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餡餅
那天被老媽叮囑去相親。據(jù)介紹人講，這個男孩很好，很有出息，很英俊?？墒?，天下英俊男生雖然多，我卻還沒墮落到上“非常男生”的地步。剛好頭天買的彩票中了300元，我便直奔那即將到手的300元而去。
車到站，我第一個躥下車，腳剛落地，頭上就被什么東西拍了一記，然后又是一記，剛站好又是一記，嚇得我再也不敢動，而地上正滾著3個漢堡包。
我一直覺得漢堡包是外國人的餡餅，你看吧，中國人長得比較瘦，所以餡餅也薄；外國人粗枝大葉，餡餅也就心寬體胖。我嚷嚷了起來：“誰干的？給我下來！”
我頭上頂著一片餡餅里的圓白菜葉兒，雙層巴士上伸出一個個腦袋，一臉無辜的樣子，接著就是一陣暴笑。
車開走了。這時，耳旁有個小聲音說：“小姐，對不起……”
彩票
是個男生，眼睛眨巴眨巴地：“小姐，我不是故意的，下車時人太擠了，一失手漢堡包掉了……”說著，他伸手要幫我摘掉頭上的菜葉，我一晃頭拒絕了?？墒沁@一晃頭，菜葉又搭到我額頭上了，看上去就像長了碧綠眼珠的二郎神，他忍不住哈哈大笑，說：“你別生氣了，這樣不好?！?/p>
怎么反倒他來安慰我了？明明做壞事的是他，他應(yīng)該被討伐才對！我就認(rèn)真地說：“你知道你今天犯了什么錯誤嗎？”
“我不應(yīng)該砸你?！?/p>
“不對，你主要是破壞了我的心情?！?/p>
“什么心情？”
“我今天本來很高興?！蔽夷贸隽瞬势?，“看見了沒有，我中獎了，可是，你破壞了我的心情。我中一次獎容易嗎？”
他笑了，眼睛小燈泡一樣亮起來：“看不出來，你也買彩票啊?！?/p>
那天的結(jié)果是，他跟我來到領(lǐng)獎地點，掏出200塊，全部買了和我相關(guān)的號碼，比如我注意過的出租車的牌子，我扔掉的車票票根號，我路過的廣告牌上面的電話。他說，“你是個幸運的人，你一出現(xiàn)，天上就掉餡餅?！?/p>
但是都沒中。
M記
那片圓白菜葉最后還是被拿掉了，而我也同意由他來彌補錯誤，請我吃一頓豐盛的M記。其實M記有什么好吃的，不過就是漢堡、雞翅、可樂，但是你知道，有時候上M記并不僅僅只是為了吃東西，古人說秀色可餐、說對酒當(dāng)歌，真的是為了吃和喝嗎？當(dāng)然不是，古人是為了審美和抒情啊！
我觀賞著這位帥哥，他有麥殼色的皮膚、烏漆漆的眉眼，而且還對我百依百順。
“喂，你干嗎一次要買3個漢堡呢？”
他笑呵呵：“一日三餐啊?！?/p>
“天天吃漢堡？”
他點頭。
我忽然敬仰他了，一個人天天吃漢堡還能長這么好看，不簡單！“你是干什么的？”
“我啊，沒什么事可做，在家寫寫小說?！?/p>
我暈，遇到作家了。
作家
最怕就是作家了，鄙人認(rèn)為：“作家一般都有點精神分裂?！彼?，那天我和這位名叫李白的作家分手后，就沒再打算和他聯(lián)系，雖然他給我留了MSN和QQ號碼。
我回到我的小房子里，這是我的家，也是我的店，畢業(yè)后我就一直生活在這里，對面就是我讀了4年書的大學(xué)。我姐出國后，爸媽就搬到她的高樓大廈里去了，我正好盤踞了老巢，索性把一樓改成了店面，專門賣鞋子。
鞋子由本人設(shè)計，請清芬路的老鞋匠手工制作，每做一雙我給他50元手工費，其余的由我來搞定，進(jìn)貨、交稅、宣傳，種種下來，如果每雙鞋子賣到300塊的話，我就可以賺80塊，真是爽歪歪。
我這人沒什么大志向，每天吃得飽，睡得好，買彩票，過得快活就可以了，我爸媽終于承認(rèn)他們的女兒也就是個小老板的命。他們就說：“唉，由她去吧。”
但有件事他們一直沒有放松過，那就是相親，三天兩頭，我就要被拉出去相一次親，我就像是化學(xué)試驗品，他們不停地把各種男生扔到我的實驗皿里，看會不會發(fā)生爆炸、火花或者產(chǎn)生氣體什么的。
比如今天，我去見的是一位大相撲，爸媽也真夠狠心的，竟然想把他們的女兒嫁給一頭“大象”，就不怕他一巴掌像拍蚊子一樣把我拍死？我扭頭就走，不行，我要斷了爸媽給我相親的念想。
我就想起李白。我想起他是有原因的：第一，他是新人，不像我那幫狐朋狗友，個個臉熟，一看就知道是托兒；第二，他有實力，人長得順眼，表情也陽光，是招人疼的典型。
金城武
第二天是周末，下午兩點李白準(zhǔn)時出現(xiàn)在我的小店門口，還穿了一雙锃亮的大黑皮鞋。
我們步行到爸媽家，快進(jìn)小區(qū)時我挎著他的胳膊，極其恩愛的模樣。事如所愿，爸媽眉開眼笑，連我自己也很有成就感。
走出小區(qū)，禁不住呼了口長氣，我不用再挎著他胳膊了，他卻開始一瘸一拐起來。我說，你怎么啦？他指指他的腳，我的天，細(xì)皮一雙腳，硬是給新皮鞋磨出一個大血泡！
“你何苦穿這個啊，真笨哎你?！?/p>
“我這不是為了裝得像一點啊?！彼氐晌?。
正巧到了我的店，順手給了他一雙麂皮拖鞋，總體算下來，還賺了。
第二天，李白又來了，手里提著個口袋，裝著那雙麂皮鞋。他說：“謝謝，我來還給你?！?/p>
我一拍桌子：“呸，真有你的！”他嚇得一哆嗦，連忙改口：“我買，我買下來還不行嗎？”
他用220塊人民幣買下那雙麂皮拖鞋，走了。其實他不知道，這雙鞋已經(jīng)在我的櫥窗里陳列很久很久了，從來沒有人來買它，因為它的顏色太特別了，款式太簡單了，樣子太不討好了。
但是李白穿它就很好看，你看他懶洋洋，一身棉布衣褲，配著這雙模樣奇特的鞋，很像T臺上走過來的小男模，不，金城武，他像金城武！
麂皮鞋子
有了麂皮鞋的李白總是時不時地跑來溜一圈，顯得挺牛。這樣一來，我店里的女顧客開始激增，多是對面大學(xué)里的女孩子。唉，美色當(dāng)前，誰不惻隱？我看著這個年輕的男孩，想，如果很久以后，我要找一位愛人，我希望像李白再長大一點的樣子，他也要穿著舊舊的麂皮鞋，懶洋洋地在陽光里走，他也要有這樣的眼睛這樣的笑容……
“喂，你想什么呢？”李白把臉湊過來，看著我。
我們臉對臉，眼對眼，這已經(jīng)是晚上9點半，店里要打烊了。他這么看著我，我一時有點發(fā)暈，隨口說：“李白，你多大？”
“干嗎？要和我相親??？”
“算了，懶得理你?！?/p>
“我29歲，射手座，和處女座最配了，未婚?！彼谋砬楹鋈缓茑嵵?。
“你發(fā)傻？”
他坐在我的桌子上，垂著的腳上，掛著我設(shè)計的麂皮鞋。他說：“告訴我，你是不是灰姑娘？”
“灰姑娘？不不不，灰姑娘有水晶鞋，我只有麂皮鞋?！?/p>
