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血細胞分析精選(九篇)

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血細胞分析

第1篇:血細胞分析范文

關(guān)鍵詞:血細胞分析儀 檢定 問題

血細胞分析儀是廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域的血液檢測儀器,能檢測出血液參數(shù)中紅白細胞總數(shù)、血小板和血紅蛋白等多種血液項目,所檢驗出來的參數(shù)能為醫(yī)生診斷和治療患者提供有效依據(jù)。目前來看,紅細胞分析儀已經(jīng)不僅僅局限于人和動物的血液檢驗,已應(yīng)用于腹腔腦脊髓細胞計算和分類中。雖然隨著科學(xué)技術(shù)不斷的發(fā)展,血細胞分析儀功能逐漸增多、應(yīng)用范圍拓展,但是在其實際應(yīng)用中常會出現(xiàn)一些問題,為了保證血細胞分析儀質(zhì)量,相應(yīng)計量檢定部門需要對血細胞分析儀進行定期計量檢定,以便及時發(fā)現(xiàn)問題予以解決。下文對血細胞分析儀檢定相關(guān)問題進行分析。

一、檢定規(guī)程不完善

科學(xué)技術(shù)不斷的發(fā)展,使血細胞分析儀的種類和功能逐漸增多,分析儀分析的參數(shù)也隨之增多,醫(yī)生對血細胞分析儀的依賴性也越來越大。而血細胞分析儀分析的參數(shù)必須準確,才能為醫(yī)生提供有效參考依據(jù)。這就需要適時地對血細胞分析儀進行檢定,檢定過程中一般會依據(jù)分析儀計量檢定規(guī)程,現(xiàn)有的規(guī)程中對分析儀檢定參數(shù)的規(guī)定只有幾項,然而目前很多醫(yī)院臨床中采用的多是兩分類、三分類和五分類的血細胞分析儀,其中五分類的血細胞分析儀檢驗參數(shù)已多達數(shù)十種,這就使得檢定人員因無血細胞分析儀檢定依據(jù),不能更好的對白細胞、紅細胞和血紅蛋白以外的參數(shù)進行計量檢定。

此外,血細胞分析儀計量檢定規(guī)定中的標準物質(zhì)也不能更好滿足分析儀校準需求。相關(guān)人士在用標準物質(zhì)對兩分類和三分類血細胞分析儀進行檢定時,發(fā)現(xiàn)被檢定的血細胞分析儀無法識別計量檢定規(guī)定中的標準物質(zhì),使用過程中標準物質(zhì)是無效的。后來經(jīng)過經(jīng)驗豐富的檢定專家和檢定人員反復(fù)測試后,得出不同血細胞分析儀只有選擇適應(yīng)性好的標準物質(zhì)進行計量檢定,才能更好的發(fā)揮作用。因此,血細胞分析儀檢定規(guī)程必須完善,為分析儀檢定工作提供有效依據(jù),保證分析儀參數(shù)準確性。

二、分析儀檢測技術(shù)問題

血細胞分析儀主要是由機械系統(tǒng)、電學(xué)系統(tǒng)、細胞檢測系統(tǒng)和計算機控制系統(tǒng)構(gòu)成的,其中細胞檢測系統(tǒng)對技術(shù)結(jié)果影響最大,現(xiàn)在國內(nèi)采用的技術(shù)以電阻抗檢測技術(shù)和光散檢測技術(shù)為主。電阻抗檢測技術(shù)就是在稀釋液中設(shè)置一個微孔,在微孔兩端各加適量的電極,再將稀釋后的負壓加向微孔小管中,這樣就可以通過電極電阻變化產(chǎn)生的電脈沖信號,進行顆粒計數(shù),再經(jīng)過甄別、選擇和計數(shù)得到相應(yīng)檢測數(shù)據(jù)。但是這種檢測技術(shù)因無法辨別白細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),不能準確的進行計數(shù)或得出準確參數(shù)數(shù)據(jù);光散射技術(shù)是血液稀釋后變成極細液流穿過激光束,使細胞被激光照射從而形成散射被光電倍增接收,這時利用細胞散射脈沖信號識別、甄選細胞,再經(jīng)過計算機得出細胞數(shù)量參數(shù)。這種技術(shù)雖然能彌補電阻抗檢測技術(shù)的劣勢,但是因價格高而未被廣泛使用。

三、血細胞溫度問題

血細胞分析儀作為溫度適應(yīng)性較為敏感的儀器,受溫度環(huán)境影響明顯,即便在參數(shù)一定情況下,溫度變化也會影響血細胞檢測數(shù)據(jù)值。尤其是冬季和夏季對一些條件相對較差醫(yī)院的血細胞分析儀進行檢定時,因溫度與血細胞儀適應(yīng)的溫度不相符,使得常用的全血質(zhì)控物無法更好的對分析儀進行校準,從而影響血細胞分析儀參數(shù)的準確性?;诖藢ρ毎治鰞x進行定期檢定十分重要,雖然一些條件相對較好的醫(yī)院用全血質(zhì)控物對分析儀進行定期檢定和校準,但是畢竟少數(shù),還有一部分醫(yī)院沒有條件或沒有用全血質(zhì)控物對分析儀進行檢定,這一定程度上會使分析儀檢驗參數(shù)不準確,無法為醫(yī)生診斷和治療提供有效數(shù)據(jù)。

四、標準物質(zhì)問題

血細胞檢測儀檢定前需要選擇紅細胞和包細胞微粒作為標準物質(zhì),對紅細胞和白細胞進行檢定。因兩種標準物質(zhì)檢定是以電阻法為依據(jù)進行的,其檢驗結(jié)果計數(shù)為零,不能確保紅細胞和白細胞檢測數(shù)據(jù)質(zhì)量。全血標準物質(zhì)作為特殊的標準物質(zhì),具備紅細胞和白細胞通用性質(zhì),而這種標準物質(zhì)在出倉、運輸、保存過程中容易出現(xiàn)不按計量規(guī)定執(zhí)行問題,使標準物質(zhì)受到損傷,從而使檢定結(jié)果無法達到標準。具體來說,運輸中車輛會產(chǎn)生震動,使紅細胞受到擠壓、變形或破裂使出血紅蛋白被釋放。再加上運輸過程中對保存條件有嚴格要求,溫度在2~8℃之間且存放于血箱之中,使用冰袋兩天之內(nèi)必須保證溫度在10℃以下,一旦溫度過高,就會使紅細胞出現(xiàn)溶血現(xiàn)象;采購出來的標準物質(zhì)使需要放入冷藏箱儲存的,如果儲存過程中出現(xiàn)停電事故或頻繁的開啟冰箱,會破壞標準物質(zhì)環(huán)境使紅細胞中的血紅蛋被釋放。保準物質(zhì)保存時間也不應(yīng)該過長,過長容易出現(xiàn)自溶、體積變小或使血小板發(fā)生變化,影響計數(shù)結(jié)果;血細胞分析儀標準物質(zhì)使用前也有嚴格規(guī)定,必須在標準溫度下?lián)u勻,以便得到好的重復(fù)性。如果不在標準溫度下來搖勻標準物質(zhì),會影響標準物質(zhì)計數(shù)結(jié)果的準確性。

