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與傳統(tǒng)的第一代測序,又稱Sanger測序相比,在DNA測序方面,HTS技術具有快速、廉價和高通量的優(yōu)點,使得細菌基因組學研究發(fā)生了巨大的變化。高通量“臺式”測序儀的出現(xiàn)的使實驗室能夠獨立于專業(yè)測序中心進行測序工作,同時,HTS高分辨率的特點可以確定病原菌克隆的分子機制,輔助研究人員推斷出全球大流行以及局部暴發(fā)期間的傳播途徑,甚至可以對患者個體在感染期間進行細菌種群進化分析。與傳統(tǒng)的雜交方法相比,HTS還提供了轉錄組分析的潛力,包括覆蓋全基因組范圍及準確定量等,且深度測序輔助對細菌突變體文庫的構建,以確定病原菌在體內生長或在其他特定生長條件下存活所需的決定因素。本文將對HTS在細菌病原體方面的近期研究進展進行闡述。
一、感染過程中細菌進化的研究
感染性疾病的進展和結果往往取決于宿主與病原體如何相互作用,采用HTS技術進行的研究為定殖和感染過程中細菌病原體的進化提供了新的見解。例如,研究發(fā)現(xiàn),在感染過程中,由于選擇性壓力(例如與其他微生物共同感染、宿主的免疫反應及抗生素的應用等),某些固定的亞種中會隨機出現(xiàn)有利與病原菌的突變,同時,在感染期間還可以發(fā)生抗生素耐藥性的突變。相較于與傳統(tǒng)的PCR擴增技術和一代Sanger測序,HTS的超基因組學方法可以從微生物群分析得到更大的多樣性。例如,與健康者相比,肺囊性纖維化患者的微生物多樣性降低與更嚴重的炎癥相關,并且微生物的代謝途徑的明顯發(fā)生改變。
二、確定疾病暴發(fā)的來源和傳播途徑
傳統(tǒng)的細菌分型方法鑒別力較低,無法在傳染病暴發(fā)的流行病學調查中發(fā)揮精準的作用。全基因組序列可以為分離株之間核苷酸提供最高水平的分辨率,可識別醫(yī)院內部和醫(yī)院之間以及社區(qū)之間的傳播。應用該種新方法可以確定傳播的起源是某單一菌株還是多個菌株共同引起。
三、有助于了解病原性克隆出現(xiàn)的分子基礎
對大量緊密相關的分離菌株進行測序可幫助我們重建高分辨率的系統(tǒng)發(fā)育樹,有助于對病原菌克隆株出現(xiàn)和傳播的潛在過程進行深入了解。例如,基于HTS的進化研究,證明了第七次霍亂大流行由三個獨立事件組成,后兩個是由于霍亂弧菌獲取復方新諾明抗生素耐藥元件造成的,這導致了對常用霍亂治療的失敗引發(fā)了流行。
四、HTS在了解病原體生物學方面的未來應用
測序技術的飛快發(fā)展,單分子測序、讀長不斷的增加使得微生物群落內單個病原體的高
關鍵詞 醫(yī)學微生物學 維吾爾醫(yī)學 教學
中圖分類號:G424 文獻標識碼:A
Exploration on the Reform of Medical Microbiology
Teaching of Uighur Medicine
Azierguli·abudukerimu, Delixiati·yimiti, CHEN Feng, WANG Hongying,
Abuduhabaer·abudykerimu, Zilaiguli·mijiti
(Xinjiang Medical University, Urumchi, Xinjiang 830011)
Abstract Infectious diseases in the daily life and the most clinically common, whether it is western medicine, traditional Chinese medicine, Uighur medicine, medical doctors often in face, in order to fundamentally treatment to achieve the best effect in the treatment of infectious diseases, must have the aid of Pathogenic Microbiology Identification and micro biological laboratory tests to find the cause and treatment. Uyghur medical education is a breakthrough in the Xinjiang area of Xinjiang higher education, is also the medical career and of higher medical education characteristics and advantages. Based on the Uygur Medicine, Uighur medicine with western medicine, on reality, combined with clinical, starting from the culture with modern medical needs of the medical personnel, a series of reforms of medical microbiology teaching, to achieve better teaching effect.