“是一樣的，你的麂皮鞋也會幫你找到你想找的人?！彼跗鹞业哪?，煞有介事地說。
在我和李白戀愛以后，我才知道，被砸了3個漢堡的那一天，不僅僅是我的相親日，我的男朋友李白亦是如此。
“你挑的是哪家姑娘？不會是我吧……”我心虛地問。
“很有可能?！彼艹羝ǖ卣f。
作為新時代的生存方式，網(wǎng)絡(luò)生活正變得普及，它讓我們置身于信息的海洋，隨時參與社會的變遷。而作為時代的驕子，未來社會的主人，大學(xué)生是如何運用網(wǎng)絡(luò)，如何在寒假這段時間享受網(wǎng)絡(luò)生活的呢?這兩種新勢力的碰撞又將給我們的社會帶來怎樣的希望與擔(dān)憂呢?了解大學(xué)生的網(wǎng)絡(luò)生活狀況對于更加準(zhǔn)確的把握時代前進(jìn)的方向十分重要，所以我們在此將其列為實踐報告的主題，調(diào)查了寒假期間部分大學(xué)生的上網(wǎng)情況?，F(xiàn)將此次實踐活動的有關(guān)情況報告如下：
一，關(guān)于上網(wǎng)頻率和用途的調(diào)查
調(diào)查顯示，大多數(shù)大學(xué)生在寒假期間都會上網(wǎng)。上網(wǎng)頻率一般以幾天上一次網(wǎng)居多。上網(wǎng)的時間一般控制在2-5小時?？葱侣劇⒉樾畔?、收發(fā)郵件、下載軟件或資料、制作主頁、跟帖灌水、交友聊天和娛樂休閑等為大學(xué)生進(jìn)行的常規(guī)上網(wǎng)任務(wù)。據(jù)有關(guān)資料顯示：前三者的比率較高，分別占到66%、67%和68%;上網(wǎng)目的只為完成上述內(nèi)容的某個單項或雙項者占24%，76%的人上網(wǎng)為完成上述3項以上的多重任務(wù)。人均電子郵箱2.46個，每周人均收發(fā)郵件3.34封。做過版主和建有個人主頁者的比率分別為10%和15%。而在調(diào)查的大學(xué)生中，男女生的上網(wǎng)情況又有所不同，以下是詳細(xì)數(shù)據(jù)：
男生女生上網(wǎng)人數(shù)情況百分率差異表
上網(wǎng)頻率(天/次) 用途
0 1 2-6 7 30 30以上 了解信息 娛樂 學(xué)習(xí) 聯(lián)絡(luò)
男生 0.00% 17.65% 43.14% 23.53% 1.96% 0.00% 68.63% 80.39% 13.73% 49.02%
女生 0.00% 5.80% 47.10% 42.75% 10.14% 3.62% 68.12% 87.68% 28.99% 74.01%
平均 0.00% 8.99% 46.03% 37.57% 7.94% 2.65% 68.25% 85.71% 24.87% 64.55%
從表中我們可以看出，男生上網(wǎng)的頻率普遍比女生頻繁，大都集中在1-7天一次。而在用途方面，了解信息兩者大體相同，雖然女生在娛樂方面比男生還多1.29%,但在學(xué)習(xí)方面卻比男生高15.26%，這似乎體現(xiàn)了女生的自律性更高些，而在聯(lián)絡(luò)方面，女生的``愛嚼舌頭’’與``重感情’’是眾所周知的,因此,百分率比男生高24.99%也在意料之中。此外，調(diào)查顯示男生和女生中從未上過網(wǎng)的概率是零,而經(jīng)常接觸網(wǎng)絡(luò)的占半數(shù)以上。這說明網(wǎng)絡(luò)生活在大學(xué)生中已經(jīng)得到相當(dāng)?shù)钠占啊?/p>
縱觀平均百分率，在用途方面，據(jù)首位的不是獲取信息，也不是學(xué)習(xí)，而是娛樂。這也難怪，在這個充斥著誘惑的花花世界里，有太多太多吸引人的東西，作為新一代的我們，還未經(jīng)歷人生百態(tài)，世事滄桑，我們所擁有的閱歷還不能夠使我們在誘惑面前有張有弛，有時寧愿選擇娛樂，滿足一時的身心放松。但這也不是說我們對娛樂的態(tài)度應(yīng)該一見就嗤之以鼻，適當(dāng)?shù)膴蕵肥潜匾?，畢竟娛樂能放松一個人的身心，它的作用不是其他東西輕易能替代的。但世事萬物都遵循著一條不變的道理，那就是過猶不及，娛樂不應(yīng)該占主導(dǎo)，這就像網(wǎng)絡(luò)并不是單單為娛樂而發(fā)明的，我們始終都得記住網(wǎng)絡(luò)存在的意義是為了方便生活，方便信息交流。
二，關(guān)于網(wǎng)上聯(lián)絡(luò)的調(diào)查
網(wǎng)友個數(shù) 少于5 6到10 11到20 20以上
42% 24% 14% 21%
其中16%的人交有同性網(wǎng)友，交異性網(wǎng)友者多達(dá)65%;有大齡網(wǎng)友者僅占4%，而同齡網(wǎng)友比率高達(dá)79%
聊天工具 qq 聊天室 bbs 其他工具
70% 40% 40% 8%
交流思想感情和相關(guān)信息是網(wǎng)聊的經(jīng)常性話題，分別占到63%和53%，同時也有少量的胡扯和對罵現(xiàn)象，分別為17%和5%
看來上網(wǎng)聊天已成為現(xiàn)代大學(xué)生與人交流的重要方式，網(wǎng)絡(luò)交友已經(jīng)被大多數(shù)人所接受。調(diào)查顯示半數(shù)以上大學(xué)生有6個以上的網(wǎng)友，而有兩成被調(diào)查者有多達(dá)20以上的網(wǎng)友，可以稱這些被調(diào)查者已經(jīng)在網(wǎng)絡(luò)這個虛擬社會建立了一個不簡單的人際網(wǎng)絡(luò)。大家似乎對交異性同齡網(wǎng)友情有獨鐘，而大齡網(wǎng)友只占4%，非常的稀少?？傮w上網(wǎng)聊的話題與實際生活中相似，但也存在胡扯與對罵等不文明現(xiàn)象，雖然它們所占比例較少，但反映的問題仍不可被忽視。
三，關(guān)于網(wǎng)游態(tài)度的調(diào)查
1上網(wǎng)與學(xué)習(xí) 耽誤學(xué)習(xí) 促進(jìn)學(xué)習(xí) 不促進(jìn)學(xué)習(xí)但增加綜合素質(zhì)
6% 18% 81%
2 網(wǎng)絡(luò)信息可信度 較高 一般 較底
11% 73% 16%