五、操作問題

血細胞分析儀檢定過程中有全血模式和預(yù)稀釋模式兩種標準物質(zhì)可供選擇,從前人的實踐結(jié)果可知全血模式的標準物質(zhì)較稀釋模式重復(fù)性低,其與測定時稀釋液和樣品量準確性有直接關(guān)系,這兩種模式之間除對白細胞進行檢驗外,其他結(jié)果幾乎無共性。在對血細胞進行檢測前,必須保證血細胞分析儀細胞計數(shù)和規(guī)程一致,如果血細胞分析儀之前進行過臨床檢驗,清洗幾次就能達到要求。如果使用時血小板計數(shù)超過150×109/L時,需要對儀器接頭、地線進行檢查,看其是否出現(xiàn)問題,以免因上述問題使血小板受到干擾。為了確保分析儀質(zhì)量,除了清洗儀器和安裝地線外,還應(yīng)該保證血小板基數(shù)不大于2,以保證血細胞分析儀繼續(xù)工作。血細胞分析儀周圍環(huán)境對血細胞分析測量也有直接影響,其中灰塵對血小板的影響最大,若檢測中把灰塵當(dāng)作血小板會使檢測計數(shù)偏高,從而影響血細胞分析儀檢測數(shù)據(jù)真實性。此外,血細胞分析儀周圍的電壓、噪音、高強度磁場等會成為分析儀干擾源,使血細胞分析儀不能順利進行檢測工作。

結(jié)束語:

血細胞分析檢定工作中一般會因檢定規(guī)程不完善問題、技術(shù)問題、溫度問題、標準物質(zhì)問題和操作問題的影響,而使血細胞分析儀檢定工作無法順利開展,分析儀數(shù)據(jù)準確性無法得到保證。基于此,國家行政部門應(yīng)該從實際出發(fā)對血細胞分析儀計量檢定規(guī)程進行完善,檢定專業(yè)人員應(yīng)不斷的研究分析儀檢定新技術(shù)、注意血細胞分析儀操作流程和標準物質(zhì)的管理工作,以確保血細胞分析檢定工作有序進行。同時醫(yī)院也應(yīng)該合理的制定血細胞分析儀檢定計量標準,適時地對分析儀進行周期性檢定,以減少血細胞分析儀參數(shù)不穩(wěn)定性,保證人們生命健康。

參考文獻:

[1]賀曉云.五分類血細胞分析儀結(jié)果的相關(guān)性研究[J].醫(yī)學(xué)信息(中旬刊).2011(03).

[2]蔣雪萍,馮俊.血細胞分析儀檢測技術(shù)的研究與探討[J].計量與測試技術(shù). 2011(10).

[3]高楓.現(xiàn)代全自動血液分析儀檢測技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用[J].中國醫(yī)療器械雜志.2010(06).

第2篇:血細胞分析范文

【關(guān)鍵詞】血細胞分析儀;比對試驗;檢測系統(tǒng)

【中圖分類號】R446.77 【文獻標識碼】B 【文章編號】1008-6455(2010)08-0218-01

血細胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標,其結(jié)果的準確與否直接影響到多種疾病的診療。全自動血細胞分析儀由于計數(shù)準確,精密度高,操作簡便、快速,因而發(fā)展迅速,已逐漸取代傳統(tǒng)手工方法,成為臨床實驗室的主要檢測手段。但由于生產(chǎn)血細胞分析儀的廠家多,各自使用的測定原理和方法不盡相同,導(dǎo)致其測定結(jié)果及參考范圍有所差異。各醫(yī)院使用不同廠家和型號的血細胞分析儀已成為普遍現(xiàn)象,致使分析結(jié)果呈現(xiàn)不同程度的差異,給臨床跟蹤觀察與對比帶來困難[1]。

根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》的規(guī)定,掌握本室內(nèi)機臺血細胞分析儀結(jié)果的可比性和可靠性,保證本室內(nèi)檢測結(jié)果的一致性。本文對本室內(nèi)的兩臺(貝克曼庫爾特 HL-750和SysmexXH-2100)不同廠家.不同型號的血細胞分析儀的結(jié)果進行了比對,兩臺血細胞分析儀性能穩(wěn)定,使用配套的校準品.質(zhì)控品和試。每日有室內(nèi)質(zhì)控血球檢測,對兩臺血細胞分析儀測定的WBC.RBC.Hb.HCT.PLT結(jié)果進行比對試驗,結(jié)果報道如下:

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器:血細胞分析儀兩臺,分別是貝克曼庫爾特公司的HL-750血細胞分析儀和Sysmex公司的XH-2100血細胞分析儀。

1.1.2 主要試劑:HL-750血細胞分析儀試劑.校準品.質(zhì)控品由美國貝克曼庫爾特公司提供;XH-2100血細胞分析儀試劑.校準品.質(zhì)控品由希思美康公司提供的Sysmex產(chǎn)品。

1.1.3 標本:臨床患者新鮮靜脈抗凝血??鼓齽镋DTA-k2,采血管為奧地利格雷娜公司的真空采血管。

1.2 方法

1.2.1 室內(nèi)質(zhì)控:各臺血細胞分析儀每天用全血質(zhì)控物測定,其中包括WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV結(jié)果為室內(nèi)質(zhì)控項目,結(jié)果在控制允許范圍內(nèi)。

1.2.2 比對實驗:采取患者新鮮靜脈血標本,每日選取10例,其中包括高.中.低值血細胞標本,分別進行WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV檢測,重復(fù)測定2次,取平均值,供測定5天,實驗在2小時內(nèi)完成。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理:各種數(shù)據(jù)使用MicrosoftExcel 工具中函數(shù)計算;方法:在Excel 方格中分別輸入兩臺血細胞分析儀的WBC、RBC、Hb、HCT、PLT、MCV 數(shù)據(jù),計算兩組數(shù)據(jù)的CV值,相關(guān)系數(shù).回歸方程。

2 結(jié)果

2.1 2臺血細胞分析儀每日室內(nèi)質(zhì)控,共計測定30天,CV值見表1。

3 討論

血細胞分析儀因為計數(shù)結(jié)果準確、精度高,操作簡便、快速,因而發(fā)展迅速,成為臨床實驗室地主要檢測手段。在國內(nèi)大中型醫(yī)院,同一實驗室使用不同廠家和型號的血細胞計數(shù)儀已成為較普遍現(xiàn)象,即使各儀器配套質(zhì)控物都在允許范圍內(nèi),也會出現(xiàn)同一標本用不同地儀器分析,出現(xiàn)測定值的差異,給評估和解釋結(jié)果帶來一定困難,并不時地給疾病地診斷、治療及預(yù)后帶來誤解和不良地影響,又增加了經(jīng)濟成本[2]。

