糖基化SRBII表達的上調,但未見糖基化SRBII表達的變化. 構建的SRB微基因包含外顯子11~13,長1.5 kb,包括了連接位點和含有許多潛在剪接因子的必需區(qū)段. SRB微基因pSG5表達載體瞬時轉染HepG2細胞后,RTPCR擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳鑒定,SRBI和SRBⅡ的剪接產物分別為486 bp和357 bp.
3 討論
我們的研究表明,雌激素調節(jié)SRBI和SRBII蛋白的表達水平,可能是雌激素調控血漿膽固醇水平的機制之一. 另外,非糖基化SRBⅡ在EE用藥時表達增加而糖基化SRBII沒有變化,表明雌激素可能在翻譯后水平調節(jié)SRB蛋白的表達. 在小鼠、大鼠和人類中,外顯子12(129 bp)跳躍可產生編碼SRBI C末端異構體SRBⅡ的mRNA[4]. 我們的結果顯示,細胞轉染后檢測到了兩種類型的異構體(SRBI 和SRBⅡ),表明成功構建了一種功能性SRB微基因,為進一步鑒定特異性的剪接因子并研究雌激素調節(jié)的可能機制提供了依據.
參考文獻
[1]Fluiter K, van Berkel TJ. Scavenger receptor B1 (SRB1) substrates inhibit the selective uptake of highdensitylipoprotein cholesteryl esters by rat parenchymal liver cells[J]. Biochem J, 1997, 326(Pt 2): 515-519.
[2]Webb NR, Connell PM, Graf GA, et al. SRBII, an isoform of the scavenger receptor BI containing an alternate cytoplasmic tail, mediates lipid transfer between high density lipoprotein and cells [J]. J Biol Chem, 1998, 273(24): 15241-15248.
[關鍵詞] 腸道病毒71型;手足口??;白細胞介素—6;腫瘤壞死因子—α
[中圖分類號] R725.1 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673—9701(2012)24—0159—02
手足口病是由多種腸道病毒引起的傳染病,近年來,腸道病毒71型是我國重癥手足口病的主要病原。EV71感染除了引起手足口病以外,還能夠引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質炎樣的麻痹等多種與神經系統(tǒng)相關的疾病。手足口病的少數(shù)高危患兒,一旦發(fā)展為重癥,短期內能迅速發(fā)展為肺水腫、循環(huán)衰竭,各種救治措施無效,常常在短期內死亡。免疫活性細胞產生的炎性細胞因子如白細胞介素—6(IL—6)、腫瘤壞死因子—α(TNF—α)等在機體抗感染、凝血、發(fā)熱、休克、惡病質等多種病理生理過程中的作用已越來越明顯,抗病毒及免疫調節(jié)作用也引起醫(yī)學界的廣泛關注。本研究對腸道病毒71型(EV71)感染的手足口病重癥患兒進行了血清中IL—6、TNF—α水平的測定,分析其水平的變化及探討其內在的臨床意義。
1 對象與方法
1.1 研究對象
病例選自2011年6~12月在我科病房住院并確診的腸道病毒71型(EV71)感染的重癥手足口病患兒30例,其中男19例、女11例;年齡11個月~5歲,平均(2.5±0.6)歲。診斷符合2010版《手足口病診療指南》重癥手足口病的診斷標準,大便EV71病毒檢測全部陽性。正常對照組共15例,男9例、女6例;年齡9個月~6歲,平均(2.9±0.5)歲,選自入托查體及健康查體患兒。