3 網(wǎng)絡(luò)黑客 崇拜 明確反對 有機會也想嘗試
29% 27% 44%
4 網(wǎng)戀 支持 反對 既不提倡也不反對
11% 13% 77%
網(wǎng)絡(luò)是一把雙刃劍，它在給大家提供方便的同時，也可能在我們周圍埋下隱患。以上數(shù)據(jù)表明，大部分大學(xué)生是贊成網(wǎng)游的，積極肯定上網(wǎng)對于提高綜合素質(zhì)的作用?；蚩尚牢康氖?，這些調(diào)查結(jié)果意味著網(wǎng)絡(luò)信息的可信度有所提高，整治網(wǎng)絡(luò)的工作取得了一定的成效。但這不意味著可以放松警惕，畢竟網(wǎng)絡(luò)是存在風(fēng)險的。
由于大部分大學(xué)生不反對網(wǎng)絡(luò)黑客，這讓人對于網(wǎng)絡(luò)安全性不免產(chǎn)生擔(dān)憂。眾所周知，電腦一旦感染病毒就不能正常運行，里面的重要資料信息可能被盜取，如遇到病毒泛濫，整個感染的局部網(wǎng)絡(luò)都有癱瘓的危險，而由此帶來的經(jīng)濟損失將無法估量。
另外，大學(xué)生對待網(wǎng)戀的態(tài)度比較成熟，只有11%的人相信網(wǎng)戀，多數(shù)人持觀望態(tài)度。
一些看法與思考
通過此次調(diào)查，我們對信息時代這個大潮流下大學(xué)生的網(wǎng)絡(luò)生活作了初步了解。這其中有意料之外的結(jié)果，也有情理之中的答案;有令人擔(dān)憂的滯后，也有使人欣慰的進(jìn)展?？傮w來說，網(wǎng)絡(luò)生活之于大學(xué)生利大于弊，大學(xué)生對待網(wǎng)絡(luò)生活的態(tài)度積極向上。網(wǎng)絡(luò)還在繼續(xù)的發(fā)展與完善，就像當(dāng)代大學(xué)生還在不斷的學(xué)習(xí)和進(jìn)取。雖然他們都還不夠成熟，但他們都在走向成熟。或許現(xiàn)在還看不到他們開出嬌艷的花朵，但不久后一定能品嘗到他們結(jié)出的飽滿果實。
有人曾這樣反駁那些害怕甚至敵視飛行的人，“不是人人都會碰上空難，乘坐飛機比大多數(shù)運動更為安全，汽車和火車也并不是你想象的那么安全，而是常常只有空難才能‘榮登’媒體的頭條”，于是說乘坐飛機其實很安全，那么我至少可以在這里肯定上網(wǎng)比乘飛機更加的安全!調(diào)查的結(jié)果應(yīng)該也說服了不少網(wǎng)絡(luò)者，此次的調(diào)查如果能增加大家對于網(wǎng)絡(luò)的信心，也是我們所樂于看到的。
(一)中學(xué)生及其家長對網(wǎng)絡(luò)的態(tài)度和相關(guān)行為的情況
1.中學(xué)生上網(wǎng)率極高，上網(wǎng)時間長，多數(shù)家長卻從未上過網(wǎng)，大部分教師上網(wǎng)經(jīng)驗不夠豐富
2.多數(shù)中學(xué)生對在校上網(wǎng)的條件不滿意，家長、教師呼吁改善條件
3.多數(shù)家長既贊成子女上網(wǎng)，又擔(dān)心子女上網(wǎng)影響學(xué)業(yè)
(二)網(wǎng)絡(luò)環(huán)境對中學(xué)生的影響
1.網(wǎng)絡(luò)環(huán)境對中學(xué)生的積極影響
(1)中學(xué)生使用互聯(lián)網(wǎng)有助于形成全球意識，強化對國家對民族的責(zé)任感。透過網(wǎng)絡(luò)的窗口，他們關(guān)注家事、國事、天下事，使視野空前開闊起來。全球意識的增強，適應(yīng)了中國加入wto的新形勢，對于中學(xué)生們今后走入日趨一體化的世界，顯然是大有好處的。
(2)互聯(lián)網(wǎng)為中學(xué)生學(xué)習(xí)提供了有利條件，拓寬了他們的視野。網(wǎng)絡(luò)資源在一定程度上滿足了中學(xué)生們進(jìn)行探究性學(xué)習(xí)、研究性學(xué)習(xí)的需要。
(3)中學(xué)生使用網(wǎng)絡(luò)有助于擴大交往的范圍，促進(jìn)青春期心理的健康發(fā)展。網(wǎng)絡(luò)上，電子郵件、oicq、聊天室、bbs等把天涯海角、素不相識的人拉到零距離，在相互咨詢、交談、討論、傾訴、請教的過程中，極大地滿足了中學(xué)生們旺盛的表達(dá)欲、表現(xiàn)欲和社交欲。這對于舒解壓力，保持青春期的心理健康有一定的好處。
(4)中學(xué)生常上網(wǎng)，激發(fā)了對英語和現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的學(xué)習(xí)熱情。
2.網(wǎng)絡(luò)對中學(xué)生的負(fù)面影響
(1)網(wǎng)上信息垃圾使中學(xué)生深受其害。
(2)中學(xué)生迷戀網(wǎng)絡(luò)對學(xué)業(yè)產(chǎn)生沖擊。
(3)網(wǎng)上聊天引發(fā)網(wǎng)戀，調(diào)查顯示，6.7%的中學(xué)生坦言自己有過網(wǎng)戀行為(實際比例會更多)。網(wǎng)戀中存在許多情感陷阱，中學(xué)生往往是受害者。
(4)網(wǎng)絡(luò)不良文化弱化了中學(xué)生的道德意識。
(5)網(wǎng)吧管理問題依然嚴(yán)重，給中學(xué)生造成諸多問題。
(三)對策與建議
網(wǎng)絡(luò)環(huán)境對中學(xué)德育工作提出了新的挑戰(zhàn)，同時也提供了許多機遇。xx同志在中央思想政治工作會議上強調(diào)指出：對于信息網(wǎng)絡(luò)化問題，我們的基本方針是積極發(fā)展，加強管理，趨利避害，為我所用，努力在全球信息網(wǎng)絡(luò)化的發(fā)展中，占據(jù)主動地位。這是我們進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)德育工作的指導(dǎo)思想。我們建議：
1.更新教育觀念，推進(jìn)學(xué)校網(wǎng)絡(luò)德育工作的開展