通過新鮮全血對2臺儀器測定結(jié)果比對表明:2臺儀器地相關(guān)性較好,尤其WBC、RBC、HGB、3個項目結(jié)果相關(guān)密切(r均>0.975),結(jié)果間沒有明顯差異,PLT結(jié)果相關(guān)性也很好,NCCLS推薦地多臺血細胞分析儀計數(shù)PLT地CV值可為25%。其中C-5d,C-2d和CD-1700,3臺儀器相關(guān)性好,BC-3000略差一些。結(jié)果間地比對是了解儀器之間測定結(jié)果地可比性和可靠性,保證實驗室內(nèi)結(jié)果地一致性。以上結(jié)果表明:4臺血細胞分析儀具有很好地可比性,可用新鮮全血替代配套質(zhì)控物每天對4臺血細胞分析儀進行質(zhì)控。

各臺血液分析儀各項檢測指標的結(jié)果穩(wěn)定、精密度好,CV值均

參考文獻

[1] 彭明婷,谷小林,等.不同方法校準血液分析儀結(jié)果比較.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2000,23(1):35-37

[2] 李軍. 血細胞分析儀的質(zhì)控與結(jié)果比對[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2008,5(12):715-717

第3篇:血細胞分析范文

1材料與方法

1.1方法

1.1.1儀器精密度測定取正常EDTA-K2抗凝新鮮全血一份,分別在每一臺儀器上連續(xù)重復(fù)測定20次,計算RBC、WBC、HGB、HCT、PLT的均值、標準差(SD)、變異系數(shù)(CV)。

1.1.2比對試驗以CD-3700血細胞分析儀為參考比對儀器(X)。每日檢測8份血清標本,將新鮮抗凝全血標本按18,81的順序分別在三臺血細胞分析儀上進行連續(xù)測定,2h內(nèi)完成。連續(xù)測定5d,記錄檢測結(jié)果。

1.2統(tǒng)計學(xué)處理采用MicrosoftExcel2003和SPSS16.0進行數(shù)據(jù)處理和相關(guān)性統(tǒng)計分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義,并給出線性回歸方程Y=bX+a。精密度評價根據(jù)美國臨床實驗室改進方案(CLIA'88)允許誤差的1/4作為允許誤差,各比對項目的CV值必須滿足:RBC≤1.5%、WBC≤3.5%、HGB≤1.75%、HCT≤1.5%、PLT≤6.25%。以美國臨床實驗室改進方案(CLIA''''88)能力比對檢驗質(zhì)量要求范圍的1/2作為各項目檢測結(jié)果的允許誤差:RBC≤3.0%、WBC≤7.0%、HGB≤3.5%、HCT≤3.0%、PLT≤12.5%[3]。

2結(jié)果

2.1精密度評價RBC、WBC、HGB、HCT、PLT五個檢測項目在三臺血細胞分析儀上精密度均符合要求。見表1。

2.2相關(guān)性和回歸分析試驗儀器(Y)與比對儀器(X)測定結(jié)果相關(guān)性見表2。

2.3偏倚評估將各檢測項目的靶值代入相應(yīng)的回歸方程,計算比較方法與試驗方法測定結(jié)果的預(yù)期偏倚和相對偏倚,以CLIA''''88能力比對檢驗質(zhì)量要求范圍的1/2為臨床可接受性能的判斷標準,結(jié)果見表3。

3討論

隨著檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展,越來越多的臨床實驗室引進不同檢測儀器,構(gòu)建多種檢測系統(tǒng),以提高患者標本的檢測速度。臨床實驗室內(nèi)同時擁有2種或2種以上相同或不同的檢測系統(tǒng)已經(jīng)十分普遍。為確保不同儀器檢測同一檢測項目的結(jié)果具有一致性,CAP認證標準中要求,試驗室每年需要進行至少2次儀器比對[4]。另外,考慮到實驗成本的因素,每個實驗室每年參加室間質(zhì)量評價的儀器往往選擇其中一臺常用儀器,其他儀器做好室內(nèi)質(zhì)量控制,通過與參加室間質(zhì)評的儀器做比對,以保證同一標本在不同系統(tǒng)檢測時得到具有可比性的結(jié)果。

本次試驗顯示,三臺血細胞分析儀的精密度均較高,CV值均在允許范圍內(nèi)。CD-3700血細胞分析儀參加每年的室間質(zhì)評活動,并且質(zhì)評成績優(yōu)秀,因此確定CD-3700血細胞分析儀為參考比對儀器。新購買的XS-800i全血細胞分析儀和XE-5000血液分析系統(tǒng)作為試驗儀器進行比對。相關(guān)與回歸分析結(jié)果顯示,兩臺試驗儀器與比對儀器的相關(guān)系數(shù)(r)均大于0.975,說明X分布范圍合適,直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠,可以用回歸統(tǒng)計的方法評估試驗儀器與比對儀器之間的系統(tǒng)誤差。以CLIA''''88能力比對檢驗質(zhì)量要求范圍的1/2作為臨床可接受性能的判斷標準,兩臺試驗儀器的相對偏倚均在允許范圍內(nèi),檢測結(jié)果可接受。

第4篇:血細胞分析范文

五分類血細胞分析儀的廣泛應(yīng)用,大大提高了臨床血液學(xué)檢驗的質(zhì)量和速度。然而,它們只能作為血液常規(guī)分析過程中的過篩手段,遇到一些異常的結(jié)果時還必須用顯微鏡復(fù)查血片,方能發(fā)出報告。作者采用五分類血細胞分析儀篩查,顯微鏡形態(tài)學(xué)復(fù)查,查出血液系統(tǒng)疾病136 例,現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2006—2007年用五分類血細胞分析儀對門診、病房約6萬例進行查血液常規(guī)檢查,發(fā)現(xiàn)有異常的做顯微鏡復(fù)查,發(fā)現(xiàn)血液系統(tǒng)疾病136 例。其中急性非淋巴細胞白血病23 例,急性淋巴細胞白血病8 例,慢性粒細胞白血病4 例,多發(fā)性骨髓瘤4 例,巨幼細胞性貧血35 例,缺鐵型貧血32 例,骨髓增殖性疾病25 例,再生障礙性貧血5 例,他們均為初診患者,并經(jīng)骨髓形態(tài)學(xué)或經(jīng)上級醫(yī)院檢查證實。其中男63 例,女73 例,年齡15~81歲。

1.2 檢驗方法

1.2.1 儀器 COULTER——HmX血細胞分析儀及配套試劑,全血質(zhì)控液COULTER公司提供。

1.2.2 方法 常規(guī)消毒法采集靜脈血2 mL(嚴格按儀器操作規(guī)程進行,每天隨機質(zhì)控)。對白細胞數(shù)量及直方圖異常者涂片做瑞-吉染色,計數(shù)分類200個白細胞,并作形態(tài)觀察。

2 結(jié)