1.2 方法
所有研究對象均于入院次日空腹抽取靜脈血2 mL離心后置—20℃冰箱內保存待測,血清標本留取時間不超過24 h。IL—6、TNF—α測定采用德國西門子ADVIA Centaur全自動化學發(fā)光分析儀,采用化學發(fā)光免疫分析法。試劑由德國西門子公司提供,操作嚴格按照說明書進行。
1.3 統(tǒng)計學處理
資料的錄入及分析均采用SAS9.0統(tǒng)計軟件,主要統(tǒng)計分析方法包括一般統(tǒng)計描述、成組比較的t檢驗,均采用雙側檢驗,顯著性水準α=0.05。
2 結果
重癥手足口病患兒血清中IL—6、TNF—α水平均高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P < 0.01)。見表1。
3 討論
腸道病毒71型感染重癥多發(fā)生于學齡前兒童,尤以3歲以下年齡組發(fā)病率最高。通常情況下,EV71感染引起的手足口病在臨床癥狀等方面與柯薩奇病毒引起的手足口病難以區(qū)別,但EV71感染的手足口病很容易引起無菌性腦膜炎、腦干腦炎和脊髓灰質炎樣的麻痹等多種嚴重的神經系統(tǒng)癥狀。腸道病毒71型感染的少數(shù)高?;純?,一旦發(fā)展為重癥,短期內能迅速發(fā)展為肺水腫、循環(huán)衰竭,各種救治措施無效,常常在短期內死亡,使醫(yī)務人員措手不及,有時家長難以理解,甚至發(fā)生醫(yī)療糾紛,處于尷尬的境地。在腸道病毒71型感染的重癥患兒中,肺水腫是最為嚴重的并發(fā)癥,死亡率高,既往一直認為腦干損傷是發(fā)生肺水腫的重要原因[1,2],但在關于手足口病肺水腫機制的研究中發(fā)現(xiàn),有腦干損傷的實驗猴中并未出現(xiàn)肺水腫[3],因此可能存在其他機制導致EV71相關肺水腫。目前已有越來越多的研究表明炎性細胞因子白細胞介素—6(IL—6)、腫瘤壞死因子—α(TNF—α)的亢進與肺水腫的發(fā)生有關[4—6]。
IL—6作為細胞因子家族中的主要核心成員,可由多種細胞產生。IL—6所具有的多生物學功能,在抗感染、腫瘤、免疫性疾病及免疫調節(jié)等諸多方面發(fā)揮重要作用。通常情況下正常人血清中含有微量IL—6,在炎癥、感染和某些腫瘤等情況下血清中IL—6的含量會有不同程度上升。在異常情況下,IL—6的升高可能會對機體產生不利影響,造成組織損害和加重病情發(fā)展。Kossmann等發(fā)現(xiàn)腦損傷患者血清和腦脊液中的IL—6水應性升高。有研究證實中樞星形膠質細胞、下丘腦和垂體前葉自分泌IL—6,在IL—1或TNF—α刺激下分泌能力明顯增強[4]。腸道病毒71型感染的重癥患兒發(fā)病過程中的高熱與IL—6對下丘腦體溫中樞的調節(jié)作用有關,IL—6極有可能同時參與患兒的腦損傷和局部炎癥。一直被認為受血腦屏障保護的“中樞特異免疫器官”也因細胞因子的進入而受累[4]。Lin等[6]研究發(fā)現(xiàn),神經源性肺水腫(NPE)病例組血IL—6水平明顯增高,>70 pg/mL的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值均達到100%。本研究中腸道病毒71型感染的重癥患兒血清IL—6水平增高與以上文獻相符,同時提示IL—6參與了重癥手足口病的病理生理過程。