第一，通過宣傳和學(xué)習(xí)，使全體德育工作者轉(zhuǎn)換觀念，統(tǒng)一思想認(rèn)識，拋棄網(wǎng)絡(luò)有害論，消除網(wǎng)絡(luò)恐慌癥，充分認(rèn)識到網(wǎng)絡(luò)德育的重要性和網(wǎng)絡(luò)在中學(xué)生成長過程中的重要作用。
第二，重新定位學(xué)校德育的目標(biāo)，把青少年兒童的道德成熟度作為網(wǎng)絡(luò)德育的首要目標(biāo)，著力培養(yǎng)學(xué)生正確的道德價值觀、判斷力和自制力。
第三，重新設(shè)計學(xué)校德育的內(nèi)容，在原有德育內(nèi)容的基礎(chǔ)上突出價值觀教育，增強識別評價和選擇道德信息的能力;注重道德意志力的訓(xùn)練，使學(xué)生的道德認(rèn)識與行為實踐統(tǒng)一起來;開設(shè)網(wǎng)絡(luò)德育課程，強化學(xué)生的網(wǎng)絡(luò)道德意識和網(wǎng)絡(luò)責(zé)任感。
第四，利用計算機和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)，拓展德育的時間和空間。
2.培養(yǎng)網(wǎng)絡(luò)德育隊伍，增強網(wǎng)絡(luò)德育力量
其一，通過各種形式的培訓(xùn)、講座和考核，使各級教育管理者、德育工作者以及全體教師掌握網(wǎng)絡(luò)基本知識、技能，并熟悉網(wǎng)絡(luò)德育的運作方式和手段，學(xué)會常見的德育課件開發(fā)工具(如authware、director、flash等)。在講求實效的前提下，改進(jìn)和充實目前實施的沙河市中小學(xué)教師計算機考核的方式與內(nèi)容，如增加教師利用網(wǎng)絡(luò)開展道德工作的考核內(nèi)容。
其二，選拔并培訓(xùn)一批思想政治素質(zhì)高，網(wǎng)上溝通技巧好，具有豐富的網(wǎng)絡(luò)經(jīng)驗和技能的專兼職網(wǎng)絡(luò)德育工作者，由他們提供在線指導(dǎo)，幫助上網(wǎng)中學(xué)生解決各種心理、思想、學(xué)習(xí)等問題;同時，注意在網(wǎng)上收集整理有代表性的德育問題，向有關(guān)職能部門反饋，以加強德育工作的針對性。
3.加強對中學(xué)生進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)道德和網(wǎng)絡(luò)行為規(guī)范教育，自覺筑起心靈的長城
一是加強以理想信念為主題的思想品質(zhì)教育，用正確的人生觀、世界觀和價值觀筑起心靈的長城，抵制網(wǎng)上各種不良思潮和有害信息的侵蝕。
徐東商圈位于長江二橋徐東區(qū)域，近年來已躍升為武漢五大商圈之一，商業(yè)基礎(chǔ)雄厚，區(qū)位優(yōu)勢明顯，發(fā)展后勁充足，擁有銷品茂、歐亞達(dá)、?？兔⑿率澜绨儇浀却笮土闶圪u場，以及華電、省電、湖北能源、光明萬麗等電力、金融、證券、酒店類企業(yè)1000余家。商圈周圍交通發(fā)達(dá)，十分鐘內(nèi)即達(dá)漢口、青山、洪山等地區(qū)；商圈內(nèi)高端住宅林立，擁有近80萬人口，輻射人口近200萬。目前，徐東商圈已經(jīng)形成了企業(yè)總部、金融服務(wù)、商貿(mào)流通、家具建材、生活休閑等業(yè)態(tài)，商圈日平均人流量110萬，日平均車流量130萬，“大徐東”的概念深入人心。
二、發(fā)展現(xiàn)狀
1.商業(yè)形態(tài)成熟化
徐東商圈經(jīng)過十幾年的積蓄和發(fā)展，已經(jīng)成為武漢商業(yè)形態(tài)最集中、最多樣化的商圈之一，涵蓋大型百貨、購物中心、專業(yè)賣場、大型超市、星級酒店及臨街店鋪等多種業(yè)態(tài)形式，商業(yè)氣息濃厚。
⑴大型百貨。新世界百貨（3.2 萬方）、中商百貨(2 萬方)、徐東平價（2.4 萬方）等區(qū)域影響力較大的百貨商場。
⑵購物中心。銷品茂（11萬方）、福客茂（3.7萬方）、凱旋門購物廣場及即將完工的華中首創(chuàng)生態(tài)劇場式購物中心—群星城（10萬方）。
⑶專業(yè)賣場。歐亞達(dá)國際家具博覽中心（8萬方）、工貿(mào)家電及徐東古玩城（2萬方）。
⑷大型超市。沃爾瑪、麥德龍、新一佳、中百倉儲等。
⑸其他。光明萬麗酒店（五星級）、華天大酒店（五星級）、金逸影城、銀星菲林國際影城、萬達(dá)影城、歡樂空間KTV、火車頭體育館、肯德基、麥當(dāng)勞、必勝客等。
2.總部經(jīng)濟高端化
由于地理環(huán)境優(yōu)越，商圈人流繁華，沿徐東大街一帶成長起來的總部經(jīng)濟已經(jīng)呈現(xiàn)出高端發(fā)展趨勢。目前區(qū)域類已擁有華電大廈、省電大廈、中鐵科工大廈、湖北能源大廈等企業(yè)總部大樓，福星惠譽國際城、中力企業(yè)大廈、水岸國際等高端寫字樓，以及在建的綠地國際金融城、匯通工貿(mào)總部大廈、江尚天地、菩提金國際金融中心等國際5A甲級寫字樓。隨著濱江文化商務(wù)區(qū)的建設(shè)不斷推進(jìn)，未來的徐東將會是高端商業(yè)和大型總部經(jīng)濟的聚集地。
3.高端住宅聚集化
徐東商圈地處武昌、青山、漢口、洪山等區(qū)域交界之處，輻射沙湖、毗鄰東湖，區(qū)域內(nèi)高端樓盤林立，目前已有華電社區(qū)、省電社區(qū)、省直公務(wù)員小區(qū)、水岸星城、水岸國際、都市經(jīng)典、國際城、世紀(jì)花園等高端小區(qū)40多個，另有東原時光道、江尚天地、都市經(jīng)典二期、航天首府等20多個在建項目。目前商圈3公里范圍內(nèi)居住著80萬人，輻射人口達(dá)200萬，中高層消費群體比例達(dá)50%，整體具有較強購買力。
4.休閑購物一體化
徐東商圈除擁有大型購物中心、百貨及商業(yè)辦公樓宇之外，還具備大量娛樂休閑設(shè)施。餐飲方面，實現(xiàn)高中低端消費群全覆蓋，并有沙湖路飲食一條街等特色餐飲聚集地；運動健身方面，有火車頭體育館、空中健身會所等；娛樂方面，有法老王國際會所、羅馬之夜國際俱樂部、歡樂空間KTV、百樂天KTV等；休閑方面，有武漢最大的城中湖公園沙湖公園、全國最大的城中湖東（部分區(qū)域）湖、獨處幽靜的公園四美塘等。至此，徐東商圈已基本能解決各類人群在衣、食、住、行、樂等方面的需求，形成休閑購物一體化的商業(yè)模式。