結(jié)果見表1。表1 136例血液病的種類和構(gòu)成比血液病名稱ANLLALLCMLMMMgAIDAMDSAA病例數(shù)

3 討

五分類自動血液分析儀具有方便、高精度。它是在一個流式通道內(nèi),對單個白細胞進行直接、同時、三重測量,然后再進行三維分析。顯微鏡下觀察的細胞形態(tài)是細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu),包括細胞質(zhì)的顏色、細胞質(zhì)內(nèi)有無顆粒及顆粒的性質(zhì)、核的形狀、有無核仁等。異常白細胞直方圖粗略地顯示各類白細胞細胞比例或有無明顯異常細胞出現(xiàn),手工顯微鏡復(fù)查時注意這些變化的真正病理意義,而不能僅從白細胞直方圖的變化來進行臨床診斷。堅決反對單位使用血細胞分析儀后,就一律不再作鏡下復(fù)查和分類的錯誤傾向[1]。血液分析儀只對典型的血液病作出提示診斷,以便作進一步的檢查。如果對儀器的計數(shù)原理,異常報警掌握不夠,特別是用不配套的稀釋液、溶血素,造成直方圖不典型,往往忽視血涂片檢查,造成誤診和漏診,而血細胞的質(zhì)和量異常恰恰是血液病的重要表現(xiàn)。所以,對一些直方圖有異常的患者,一定要鏡檢。本文報道的136 例血液系統(tǒng)疾病,是從約6 萬例標本中篩查出來的,并結(jié)合手工復(fù)檢,經(jīng)骨髓細胞形態(tài)學(xué)證實。其中血液惡性疾病占陽性比例28.5%,各種類型的貧血占49.3%。骨髓增殖性疾病占18.4%,再障占3.8%,各種貧血接近占一半,可能與人們的飲食習(xí)慣、疾病的本身有關(guān)。惡性白血病的比例也很大,可能與飲食、居住環(huán)境、工作環(huán)境、自身免疫有很大關(guān)系。但如若大意,定會漏診和誤診。血液病特別是白血病的診斷主要依靠MICM(形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué))[2]。但在基層工作中,血細胞分析儀加上形態(tài)學(xué)復(fù)檢和重要的臨床癥狀(出血發(fā)熱、貧血),可以為血液系統(tǒng)疾病患者做出初步的診斷,使患者得到及時的治療。

參考文獻

第5篇:血細胞分析范文

各級醫(yī)院臨床檢驗應(yīng)用中非常廣泛的儀器之一就是血細胞分析儀,隨著計算機技術(shù)的快速發(fā)展和數(shù)據(jù)處理技術(shù)的日新月異,血細胞分析儀的自動化水平和可檢測維度也越來越高,給臨床檢驗帶來了極大的方便性和準確性。筆者在基層醫(yī)院的臨床應(yīng)用中,積累了許多檢測數(shù)據(jù)和病例,并進行了對比分析,結(jié)合實際進一步探究了影響血細胞分析儀測定結(jié)果的實踐因素。

1 環(huán)境溫度的干擾

實驗室環(huán)境溫度決定了儀器、試劑以及標本的溫度,計數(shù)時稀釋液的溫度應(yīng)為( 22±4) ℃ 。當(dāng)稀釋液的溫度低時,紅細胞溶解后的膜碎片聚集, 粒度分布曲線的平坦段變短,當(dāng)試劑溫度低于18 ℃時需加熱使用。有些溶血劑在低溫時可出現(xiàn)結(jié)晶, 并不容易被察覺,很難引起操作者的注意,但在顯微鏡下, 可見到其中懸浮著許多細小的結(jié)晶,這樣的溶血劑滴入血液中,白細胞計數(shù)必然增高。我們基層醫(yī)院地處北方,這種情況在實際操作中時有發(fā)生,尤其是在冬季。血細胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時產(chǎn)生的聚合結(jié)晶,常使分析結(jié)果出現(xiàn)異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進行加熱,以升高溫度, 消除結(jié)晶。還可加入適量的非離子表面活性劑,從而減輕溶血劑結(jié)晶的發(fā)生。低溫也易激活血小板,引起血小板凝集, 造成血小板計數(shù)假性降低。

2 抗凝劑的影響

ABX60血液細胞分析儀檢測EDTA-K2 含量不同的靜脈血,臨床結(jié)果表明EDTA-K2 有效抗凝劑量在1.5~ 6. 0mg/ mL時,不影響分析結(jié)果。自制抗凝瓶EDTA-K2 用量1.5~ 2.2mg/ mL為宜。低于1. 5mg/mL時抗凝效果欠佳, 出現(xiàn)肉眼不易發(fā)現(xiàn)的凝集,可表現(xiàn)為血小板降低。在采血時,一般2mL的采血量,其誤差在± 0. 5mL范圍內(nèi)的話比較適宜。血量過多或過少都會對結(jié)果造成影響,血量過多抗凝不充分,會出現(xiàn)凝塊;血量過少, 會導(dǎo)致抗凝劑過濃。筆者分析認為,由于血細胞遇抗凝劑先有一個短暫的(1~ 2min) 收縮過程, 這是因為鉀離子進入血漿以后,改變了滲透壓,導(dǎo)致水從細胞內(nèi)流出所致。隨后細胞將鉀離子泵進膜內(nèi),細胞又恢復(fù)原態(tài)。絕大部分患者的標本這一時間只需要幾分鐘, 但也有人需要20~ 30 min??鼓齽┻^濃會延長這個平衡時間。

3 標本放置時間的影響

筆者通過觀察總結(jié),發(fā)現(xiàn)標本存放3~ 6 h對多數(shù)血液分析參數(shù)均有不同程度的影響, 主要影響WBC和PLT 結(jié)果。但有部分標本在放置的8h內(nèi)大部分參數(shù)沒有顯著改變, 而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內(nèi)卻有明顯增高。筆者認為,標本放置時間過長會導(dǎo)致細胞分層, 分層的細胞會產(chǎn)生不同的代謝物,形成微環(huán)境,此時, 細胞的體積與其周圍的微環(huán)境相適應(yīng), 重新混勻后需重新建立平衡, 最初的1~ 2min收縮,達到平衡約需30min。這一現(xiàn)象對血脂較高的標本影響更為顯著。

測定時間對血小板的影響更為顯著,在一定的時間段內(nèi), 隨著時間的延長, 抗凝劑與血液充分溶融, 松散聚集的血小板逐步解聚,血小板數(shù)值逐步升高。實際操作中, 由于急需報告結(jié)果(尤其是急診標本) 而使待測時間縮短, 往往導(dǎo)致血小板計數(shù)結(jié)果偏低。

4 生理和病理因素的干擾

在臨床實踐中,筆者有時會發(fā)現(xiàn)應(yīng)用血細胞儀對新生兒血液進行分析時,使用正常量溶血劑計數(shù)白細胞, 各項結(jié)果與實際有差異。筆者認為, 由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態(tài),其紅細胞數(shù)和血紅蛋白都高( Hb> 200g/ L)。常規(guī)溶血劑用量不能將紅細胞完全破壞, 加大溶血劑用量, 可以使白細胞正確分類, 計數(shù)準確。因此, 在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結(jié)果的關(guān)鍵。

病理因素也可影響血液分析的結(jié)果, 在某些疾病的影響下,當(dāng)平均紅細胞體積小于70fL時,血小板計數(shù)假性升高, 這時需用顯微鏡人工計數(shù)才能得到準確的結(jié)果。

5 采血因素的影響

第6篇:血細胞分析范文

【關(guān)鍵詞】 白細胞;細胞儀分類;手工分類

Reliability analysis of the credibility of WBC by BC-5500 hematology analyzer

XU Jin-hua,HUANG Yu-hui,HUANG Ri-jiao,et al.