TNF—α是一種由單核巨噬細胞分泌的具有多種生物活性的多肽調節(jié)因子,其生物學活性表現(xiàn)根據發(fā)揮作用的濃度高低而有所不同。正常情況下,它在機體內的濃度較低,具有調節(jié)免疫應答,抗感染、抗腫瘤、促進細胞增殖分化等多種生理功能,對機體具有保護作用。而高濃度的TNF—α不僅無助于抗感染,而且還是重要的炎癥遞質,可介導炎癥反應的許多病理生理過程,引起局部炎癥反應,使機體器官甚至多系統(tǒng)受損。目前實驗證明由TNF—α介導的炎性損傷過程可能是NPE發(fā)生的機制之一。TNF—α升高的原因可能是因為腸道病毒71型感染的重癥患兒中樞神經系統(tǒng)受累后交感興奮,全身血管收縮,組織缺血缺氧,使單核—巨噬細胞被激活,釋放大量TNF—α。TNF—α介導NPE發(fā)生的機制主要是導致肺毛細血管通透性增加;同時還可直接促進花生四烯酸代謝產物和氧自由基的釋放。本研究表明腸道病毒71型感染的重癥患兒血清TNF—α明顯升高,其參與重癥手足口病的病理過程,與其誘生的IL—6協(xié)同參與整個腦組織的損傷,構成炎性細胞網絡破壞血腦屏障,由神經細胞自分泌的和血循環(huán)中的TNF—α共同引起重癥手足口病的一系列臨床癥狀。
綜上所述,腸道病毒71型感染的重癥患兒血清中IL—6、TNF—α水平的增高,表明其參與了重癥手足口病的病理過程,為臨床上早期使用靜脈注射丙種球蛋白抗免疫治療可明顯改善本病的臨床療效及預后提供了理論依據。IL—6、TNF—α的測定已廣泛應用于臨床,大量的研究已證明IL—6、TNF—α參與了許多疾病的病理生理過程,在疾病的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用,為臨床診斷、療效觀察、預后判斷提供重要依據。因此,臨床上應針對IL—6、TNF—α的過度產生和釋放,加強研究相應細胞因子拮抗劑及免疫調節(jié)劑,以抑制上述細胞因子對機體組織的損傷和及早控制病情。
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答:關注。通過網絡、電視等新聞媒介實時關注。
2. 疫情期間你所在的社區(qū)進行了那些特殊的公共管理?
答:我所在的社區(qū)自大年初一迅速組織物業(yè)對小區(qū)實行了封閉管理,持單位證明對必須出行者進行放行,凡進入小區(qū)者必須先登記、測量體溫。物業(yè)對小區(qū)的公共區(qū)域進行了消毒處理。對外地回歸人員進行了詳細登記,對疫情高發(fā)地回歸人員進行了隔離并對該戶進行每天的跟蹤采集信息等登記。
3. 你認為這些公共管理有什么價值?
答:對小區(qū)實行封閉管理避免了人員聚集,將聚眾性的傳播降到最低;對來自高風險地區(qū)的人員隔離,并每日報告體溫,對掐斷傳染源起到舉足輕重的作用。
4. 疫情期間你是否加入或者看見一些志愿服務,對此你有什么感受?
答:疫情期間我在單位老宿舍院做了一名志愿者,老宿舍院住的大多是年齡偏大的老年人,疫情初期對小區(qū)封閉,非必要不進出等政策有抵觸情緒,通過我們志愿者對疫情形勢的宣講,老同志們由最初的抵觸到后來的支持,甚至有些老同志老黨員自動的加入到我們的志愿者隊伍,如果說我們抗疫是成功的那一定是得到了群眾的理解與支持。
5. 你是否為抗擊疫情貢獻自己的一份力?做了什么?有什么感受?
答:作為單位的一名財務人員,我自大年初二就上崗了,與同事們一起為單位采購口罩、酒精、消毒液等衛(wèi)生用品,然后和同事們一起把這些衛(wèi)生用品發(fā)放的一線崗位上。疫情當前,大家放棄休假放棄家人團聚,沒有同事抱怨,年輕的、年老的,隨叫隨到,疫情當前單位的凝聚力讓大家空前團結,團結就是力量。
6. 疫情期間你的生活發(fā)生了哪些改變?
答:首先日常用品及菜蛋奶等生活必需品不能像以前那樣去菜市場去超市購買了;孩子不能按時返校讀書了;年邁的父母也不能像往常一樣去廣場跳廣場舞、打撲克了;工作中聚集性的會議取消了;電視電話會增多了。
7. 這些改變對你的生活產生了什么影響?
答:影響了孩子上學,半學期的網上授課對孩子視力有影響。老年人不能出門健身娛樂,對年邁父母的身體有些負面影響。
8. 疫情期間令你感觸最深的一點或一件事是什么?
答:疫情是突如其來的,在電視上看到有些偶然路過武漢的,被封閉在武漢了出來出不得,他們?yōu)榱斯?jié)約開支借宿到火車站,靠車站的熱水和方便面度過了那段難熬的日子。人們永遠也不知道意外和明天哪一個先來,生活不易且行且珍惜。