三、競爭優(yōu)勢
1.區(qū)位優(yōu)勢明顯
徐東商圈地處武漢三鎮(zhèn)核心區(qū)域，位于武漢內(nèi)環(huán)線主干道，是長江二橋和長江隧道的出入口所在地。商圈核心區(qū)域位于友誼大道和徐東大街交匯區(qū)域，以徐東大街、友誼大道為主軸向四周輻射，并經(jīng)由中北路連接中南商圈。友誼大道南接中山大道，北抵武鋼集團，是武昌的經(jīng)濟大動脈之一，同時也是連接武昌、青山、洪山的主干道，能夠為徐東商圈帶來源源不斷的人流。徐東大街往東直通東湖，往西直達(dá)長江二橋，是連接武昌和漢口的主通道之一。商圈30分鐘車程內(nèi)居住著武漢市50%的人口，其輻射范圍南至司門口、中南商圈，北至整個青山區(qū)，擁有武鋼、中電、華電等大量消費人群。
2.區(qū)域交通便捷
徐東商圈位于武漢、武昌、漢口三大火車站的中心區(qū)域，已經(jīng)建成的地鐵2、4號線經(jīng)過商圈次核心區(qū)域，正在建設(shè)的地鐵7、8號線以及規(guī)劃中的5號線將全部經(jīng)過商圈核心區(qū)域，加之商圈內(nèi)有公交線路40余條，能夠通達(dá)武漢三鎮(zhèn)，基本形成了30分鐘遍達(dá)武漢主城區(qū)、1小時內(nèi)遍達(dá)武漢城市圈的交通出行格局。
3.商業(yè)形態(tài)多樣
縱觀武漢各大商圈，武廣商圈依靠江漢路步行街帶來巨大人流量以維持自身繁榮發(fā)展，光谷商圈依靠光谷步行街和周邊強大高校資源日益發(fā)展壯大，中南商圈則以中商集團中商廣場和武商集團亞貿(mào)廣場為核心，主打高端百貨業(yè)，主體業(yè)態(tài)較為單一，因此在地鐵2號線開通后，該商圈受到了明顯沖擊。盡管徐東商圈同樣缺乏步行街強大人流帶動，但因其商業(yè)形態(tài)多樣，對周邊人群吸附力強，依然能夠保持快速發(fā)展。
目前徐東商圈已形成高端百貨、大型購物中心、專業(yè)家具建材賣場、特色街區(qū)、大型超市、沿街鋪面等多種商業(yè)形態(tài)，即將開業(yè)的華中首創(chuàng)生態(tài)劇場式購物中心群星城，以及規(guī)劃中集高檔商業(yè)、寫字樓、酒店、居住、休閑、旅游等業(yè)態(tài)于一體的萬噸冷庫城市綜合體項目，將進(jìn)一步強化商圈發(fā)展的自我“造血”功能。
四、存在不足
1.周邊環(huán)境和配套設(shè)施不完善
⑴配套交通有待優(yōu)化。雖然商圈內(nèi)主干道交通發(fā)達(dá)，但是高峰時期擁堵現(xiàn)象依然嚴(yán)重，特別是在徐東大街和友誼大道相交的十字路口區(qū)域，上下班期間車行尤為緩慢。此外，商圈微循環(huán)道路明顯欠缺，微循環(huán)道路破損以及占道經(jīng)營、占道停車現(xiàn)象較為嚴(yán)重，容易形成交通“腸梗阻”，給車輛出入商圈造成不便。
⑵周邊環(huán)境不夠美觀。由于商圈區(qū)域內(nèi)部分路段沿線房屋劃入拆遷范圍，道路和房屋陳舊，臟亂差現(xiàn)象突出，加之流動攤販帶來生活餐飲垃圾，嚴(yán)重影響了商圈的整體形象。
⑶配套公共設(shè)施不足。涼亭、垃圾桶、休閑椅等配套設(shè)施數(shù)量不足，大型休閑樂園和游樂場所欠缺開發(fā)等，使得消費體驗不夠完美。
2.商業(yè)特色和商圈人氣不理想
一方面，徐東片區(qū)的城中村改造工程不斷推進(jìn)，大量居民外遷，其中相當(dāng)一部分居民因限于還建房建設(shè)進(jìn)度暫時無法回遷，導(dǎo)致周邊居住人群大幅減少；另一方面，商圈特色尚不鮮明，對遠(yuǎn)離商圈輻射范圍的人群無法形成足夠的吸引力，導(dǎo)致商圈人氣尚不理想。
3.整體運作和經(jīng)營模式不創(chuàng)新
徐東商圈缺乏整體運作規(guī)劃，個體經(jīng)營模式單一、缺乏創(chuàng)新，同時絕大多數(shù)商戶的全過程服務(wù)意識不強，僅靠商品自身品牌效應(yīng)吸引客源。
4.整體規(guī)劃和商圈定位不明晰
徐東商圈橫跨武昌、洪山兩大行政區(qū)域，行政協(xié)調(diào)和政策扶持存在一定差異性，其中徐東大街洪山區(qū)域主要以總部經(jīng)濟大樓建設(shè)為主，而徐東大街武昌區(qū)域則主要以寫字樓和商業(yè)購物中心為主。此外，由于徐東商圈核心區(qū)域并未進(jìn)入濱江文化商務(wù)區(qū)戰(zhàn)略范圍之內(nèi)，其發(fā)展主要依靠自身地理和區(qū)位優(yōu)勢，在市場機制的作用下野蠻生長，商圈定位模糊不清，整體特色不明顯。
5.零售百貨和商業(yè)街區(qū)不連續(xù)
徐東商圈以徐東大街和友誼大道為主線向四周輻射，輻射范圍內(nèi)零售百貨和商業(yè)網(wǎng)點星羅棋布，但多為分段式分布，例如近年來發(fā)展迅猛、但與商圈核心區(qū)域無明顯商業(yè)街區(qū)連接的岳家嘴片區(qū)等，使得商圈發(fā)展不均衡、不連貫。
6.周邊生態(tài)環(huán)境優(yōu)勢未利用
徐東商圈周邊風(fēng)景名勝尤多，其中東湖作為全國最大的城中湖，有穩(wěn)定的客流量；沙湖公園作為全市最大的城中湖濕地公園，擁有良好人文地理環(huán)境；四美塘毗鄰長江，地處幽靜。商圈的消費者和以上區(qū)域的旅游者可互相轉(zhuǎn)換休閑方式，如消費者可在購物之余前往公園娛樂休憩，但由于地理阻隔，東湖、沙湖公園和四美塘公園與商圈核心區(qū)域未能實現(xiàn)很好對接，使得周邊生態(tài)環(huán)境優(yōu)勢未能充分利用。
五、相關(guān)建議
1.完善周邊環(huán)境和配套設(shè)施
⑴完善商圈交通。加大主干道交通疏導(dǎo)，強化上下班時期擁堵路段的交通指揮和車輛引導(dǎo)，對車輛進(jìn)出商圈區(qū)域設(shè)置合理指示牌；加大商圈區(qū)域內(nèi)微循環(huán)道路建設(shè)力度，重點清理宏祥路、宏茂巷、團結(jié)路、團結(jié)新村路等路段破損路面情況并進(jìn)行路面美化，盡快啟動沙湖環(huán)湖路與徐東大街的對接工作，保障沙湖周邊交通暢通。