Department of Clinical Laboratory,The Fifth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University,ZhuhaiGuangdong519000,China

【Abstract】 Objective To analyse the BC-5500 hematology analyzer of the white blood cells to the credibility of the five categories. Methods The classification of the equipment within and between-batch precision measurement,Physical examination were normal people,normal patients and patients with blood diseases diagnosed specimens instruments classified at the same time with the manual classification,and statistical analysis.Results BC-5500 hematology analyzer of the classification of white blood cells good reproducibility and high precision. Conclusion BC-5500 hematology analyzer of the white blood cell classification technology has reached a higher level.

【Key words】 White blood cell; Cytometry classification; Manual classification

作者單位:519000中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院檢驗科

本科于2008年引進了兩臺深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的BC-5500血液細胞分析儀,在使用了一年的時間里,筆者對該儀器的分類計數(shù)與手工分類進行了對照,以了解該儀器的白細胞分類情況。

1 對象和方法

1.1 儀器 中國深圳邁瑞公司的BC-5500; OLYMPUS 3100 顯微鏡;改良Neubauer 計數(shù)盤。

1.2 試劑 BC-5500 配套試劑;瑞氏染色液:按《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3 版) 》的方法配置[1]。

1.3 標本 本院體檢中心體檢者50例,確診的血液病患者50例,其他患者50例。標本均為新鮮EDTA -K2抗凝全血。

1.4 方法 采集受檢者空腹靜脈血2 m l,注入由廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司提供的含EDTA -K2 的真空管內(nèi)立即輕輕顛倒混勻(8~10 次),3 h內(nèi)檢測完畢。BC-5500 型分析儀按要求進行日常保養(yǎng), 確定儀器處于良好的工作狀態(tài), 每天做室內(nèi)質(zhì)控。

1.4.1 準確度測定 分別采集體檢中心體檢者50例,住院部確診的血液病患者50例,其他住院患者50例,先用BC-5500計數(shù)三次白細胞的分類百分比,再由2名檢驗技師嚴格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3 版)》用顯微鏡直接計數(shù)法進行分類計數(shù),每人每份標本分別計數(shù)三次,并對兩種方法的百分比結(jié)果進行分析。

1.4.2 精密度測定

1.4.2.1 批內(nèi)精密度 取高、中、低三種標本分別連續(xù)測定 11 次,2~11 次求出白細胞分類各項 CV(%)。

1.4.2.2 批間精密度 用深圳邁瑞公司提供的質(zhì)控物連續(xù)測定 20 d,求出白細胞分類各項 CV(%)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 11. 0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)表示,比較采用t檢驗,P

2 結(jié)果

2.1 精密度

2.1.1 批內(nèi)精密度,結(jié)果見表1。

表1

高、中、低 3 種標本檢測結(jié)果的 CV(%)

項目 高值中值低值

中性粒細胞4.355.105.67

淋巴細胞 5.015.986.23

嗜酸性粒細胞 4.865.235.87

嗜堿性粒細胞3.564.034.99

單核細胞 5.235.516.01

2.1.2 批間精密度 中性粒細胞:4.42,淋巴細胞:4.05,嗜酸性粒細胞:5.20,嗜堿性粒細胞:5.23,單核細胞:5.71;均在儀器設(shè)定的范圍之內(nèi)。

2.2 準確度 BC5500 型分析儀分類與手工法鏡檢分類結(jié)果的比較,結(jié)果見表2。

表2

BC5500 型分析儀對白細胞的分類與手工法鏡檢分類結(jié)果的比較

組別細胞分類 例數(shù)儀器分類(%)手工分類(%)

體檢中心體檢者中性粒細胞50 55.9±9.00* 54.3±8.60

淋巴細胞34.7±9.75* 32.6±9.21

嗜酸性粒細胞 3.20±2.10* 2.96±2.96

嗜堿性粒細胞0.40±0.40# 0.21±0.20

單核細胞5.85±1.75# 3.55±2.20

確診的血液病患者1中性粒細胞46 49.1±36.5* 50.1±34.6

淋巴細胞47.5±37.7* 42.1±39.5

嗜酸性粒細胞 5.80±5.10* 5.30±4.98

嗜堿性粒細胞 0.25±0.25# 0.12±0.10

單核細胞17.1±16.4# 13.6±13.2

確診的血液病患者2中性粒細胞4 51.6±33.5

淋巴細胞43.2±36.1

嗜酸性粒細胞2.01±2.68

嗜堿性粒細胞0.41±0.16

幼稚細胞23.1±10.7

單核細胞3.61±2.08

其他患者中性粒細胞5049.5±33.7*47.9±34.8

淋巴細胞41.6±33.0*39.7±35.1

嗜酸性粒細胞8.00±7.90*7.56±8.20

嗜堿性粒細胞0.40±0.30#0.11±0.15

單核細胞 9.95±5.15#6.53±5.30

注:兩種方法比較,* P>0.05,#P

3 討論

邁瑞公司生產(chǎn)的BC 5500 型分析儀運用激光, 流式細胞術(shù), 細胞化學(xué)染色等多項技術(shù), 利用細胞內(nèi)顆粒的密度,核分葉對激光的折射等先進手段, 通過1°~ 5°的低角度和8°~20°高角度激光散射對細胞進行計數(shù)和分類。因此BC 5500型分析儀用于非血液患者的細胞計數(shù)是可行的。通過批內(nèi)和批間精密度結(jié)果分析,BC-5500血細胞分析儀分類計數(shù)的CV值均在儀器設(shè)定的范圍之內(nèi),精密度較高,重復(fù)性好。對非特殊性的標本,該儀器能夠準確的作出分類。

由表2 可知:無論普通體檢組還是患者組, 中性粒細胞、淋巴細胞、嗜酸性粒細胞, 儀器分析與手工鏡檢結(jié)果比較差異無顯著性 (P>0.05)且相關(guān)性非常顯著(r= 0.916)?;颊呓M儀器法伴有不同提示的, 鏡檢分類均有不同程度的變化。體檢組和普通患者組單核細胞、嗜堿性粒細胞, 儀器分類與鏡檢結(jié)果差異有顯著性(P

綜上所述,BC-5500血細胞分析儀對白細胞的分類情況已經(jīng)達到了較高的水平,足以滿足臨床的基本需要。當(dāng)然,作為一種全血細胞分析儀白細胞分類方法只能作為一種過篩手段進行初檢[3], 對于血液中各種細胞的多形態(tài), 多變化的特點, 儀器的識別能力不如人工顯微鏡檢查準確。在使用全自動分析儀時一定要注意, 先進的儀器不能完全替代顯微鏡分類, 當(dāng)血細胞數(shù)量、比例、分布圖、散點圖有異常時[4], 應(yīng)該做血涂片人工鏡檢, 以免漏診異常形態(tài)細胞和血液系統(tǒng)疾病。

參 考 文 獻

[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社,2006:136.