⑵完善周邊環(huán)境。重點整治友誼大道、徐東大街等主干道，以及沙湖路、宏昌路、宏祥路等微循環(huán)道路的占道經(jīng)營、占道停車及臟亂差現(xiàn)象，確保責(zé)任到人、定期檢查、整治效果及時公布。同時加強對微循環(huán)道路的燈光照明和景觀裝飾，如設(shè)置特色盆景或文化雕塑，增添商圈人文氣息。
⑶完善配套設(shè)施。在商圈沿途添置休息凳、垃圾桶、自動販?zhǔn)蹤C等，同時加大急救醫(yī)療服務(wù)點、停車點等指示牌和商圈布局圖的分布密度，為消費者提供精細(xì)化服務(wù)。
2.凸顯商圈特色及其差異化
⑴挖掘現(xiàn)有商業(yè)體及街區(qū)特色。引進(jìn)一些特色小眾品牌和行業(yè)領(lǐng)軍企業(yè)門店，進(jìn)一步提升銷品茂、福客茂的整體運營水平；以歐亞達(dá)家居和居然之家為引領(lǐng)，打造徐東家居建材特色市場；鼓勵徐東古玩城升級改造，進(jìn)一步擴大經(jīng)營面積和影響力；支持沙湖路餐飲一條街建設(shè)，引導(dǎo)其提升飲食特色、消費環(huán)境和服務(wù)水平。
⑵加快推進(jìn)規(guī)劃或建設(shè)中的特色商業(yè)體項目。加快群星城及東原錦悅配套兒童主題特色街區(qū)等項目建設(shè)，豐富徐東商圈業(yè)態(tài)；著力推進(jìn)萬噸冷庫城市綜合體的招商引資工作，促使這一集高檔商業(yè)、寫字樓、酒店、居住、休閑、旅游等功能于一體的高端城市綜合體項目盡快落成；完善綠地國際金融城環(huán)境配套，助力提升徐東商圈消費吞吐量。
⑶積極謀劃一批新的特色街區(qū)。如將沙湖公園打造為雅文化聚集地，吸引文學(xué)愛好者、藝術(shù)家等定期在此聚會研討；引進(jìn)類如車庫咖啡、3W咖啡等主打草根創(chuàng)業(yè)者交流平臺的創(chuàng)意類商業(yè)主題，擴大穩(wěn)定型消費群體種類；建立電子商務(wù)聚集地，彌補徐東商圈業(yè)務(wù)空白等。
3.創(chuàng)新整體運作和經(jīng)營模式
一方面鼓勵各商家加強合作，跨越商業(yè)形態(tài)，開展以節(jié)慶為主題的大數(shù)據(jù)庫營銷活動，活躍商圈氛圍，實現(xiàn)共同發(fā)展，同時針對客戶消費習(xí)慣建立檔案，定期了解客戶需求、獲取反饋，實現(xiàn)深度情感溝通，培養(yǎng)穩(wěn)定客源；另一方面引導(dǎo)商家充分利用微信、微博、團購網(wǎng)站等多種營銷載體，如將產(chǎn)品優(yōu)惠信息以手機短信的形式發(fā)送給路過此地的潛在客戶，從而突破地域限制，吸引傳統(tǒng)經(jīng)營模式難以觸及的客戶群前來消費。
4.加強整體規(guī)劃和區(qū)域定位
⑴加強與洪山區(qū)的協(xié)調(diào)合作。洪山以總部經(jīng)濟建設(shè)為主，武昌則主打商業(yè)購物中心和寫字樓，鑒于徐東商圈處于紐帶地位，兩區(qū)應(yīng)加強協(xié)調(diào)合作，實現(xiàn)在商圈招商引資、城市管理等方面的優(yōu)勢互補，同時嚴(yán)格控制徐東大街沿街地塊住宅開發(fā)，合理布局商業(yè)形態(tài)。
⑵加快與濱江文化商務(wù)區(qū)的融合發(fā)展。徐東商圈部分區(qū)域位于濱江文化商務(wù)區(qū)范圍，在謀劃其發(fā)展定位時，應(yīng)注重與濱江文化商務(wù)區(qū)的對接，提供相適應(yīng)的購物休閑和生活娛樂配套，從而借力我區(qū)“三區(qū)融合，兩翼展飛”發(fā)展戰(zhàn)略，帶動商圈整體提檔升級。
⑶加速商圈沿片舊城改造。針對團結(jié)路與宏祥路沿線房屋破舊、年久失修的問題，加快推動這一片區(qū)的舊城改造工程，并將該片區(qū)域兩家危險因素較高的公司（占地面積17畝的武漢漢石石油運輸有限公司和占地面積30畝的武煤百江燃?xì)庥邢薰荆﹨f(xié)調(diào)搬出商圈中心地帶。同時，穩(wěn)步推進(jìn)岳家嘴漬水區(qū)改造，減小季節(jié)性水淹的發(fā)生頻率和負(fù)面影響，煥新商圈形象。
近半市民出境游選擇自由行
歐洲、日韓、東南亞受追捧
當(dāng)問及市民出境旅游最想去的旅游目的地時，除30.8%的市民表示沒有考慮或不確定具體地方，其他則首選西歐、北歐等國家，占比達(dá)15.7%，其次為日韓，占比14.5%，排在第三位的是東南亞國家，占比11.3%。歐洲國家和日韓受追捧主要與人民幣匯率升值、購物免稅及護照簽證條件放寬等一系列利好因素有關(guān)。
48.5%市民建議建不文明檔案
因工作需要，商調(diào)貴處___（檔案號：___）等___名同志到我公司工作，如蒙應(yīng)允，請將其人事檔案轉(zhuǎn)遞至我部，待研究后函告。
多謝合作
___公司人事部（公章）
年 月 日
調(diào)檔函格式1
________：
因工作需要，商調(diào)貴處___(檔案號：___)等___名同志到我公司工作，如蒙應(yīng)允，請將其人事檔案轉(zhuǎn)遞至我部，待研究后函告。
多謝合作
___公司人事部(公章)
年 月 日
調(diào)檔函格式2
___________：
___________同學(xué)已被(在)我院___________專業(yè)錄取(就讀)，根據(jù)我院《學(xué)生檔案管理辦法》，請貴處將該同學(xué)的檔案轉(zhuǎn)至我院招生就業(yè)處。
xxx師范學(xué)院招生就業(yè)處
年 月 日
調(diào)檔函格式3
________大學(xué)：
您單位___________同學(xué)報考我校____年碩士研究生，現(xiàn)已擬錄取，請將該生人事檔案于__月__日前(開學(xué)前)，寄至：___________大學(xué)___________學(xué)院學(xué)生工作辦公室(郵編___________)。以便我們審查，審查合格檔案不再退回;如按期檔案未到，不予錄取，后果自負(fù)。
多謝合作!
___________大學(xué)___________學(xué)院
______年__月__日
調(diào)檔函大概流程
一般程序是這樣的：
1.各系上報錄取名單，最后由錄取學(xué)校招生辦先發(fā)出調(diào)檔函，發(fā)往你在報名時所填寫的檔案所在地上面的地址，若你寫的是個人，那就是個人收到后自行辦理，然后寄回錄取學(xué)校;
2.如果是寫某單位人事處收，那就直接發(fā)到人事處，你再去人事處協(xié)助調(diào)檔，按照人事處對你提的要求補全各種手續(xù)。
3.若你的檔案寄存在某人才交流中心，那你也得去那自行辦理或協(xié)助辦理。
4.檔案調(diào)回后，學(xué)校就會根據(jù)原單位的各種材料進(jìn)行政審，一般不會有問題。最后發(fā)出通知書。
二、關(guān)于縣內(nèi)農(nóng)村學(xué)校之間教師調(diào)動問題。教師在縣內(nèi)農(nóng)村學(xué)校之間調(diào)動執(zhí)行服務(wù)期并堅持順向流動的原則。近年分配上崗的教師按照簽約規(guī)定，服務(wù)期滿3年后方可申請調(diào)動；鼓勵教師向缺編學(xué)校、邊遠(yuǎn)學(xué)校流動；對要求調(diào)入超編學(xué)校的，原則上不予考慮。
三、關(guān)于農(nóng)村教師進(jìn)城問題。為調(diào)動優(yōu)秀教師工作積極性，教師進(jìn)城繼續(xù)實行“逢進(jìn)必考”的原則，并加強對進(jìn)城教師教學(xué)成績和師德水平的考核?？h局將按照城區(qū)中小學(xué)學(xué)科教師缺編情況，擬定進(jìn)人計劃和條件，經(jīng)縣編委批準(zhǔn)后，實行公開選聘（具體辦法另行公布）。
四、關(guān)于外市縣（區(qū)）教師調(diào)入問題。對外地教師調(diào)入我縣遵照照顧實際困難、骨干教師優(yōu)先的原則。因夫妻分居或父母年事已高、身邊無子女需要照顧要求調(diào)入我縣農(nóng)村學(xué)校的，按規(guī)定程序進(jìn)行聯(lián)系、報批；對縣以上學(xué)科帶頭人、骨干教師、緊缺學(xué)科教師要求調(diào)入我縣農(nóng)村學(xué)校的，優(yōu)先予以考慮。
五、調(diào)動工作程序
1、教師調(diào)出我縣，由個人提出申請、填寫《申請調(diào)動報告表》并提交相關(guān)材料，經(jīng)所在學(xué)校、中心校和縣教育局、人事局同意后，向擬調(diào)入單位發(fā)出商調(diào)函，待接收方明確接收意見后，由縣教育局和人事局辦理相關(guān)手續(xù)。
2、農(nóng)村中心校之間調(diào)動，由個人提出申請并填寫《申請調(diào)動報告表》，經(jīng)所在學(xué)校、中心校和擬調(diào)入中心校簽署意見后報縣教育局，縣教育局根據(jù)各中心校編制和申請調(diào)動理由等情況研定。
3、農(nóng)村完職中之間調(diào)動，由個人提出申請并填寫《申請調(diào)動報告表》，經(jīng)所在學(xué)校和擬調(diào)入學(xué)校簽署意見后報縣教育局，縣教育局根據(jù)各校學(xué)科配套和編制余缺情況，結(jié)合申請調(diào)動理由研定。
4、初中教師調(diào)入農(nóng)村完職中，必須具有本科及以上學(xué)歷且為緊缺學(xué)科，經(jīng)由個人提出申請并填寫《申請調(diào)動報告表》同時提交本科以上畢業(yè)證書，所在學(xué)校、中心校和擬調(diào)入學(xué)校簽署意見后報縣教育局，縣教育局根據(jù)完職中編制和學(xué)科配套情況，研究初步意見，試用一年，考核合格后辦理正式調(diào)入手續(xù)。
5、外地教師調(diào)入我縣，由調(diào)出方教育和人事部門發(fā)出商調(diào)函，經(jīng)接收學(xué)校（農(nóng)村學(xué)校）、縣教育局研定同意后，報縣編委審批，縣人事局發(fā)出調(diào)檔函，并辦理相關(guān)調(diào)入手續(xù)。
六、調(diào)動辦理時間
為維護學(xué)校正常教育教學(xué)秩序，教師調(diào)動堅持一年一辦，于暑假期間集中辦理。辦理時，以調(diào)出學(xué)校（完職中或中心校）為單位，填寫《申請調(diào)動人員登記表》并連同申請調(diào)動人員的《申請調(diào)動報告表》，于20*年6月15日前集中上報縣教育局人事股，縣教育局研定后于秋季開學(xué)前對批準(zhǔn)調(diào)動的教師開出調(diào)動介紹信。
七、幾點要求
1、教師調(diào)動應(yīng)立足于照顧有困難教師和均衡配置教師資源，促進(jìn)教育教學(xué)質(zhì)量提高。各中小學(xué)校要從學(xué)校教學(xué)工作實際需要出發(fā)，考慮接收或放行。
2、人事調(diào)動直接涉及教師切身利益，關(guān)系到學(xué)校穩(wěn)定，各校要加強宣傳教育，認(rèn)真做好教師的思想工作，穩(wěn)定農(nóng)村學(xué)校教師隊伍。
關(guān)鍵詞：地黃飲子；腦脊液；PC12細(xì)胞；細(xì)胞凋亡
中圖分類號：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1673－7717(2007)09－1770－04
1 材 料
1．1 細(xì)胞及動物PC12細(xì)胞購自中科院上海生物細(xì)胞研究所。大耳白家兔，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。
1．2 藥物組成：地黃飲子由熟地、山萸肉、肉蓯蓉、石斛、麥冬、五味子、石菖蒲、遠(yuǎn)志、茯苓、肉桂、炮附子、巴戟天、薄荷等組成。(由哈爾濱市松茂藥行提供)
1．3 主要藥品及試劑：Aβ25－35(sigma)，DMEM培養(yǎng)基、胰蛋白酶(Hyclone)，5％胎牛血清(杭州四季青生物制品有限公司)，VitE(大連南美制藥有限公司)，引物、DNAmarcker(大連寶生物)，中藥飲片由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)提供。
1．4 主要實驗儀器：穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀：DYY－8，上海琪特分析儀器有限公司。紫外凝膠成像系統(tǒng)：Labworks 4.5UVP Ltd. Cambridge，UK。PCR擴增儀：Apllied Biosysems2700 PE，Singatpore。
2 方 法
2．1 PC12細(xì)胞的培養(yǎng)方法，PC12細(xì)胞培養(yǎng)于含10％胎牛血清(56℃滅活30 min)DMEM的培養(yǎng)液中，并加入100U/mL鏈霉素，100U/mL青霉素。細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶中，在37℃，5％CO2/95％空氣，飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2天換液1次，三四天傳代1次，取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實驗。
2．2 中藥腦脊液的提取方法：2kg重大耳白家兔，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，灌胃給服地黃飲子水煎劑、VitE(0.21g/mL，吐溫80助溶于蒸餾水中)水溶液，灌服藥量均按成人量10倍給藥，空白組給服等體積的蒸餾水。灌胃后1h，戊巴比妥鈉靜脈麻醉，于無菌條件下在枕骨大孔處垂直進(jìn)針，抽取200μL腦脊液，并補充等量等生理鹽水，以上步驟連續(xù)3天，把3天獲得的同一家兔的腦脊液混合，－70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