[2] 唐滬強, 許凱聲, 揚律.STKS 血細胞分析儀白細胞分類結(jié)果評價.上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志, 1999, 14(2):82.

第7篇:血細胞分析范文

【關(guān)鍵詞】 血細胞計數(shù);自動分析;偏差;對比研究

本所檢驗科于2007年1月購入1臺XS21000i血細胞分析儀,與原有的邁瑞B(yǎng)C3000和貝克曼COULT同時使用,為了保證3種儀器測定結(jié)果的準確性和可比性,本文參照斯德哥爾摩協(xié)議的EP29A文件]要求,以參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評成績合格的貝克曼COULT血細胞分析儀為實現(xiàn)準確度溯源和可比性的目標,即參比儀器,以BC23000和XS21000i為比較檢測儀器,即測定儀器,在3種儀器上同時檢測患者新鮮標本。通過F檢驗和線性回歸分析,計算參比儀器和測定儀器之間的偏差來判斷結(jié)果是否準確,報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源 取健康檢查者乙二胺四乙酸二鉀抗凝全血,白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)4個項目分別為高、中、低值標本40份,每天選取8份。

1.2 儀器與試劑 貝克曼COULT血細胞分析儀、希森美康XS21000i血細胞分析儀、邁瑞B(yǎng)C3000血細胞分析儀,3種儀器所用試劑均為各公司原裝配套試劑。

1.3 實驗條件 各儀器均按使用說明定期維護、保養(yǎng),每天開機后進行空白允許值及各自質(zhì)控檢測,保證3種儀器均在控。

1.4 實驗方法 由技術(shù)熟練者分5 d,每天8份標本,每份標本在每臺儀器上檢測2次,取值為測定結(jié)果。2種儀器的檢測模式均為全血模式。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用F檢驗,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差(x±s)表示,直線回歸分析,統(tǒng)計軟件用SPSS13.0和Excel。

2 結(jié)果

3種儀器4項血細胞檢測結(jié)果及不同儀器間檢測結(jié)果的相關(guān)分析及偏差評估如下。

2.1 4 個項目3 種儀器測定結(jié)果比較

2.2 COUL T 和BC3000 的相關(guān)關(guān)系(r 表示相關(guān)系數(shù))

3 討論

醫(yī)院檢驗科一般都同時使用多臺不同型號的血細胞分析儀進行標本檢測分析,各儀器都有各自獨立的試劑系統(tǒng)和質(zhì)控系統(tǒng),以質(zhì)控物對血細胞分析儀進行測定只是了解單臺儀器,測定結(jié)果,而各自專用的全血定值質(zhì)控物不能相互使用,無法反映各儀器檢測結(jié)果的一致性。本文參照NCCLS2EP9A方案,以參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評成績合格的COULT為參比儀器,以BC23000和XS21000i為測定儀器進行比對測試。

根據(jù)測試結(jié)果,以COULT的結(jié)果為自變量X,分別以BC23000和XS21000i的結(jié)果為因變量Y,計算每臺儀器4個項目的相關(guān)系數(shù)(r)和回歸方程,以r2>0.95為相關(guān)性良好。本實驗數(shù)據(jù)的可接受性判斷可通過r或r2作粗略估計,如r和r2均>0.95,說明實驗數(shù)據(jù)分布范圍合適,直線回歸統(tǒng)計的斜率和截距可靠,實驗方法精密度較好。本實驗3種儀器

作者單位:721000西安鐵路疾病預(yù)防控制所寶雞分所

檢測的40份標本W(wǎng)BC、RBC、Hb3個項目結(jié)果相關(guān)性密切(r>0.976),PLT欠佳,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,可同時或交替使用,與文獻報道相符[1,2]。根據(jù)回歸方程計算各參數(shù)在給定醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)處的預(yù)期偏差和相對偏差,以不同Xc允許誤差的限值與預(yù)期偏差值判斷各項目的偏差是否可以接受。參照衛(wèi)生部臨床檢驗中心推薦采用的參考方法的允許偏差范圍,WBC、RBC、Hb、PLT分別為靶值±15%、±6%、±7%、±25%[1],表明BC23000和XS21000i4個項目檢測結(jié)果的偏差均在允許范圍,檢測結(jié)果是一致的,具有可比性,完全符合臨床需要。

根據(jù)國際血液標準化委員會文件要求,血細胞分析儀的檢測結(jié)果必須直接或間接溯源至參考方法[2]才能保證結(jié)果的準確性和不同實驗室檢測結(jié)果的可比性。本研究用作比對的參比儀器是參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評合格的COULT,由于衛(wèi)生部臨床檢驗中心為國家實驗室認可委員會認可的校準實驗室,因此,本文的檢測結(jié)果間接地溯源至參考方法。

參 考 文 獻

[1] 彭黎明,鄧瑞雪.血細胞自動分析比對的溯源.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2005,28(5):475-477.

第8篇:血細胞分析范文

有了全自動血細胞分析儀后,不少操作人員認為所有質(zhì)量問題均是儀器造成的,與操作人員沒有關(guān)系,但事實上在上級檢驗師審簽報告時發(fā)現(xiàn)許多問題都是由于操作人員的臨床基礎(chǔ)知識薄弱、業(yè)務(wù)素質(zhì)差、缺乏敬業(yè)精神,對出現(xiàn)的人為差錯缺乏洞察力,導(dǎo)致錯誤報告在上級檢驗師審簽報告時才被發(fā)現(xiàn)。

自從我院2004年使用第一臺血細胞分析儀開始,6年來,在對3萬多張血細胞分析報告審核簽字過程中發(fā)現(xiàn)大量質(zhì)量問題并不僅僅在于鏡檢,而更多的問題還在于實驗室人員的理論水平、業(yè)務(wù)素質(zhì)和敬業(yè)精神。在血細胞分析儀普及的今天,儀器的日常維護和保養(yǎng)已由專人負責(zé),儀器的校準、室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評都非常滿足的前提下,經(jīng)過長達6年來對審簽血細胞分析報告中發(fā)現(xiàn)的問題進行歸納總結(jié)后得知,真正影響我院血細胞分析檢驗質(zhì)量的因素全在于人,現(xiàn)以日本西森美康的KX-21N三分群血細胞分析儀為例,將一些在審簽報告中發(fā)現(xiàn)的引起質(zhì)量問題的因素逐一分析如下:

KX-21N檢測紅細胞是利用庫爾特原理,根據(jù)血細胞是不良導(dǎo)體的特性,在電解質(zhì)溶液中懸浮細胞顆粒在通過計數(shù)小孔時引起電阻變化來進行血細胞計數(shù),同時根據(jù)脈沖高低測定每個細胞體積[1]。血紅蛋白是利用光電比色原理來測定的,HCT、MCH、MCHC、RDWSD、RDWCV是用RBC、Hb、MCV計算出來的。

1RBC、Hb、HCT、WBC、PLT全部增高

因WBC和PLT個體差異太大,往往不易發(fā)現(xiàn)有人為差錯,對單個RBC升高的報告也不易發(fā)現(xiàn)人為差錯,但在審簽連續(xù)3張以上RBC升高的報告時,我們應(yīng)仔細檢查一下,凡是科內(nèi)有技術(shù)不熟練的進修生和實習(xí)生參與操作時更應(yīng)高度重視。我院血細胞分析常采用預(yù)稀釋模式,當(dāng)上臨床病房采集多個標本后回到檢驗科檢測時,由于細胞沉降至離心管管底,假如檢測前未充分混勻,測定結(jié)果將導(dǎo)致RBC、Hb、HCT、WBC、PLT等多項指標顯著升高。假如在臨床提供的靜脈血中取樣進行預(yù)稀釋模式檢測或直接行全血模式檢測,取樣前混勻不徹底也常引起RBC、Hb、HCT、WBC、PLT等多項指標顯著升高。怎樣才能徹底混勻,檢驗科部分工作人員各行其事,全憑自己想象,根本不去實踐或不接受曾經(jīng)通過實踐得出的經(jīng)驗指導(dǎo),實踐證實將采血管中的標本顛倒混勻5次以上才能達到徹底混勻。預(yù)稀釋模式檢測時,稀釋液加量不足導(dǎo)致RBC、Hb、HCT、WBC、PLT等多項指標顯著升高也曾多次發(fā)生。一是用移液器代替刻度吸管,因移液器活塞漏氣,使所加稀釋液的量偏少;另有人將500μ加成400μl,經(jīng)驗豐富者發(fā)現(xiàn)這些差錯并不難,一是上述檢測項目全部升高,二是檢測一次后剩余量較少或一份標本不夠2次檢測。

第9篇:血細胞分析范文

關(guān)鍵詞:網(wǎng)織紅細胞;全自動血細胞分析儀;瘧原蟲

Evaluation of performance of ADVIA2120blood-counter system for detection of reticulocytes.

Abstract:Objective To evaluate the performance of ADVIA2120for the test of reticulocytes. Methods ADVIA2120was used for detection of high/normal/low reticulocyte samples and the reproducibility,the rate of carrying contamination and stability were observed.The results were compared with manual method. Results Reproducibility:except that the CV of high nucleic acid was13.82%~17.4%,the CV of the other indexes was less than8.19%;linearty:r=0.9979;stability:percentage CV of Ret at4℃in24hwas3.8%;the rate of carrying contamination was0.22%;compared with the manual methods:r=0.9962,P>0.05. Conclusion The srate of carrying contamination by using ADVIA2120blood-counter system in test of reticulocytes is low,stable and showing a nice linear correlation suitable for clinical use.

Key words:Reticulocytes;Automatic blood-counter system;Plasmodium

網(wǎng)織紅細胞(Reticulocytes,Ret)傳統(tǒng)的人工測定煩瑣而費時,準確性受操作人員的經(jīng)驗、水平、細胞計數(shù)量、染色效果及涂片質(zhì)量等因素影響大,重復(fù)性也差。全自動血細胞分析儀測定網(wǎng)織紅細胞應(yīng)用逐漸增多,因臨床應(yīng)用時間不長,其性能尚有待觀察。ADVIA2120全自動血細胞分析儀是拜耳公司新推出的五分類機型,配備全自動網(wǎng)織紅細胞分析功能,可提供14項相關(guān)參數(shù),因部份指標臨床意義尚無確論,故本文僅選擇6項與細胞數(shù)量相關(guān)的指標進行評價?,F(xiàn)進行重復(fù)性、線性、攜帶污染率、穩(wěn)定性測試,并與手工百分率分類結(jié)果進行比較,報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 標本來源 住院患者,網(wǎng)織紅細胞按儀器初步測量結(jié)果分為高、中、低三類。

1.1.2 設(shè)備 美國ADVIA2120全自動血細胞分析儀、日本OLYMPUSBX-60多功能光學(xué)顯微鏡、上海醫(yī)療設(shè)備廠HH-W21-600電熱恒溫水育箱、姜堰康健醫(yī)療器具有限公司KJRM-1搖勻器。

1.1.3 ADVIA2120全自動血細胞分析儀原裝配套試劑及全血質(zhì)控品(批號0605204);珠海貝索公司網(wǎng)織紅細胞染液和瑞氏染液,按試劑使用說明操作。廣州陽普公司EDTA-K2血常規(guī)抗凝管(批號0602012)。

1.2 方法 按相關(guān)評價原則,ADVIA2120全自動血細胞分析儀重復(fù)測定樣本,評價儀器日內(nèi)精密度、日間精密度、線性、攜帶污染率和穩(wěn)定性,測定前搖勻器正、反向搖動3min。

1.2.1 日內(nèi)精密度 按美國臨床實驗室標準化委員會(NC-CLS)制定的方案 [1] ,選擇本院住院患者血樣,網(wǎng)織紅細胞按儀器初步測量結(jié)果分為高、中、低三類,各1份,每份重復(fù)測定10次,并計算平均值(x)和變異系數(shù)(CV)。

1.2.2 日間精密度 因臨床血標本穩(wěn)定性差,故以原廠全血質(zhì)控品每日9:00、12:00、16:30測定三次,取均值,連續(xù)測定10d,并計算平均值(x)和變異系數(shù)(CV)。

1.2.3 線性評價 按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)制定的線性驗證方案EP6-A [2] ,選擇一份網(wǎng)織紅細胞細胞高值樣本,在技術(shù)指標范圍內(nèi)做比例稀釋,儀器測定各濃度2次,取均值,所得數(shù)據(jù)進行回歸分析。

1.2.4 攜帶污染率 按國際血液學(xué)標準化委員會制定的程序 [3] ,將高值樣本連續(xù)測定3次(H 1 、H 2 、H 3 ),緊接著連續(xù)測定低值樣本3次(L 1 、L 2 、L 3 ),攜帶污染率結(jié)果為[(L 1 ~L 3 )/(H 3 -L 1 )]×100%。

1.2.5 穩(wěn)定性試驗 因血樣皆為低溫保存,考慮溫度為主要影響因素。取一份血樣分為3管,放置于4℃冰箱。分別于0min、15min、30min、45min、1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、24h、48h、72h每個時間點測定3次,取均值。