2．3 實驗分組及AD細(xì)胞模型的建立，離體培養(yǎng)進(jìn)入對數(shù)生長期的PC12細(xì)胞分為6組：空白對照組(簡稱空白組)、模型對照組(簡稱模型組)、VitE組(簡稱西對組)、地黃飲子低劑量組(簡稱中低組)、地黃飲子中劑量組(簡稱中中組)、地黃飲子高劑量組(簡稱中高組)。待24h細(xì)胞貼壁后吸去培養(yǎng)液，分別加入空白培養(yǎng)液10％、正常腦脊液10％、VitE腦脊液10％、中藥腦脊液低劑量5％、中劑量10％、高劑量20％。加培養(yǎng)液補至等量，37℃孵育2h。然后除空白組之外的各組加入經(jīng)老化處理的AB25－35(終濃度為101μmol/L)，建立AD細(xì)胞模型?？瞻捉M加入等量的培養(yǎng)液，繼續(xù)孵育24h后將細(xì)胞吹打至懸浮狀，離心收集細(xì)胞，提取總RNA。
2．4 RT－PCR檢測bax bel－2和caspase－3基因的表達(dá)
采用Trizol提取RNA。逆轉(zhuǎn)錄體系參照RT－PCR二步法(Advantage?RT－for－PCR Kit，Clontech)。引物設(shè)計由美國NCBl數(shù)據(jù)庫提供RNA全序列，用primer3引物設(shè)計軟件設(shè)計。
Rat bax：left primer：5`GGCGATGAACTGGACAAC 3`，right primer：5`CCGAAGTAGGAAAGGAGGC 3`(產(chǎn)物為299bp)；
Rat Bcl－2 left primer： 5`GGCATCTTCTCCTTCCAG3`，right primer：5`CATCCCAGCCTCCGTTAT 3`(產(chǎn)物為442bp)；
Rat Caspase－3：left primer：5`CTGGACTGCGGTATTGAG 3`，right primer：5`GGAACATCGGATTTGATT 3`(產(chǎn)物為489bp)；
β－actm：left pnmer：5`TGTGATGGTGGGTATGGG 3`，right pnmer：5`TAGAAGCATITGCGGTGC 3`(產(chǎn)物為500bp)。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)條件：cDNA 2.0μL，dNTP 2.0μL，10×RT buffer2.5μL，上下游引物(20μmol/L)各0.5μL，Taq酶0.25μL，加去離子水至25μL。反應(yīng)參數(shù)：95℃2min；94℃1min，55℃45S，72℃45S，25個循環(huán)；74℃延伸10 min。β－aetin的反應(yīng)參數(shù)為95℃5min；94℃1 min，55℃1min，74℃min，25個循環(huán)；74℃延伸10min。PCR產(chǎn)物用1.5％瓊脂糖凝膠電泳下分離檢測。凝膠成像分析系統(tǒng)進(jìn)行拍照和分析擴增產(chǎn)物電泳強度，以上實驗重復(fù)3次。
3 結(jié) 果
(1)地黃飲子含藥腦脊液對PC12細(xì)胞bax基因表達(dá)的調(diào)控作用。
(2)地黃飲子含藥腦脊液對PC12細(xì)胞bcl－2基因表達(dá)的調(diào)控作用。
(3)地黃飲子含藥腦脊液對PC12細(xì)胞csapase－3基因表達(dá)的調(diào)控作用。
4 討 論
老年性癡呆(簡稱AD)是發(fā)生于老年期和老年前期的一種以進(jìn)行性癡呆為特征的腦慢性退行性疾病，臨床主要變現(xiàn)為記憶力減退、智能障礙及行為情緒等的異常改變。其發(fā)生機制的細(xì)胞凋亡學(xué)說研究中，細(xì)胞培養(yǎng)，動物模型以及患者的尸均證實了AD病機中的細(xì)胞凋亡。自由基．基因突變，鈣穩(wěn)態(tài)失衡尤其是Aβ的神經(jīng)毒性都可能觸發(fā)神經(jīng)細(xì)胞的調(diào)亡。
PC12細(xì)胞(Pheochromocytoma cells)為大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤克隆化的細(xì)胞株，系神經(jīng)峭源性。具有較典型的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特性，而且易培養(yǎng)，可傳代。已廣泛用
作神經(jīng)細(xì)胞體外模型。用于研究神經(jīng)細(xì)胞分化發(fā)育、離子通道、受體、遞質(zhì)及神經(jīng)藥理、毒理及多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病如AD、帕金森病(PD)等。因而用Aβ25－35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞是一個比較理想的AD模型。
細(xì)胞凋亡(apoptosis)又謂細(xì)胞程序化死亡(programmedcell death，PCD)，是一種參與了生物體許多過程的細(xì)胞去除機制，是由基因編程調(diào)控的細(xì)胞主動自殺過程。細(xì)胞凋亡的過程非常復(fù)雜，與此有關(guān)的兩大家族即bcl－2、caspase，對細(xì)胞凋亡的調(diào)控起著舉足輕重的作用。細(xì)胞增殖可以啟動PCD，在一定條件下，bax能加速細(xì)胞周期進(jìn)程。
bcl－2家族是編碼同源蛋白的一個大基因家族，決定著細(xì)胞是否進(jìn)入凋亡通路。bcl－2造成的生長抑制與阻礙轉(zhuǎn)錄因子NFZF(Nucleaar Factor Assocciate Transcription)激活相關(guān)。bcl－2基因的作用是促進(jìn)細(xì)胞的生存。它可抑制細(xì)胞的凋亡，是一個公認(rèn)的凋亡抑制基因。bcl－2表達(dá)于多種組織內(nèi)，包括神經(jīng)系統(tǒng)。在神經(jīng)發(fā)生完成后及AD變性的神經(jīng)元內(nèi)，其表達(dá)明顯減少。bcl－2的基因產(chǎn)物能阻止凋亡，促進(jìn)神經(jīng)元存活。bcl－2(包括bcl－2、bax和bh3三個亞族)與ICE存在某種聯(lián)系，當(dāng)bcl－2活化時，可直接或間接地抑制IGE功能，此時細(xì)胞存活；當(dāng)bcl－2失活時，他對ICE的抑制功能被解除，使IGE活化，細(xì)胞進(jìn)入凋亡過程，IGE在哺乳動物細(xì)胞凋亡中作為一個新的凋亡因子起著很重要的作用。bcl－2的基因產(chǎn)物能阻止凋亡，促進(jìn)神經(jīng)元存活，在變性神經(jīng)元中，bcl－2表達(dá)明顯減少。
box是bcl－2家族與bcl－2功能相反的一個基因，bax的基因產(chǎn)物能加速細(xì)胞凋亡。bcl－2與bax組成一個平衡體系，bax過度表達(dá)細(xì)胞凋亡加速，而bcl－2過度表達(dá)則細(xì)胞凋亡被抑制。bcl－2/bax的比值的降低使線粒體外膜形成離子通道，促進(jìn)細(xì)胞色素C釋放，細(xì)胞色素C能活化。bcl－2/bax的值決定細(xì)胞凋亡是否發(fā)生。Paradis等(1996)的研究表明，bd－2在AD腦中呈高表達(dá)，通過抗氧化作用對細(xì)胞起保護作用。由此可見，bcl－2家族決定著細(xì)胞是否進(jìn)入凋亡通路。此外，bcl-2除能抑制神經(jīng)細(xì)胞的凋亡，還能抑制自由基的產(chǎn)生，抑制自由基引起的腦衰老作用。Wiedau Pazos等發(fā)現(xiàn)表達(dá)hcl－2的GTl～7神經(jīng)細(xì)胞系羥基自由基的含量明顯較對照組低，但bcl－2抑制自由基產(chǎn)生的機制不清楚。