1.2.6 相關(guān)性評價 按NCCLS H20-A1 [4] 文件,將30份標本制作3張血片,2名有經(jīng)驗的主管技師隨機各選一張,雙盲法計數(shù)網(wǎng)織紅細胞百分率 [5] ,取均值后與儀器測定結(jié)果進行相關(guān)性比較。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行配對t檢驗和回歸分析。

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2 結(jié)果

2.1 日內(nèi)精密度測試 高值項目日內(nèi)精密度較好,低值項目高核酸濃度網(wǎng)織紅細胞比率(%)日內(nèi)精密度偏大。見表1。

表1 ADVIA2120網(wǎng)織紅細胞測定日內(nèi)精密度(略)

2.2 日間精密度測試 高值項目日間精密度較好,低值項目高核酸濃度網(wǎng)織紅細胞比率(%)日精密度偏大。見表2。

表2 ADVIA2120網(wǎng)織紅細胞測定日間精密度(略)

2.3 線性評價 初始計數(shù)為0.38×10 12 /L的樣本按比例稀釋后理論結(jié)果為(0.304、0.228、0.152、0.076、0.038)×10 12 /L,實際測定結(jié)果為(0.298、0.231、0.148、0.063、0.033)×10 12 /L,得回歸曲線y=1.0225x-0.0086,相關(guān)系數(shù)r為0.9989,P>0.05。(見圖1)

2.4 攜帶污染率 高值樣本3次測定結(jié)果分別為H 1 =0.64×10 12 /L、H 2 =0.67×10 12 /L、H 3 =0.65×10 12 /L,低值樣本3次測定結(jié)果分別為L 1 =0.03×10 12 /L、L 2 =0.03×10 12 /L、L 3 =0.02×10 12 /L,攜帶污染率0.22%。穩(wěn)定性試驗:4℃冷藏后測定,百分率結(jié)果均值分別為6.42%(0min)、6.18%(15min)、6.27%(30min)、6.19%(45min)、6.33%(1h)、6.22%(2h)、6.34%(3h)、6.28%(4h)、6.21%(5h)、6.35%(6h)、6.37%(7h)、6.25%(24h)、5.68%(48h)、5.21%(72h),結(jié)果顯示24h內(nèi)網(wǎng)織紅細胞百分率變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),48h后網(wǎng)織紅細胞百分率降 低,變化有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。

圖1 ADVIA2120全自動血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞線性評估(略)

圖2 網(wǎng)織紅細胞ADVIA2120測定與手工法測定相關(guān)性(略)

3 討論

網(wǎng)織紅細胞測定在各種貧血的鑒別診斷、療效觀察、腫瘤患者放、化療后骨髓造血功能評估等有著重要的臨床意義,及時、準確的網(wǎng)織紅細胞測定有利于動態(tài)了解骨髓紅系增生情況。ADVIA2120全自動血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞測定原理是先用戊二醛和十二烷基硫酸鈉將紅細胞球形化并固定,氧氮雜芑750使RNA染藍色,著色程度與RNA含量成正比,細胞通過FLOWCELL在激光照射下產(chǎn)生散射,應(yīng)用MIE原理,得到網(wǎng)織紅細胞的14項測量參數(shù)和計算參數(shù),因?qū)W(wǎng)織紅細胞血紅蛋白濃度分布寬度、血紅蛋白含量分布寬度等指標臨床意義尚無確論,故僅選擇6項與細胞數(shù)量相關(guān)指標進行評價。

從結(jié)果看,ADVIA2120全自動血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞測定具有良好的精密度,除高核酸濃度網(wǎng)織紅細胞比率因計數(shù)值較低,故cv值在日內(nèi)和日間偏大外(13.82%~17.4%),其它項目cv值在1.18%~8.19%之間,處于理想范圍之內(nèi)。穩(wěn)定性測試表明4℃24h內(nèi)網(wǎng)織紅細胞百分率結(jié)果穩(wěn)定,結(jié)果的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05,CV3.8%),48h后網(wǎng)織紅細胞百分率降低。低溫雖能減緩紅細胞新陳代謝,但網(wǎng)織紅細胞向成熟紅細胞的轉(zhuǎn)化未完全停止,時間過長導(dǎo)致RNA降低的比率增高并出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05,圖1),攜帶污染率低(0.22%),達到臨床應(yīng)用要求。與手工法的百分率結(jié)果比較相關(guān)性佳(r=0.9962,P>0.05,圖2),考慮到儀器法檢測細胞數(shù)量大,可有效避免細胞在血片分布上的統(tǒng)計學(xué)誤差,特別是低值測量結(jié)果,因此儀器法應(yīng)更為理想。臨床應(yīng)用中遇1例瘧疾患者樣本,入院儀器查血色素68g/L,RBC2.23×10 12 /L,網(wǎng)織紅細胞計數(shù)0.32×10 12 /L,網(wǎng)織紅細胞百分率14.35%,經(jīng)外周血片瑞氏染色,感染蟲體之RBC為10.3%(計數(shù)1000個RBC),抗瘧治療3周后查血色素85g/L,RBC3.03×10 12 /L,網(wǎng)織紅細胞計數(shù)0.08×10 12 /L,網(wǎng)織紅細胞百分率2.64%,外周血片瑞氏染色未查見蟲體和受染RBC。文獻報道受瘧原蟲感染的RBC中RNA含量是增加的 [6] ,那受染RBC在RNA增高時是否歸為網(wǎng)織紅及RNA不高時如何區(qū)分則缺乏妥善的處理辦法。在手工煌焦油藍活體染色、ADVIA2120的氧氮雜芑750染色及sysmex2100的熒光染色不能分辨的情況下,對瘧疾血樣做外周血片瑞氏染色,計數(shù)受染細胞比例,可大致判定干擾程度。

總體而言,ADVIA2120全自動血細胞分析儀網(wǎng)織紅細胞測定避免了傳統(tǒng)手工法的諸多缺點,如肉眼判讀的主觀性、細胞的分布誤差、檢測的低效率等問題,在全血分析時可根據(jù)情況隨時選擇加做網(wǎng)織紅分析,無需再取血樣,其便利性和高效性是手工法無可比擬的,加之重復(fù)性、穩(wěn)定性、準確性及攜帶污染率各指標均符合臨床應(yīng)用要求,在有條件的醫(yī)院全自動儀器法測定網(wǎng)織紅細胞是很好的選擇。

參考文獻

[1]Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A Sta-tistical Approach;Approved Guideline.NCCLS document EP9-A2,2002.

[2]Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A Sta-tistical Approach;Approved Guideline.NCCLS document EP6-A.Vol.23,2003.

[3] Protocol for evaluation of automated hematology analyzer.ICSH.Clin Lab Heamotal,1984,6:69.

[4]Reference leukocyte differential count(Proportional)and evaluation of in-strument methods,NCCLS document H20-A,vol12,1992.