Key words medical microbiology; uighur medicine; teaching
醫(yī)學微生物學(Medical Microbiology)是生命科學的重要分支學科,是主要的專業(yè)基礎課程。醫(yī)學微生物學的內容涉及到臨床醫(yī)學、醫(yī)藥學、中醫(yī)學、免疫學、生物化學等多種學科。主要研究與醫(yī)學相關病原微生物的生物學性狀、致病機理、診斷技術及防治措施等。醫(yī)學微生物這門課程專業(yè)性、實踐性及應用性強,是連接基礎課程與臨床課程的橋梁。
1 維吾爾醫(yī)學教育的重要性
維吾爾醫(yī)學是維吾爾民族的醫(yī)藥學。它是一門歷史悠久的醫(yī)藥科學,它既不同于古希臘醫(yī)學,也不同于古阿拉伯和印度醫(yī)學,它是我國古代西域古代維吾爾人民和各族人民幾千年以來,同疾病作斗爭的經驗總結,是我國醫(yī)藥學的一個不可缺少的組成部分。維吾爾族人民很長時間以來通過根據把脈,觀察病人面色、舌頭、精神狀態(tài)、大小便等一般狀況及病程,癥狀等特點進行診斷并治療民間發(fā)生的各種病,積累了關于維吾爾醫(yī)藥學方面的很多經驗,他們把這些經驗不斷地運用到實踐和疾病做斗爭過程中逐漸創(chuàng)造出了維吾爾醫(yī)藥學基礎理論、臨床治療方法及維吾爾醫(yī)藥物。 維吾爾醫(yī)藥學的運用范圍廣,實用性強,具有濃厚的民族特色和地方特色。維吾爾醫(yī)藥學長期的歷史過程中形成了獨具特色的理論體系和治療方法,所以廣大維吾爾族群眾把它認同為可靠、信賴的醫(yī)學領域。因此要想將維吾爾醫(yī)藥學更廣泛地利用到醫(yī)學領域、更深入的運用到醫(yī)學治療過程,甚至要發(fā)展維吾爾醫(yī)藥學并盡快擺脫目前所面臨的困境,融入到我國醫(yī)學領域和醫(yī)學高等教育體系,對中國特色醫(yī)學衛(wèi)生事業(yè)的建設與繁榮有著重要的意義。①
2 維吾爾醫(yī)學專業(yè)開展病原微生物學教學的重要性
感染性疾病在臨床上與日常生活中面臨的最常見的醫(yī)學問題。不管是臨床醫(yī)生或傳統(tǒng)醫(yī)學醫(yī)生都會遇到各種感染性疾病只不過是他們分析問題及解決問題的思路及治療技術方面有區(qū)別,但是引起疾病的病原微生物及檢查方法還是離不開病原微生物這門基礎課程知識。
維吾爾醫(yī)藥學是以種屬于宏觀醫(yī)學的醫(yī)學領域,維吾爾醫(yī)藥學理論認為人體本身的統(tǒng)一性,完整性以及其與自然界的相互關系是非常重要。人體的整體性觀念是維吾爾醫(yī)藥學的主要特點,而且正因為這些特點的存在使維吾爾醫(yī)藥學具有局限性和限制性。②
維吾爾醫(yī)學的學科特點決定了在維吾爾醫(yī)學教學中醫(yī)學微生物學應該有自身的教學體系,而不同于臨床醫(yī)學。對于存在的這些問題在教學中啟發(fā)及引導學生、培養(yǎng)學生的臨床思維能力,激發(fā)學生思考問題、解決問題的能力,而且將病原生物學與中醫(yī)學、西醫(yī)學、維吾爾醫(yī)學進行有機的結合。學好這些基礎課程為專業(yè)課程奠基出,運用到實踐中去,為專業(yè)課做服務。因此在教學過程中應該掌握維吾爾醫(yī)藥學方面的基本知識,基礎理論及技能技術的基礎上,加強病原微生物學這門橋梁學科的教育體系。
3 維吾爾醫(yī)學專業(yè)病原微生物教學中現(xiàn)存的問題
3.1 教學內容多,課時安排少
維吾爾專業(yè)教學對象是少數民族學生,本專業(yè)學生的專業(yè)課程都是維吾爾語授課而且專業(yè)課設置量大因此這一系列自身的特點對微生物學這門課程的傳授及學生的掌握比其他專業(yè)學生來說有一定的緊迫感。因此考慮學生的實際情況根據學校的條件盡量給學生增加課時,安排有關維吾爾藥物方面實驗操作。這樣不僅能幫助學生掌握知識,也能提高學生的實際操作能力。
3.2 對微生物學的重要性認識不足
維吾爾醫(yī)藥學專業(yè)的學生普遍認為只要學好有關維吾爾醫(yī)藥學方面的理論知識、診斷及治療方法就能對自己在臨床上遇到的各種疾病進行診斷及治療至于病原微生物學知識與自己的專業(yè)關系不大,學生更不能把維吾爾醫(yī)藥學知識與病原微生物學知識聯(lián)系在一起,沒能真正意識到病原微生物學的學習對維吾爾醫(yī)學工作的重要性。病原微生物學不僅是基礎學科,還是應用、實踐性很強的一門學科,對于感染性疾病的診斷、治療及防治,病原微生物學具有很重要的指導意義。病原微生學這門課程與臨床醫(yī)學,中醫(yī)學,西方醫(yī)學,維吾爾醫(yī)學等各個醫(yī)學專業(yè)關系很密切。
4 維吾爾醫(yī)學專業(yè)病原微生物學教學改革
4.1 激發(fā)學生上課的興趣
學習興趣是學生對學習的一種積極的情緒狀態(tài)。學生對學習的興趣決定于他對學習的態(tài)度,一個學生的學習興趣可以成為學習的原因;興趣又是在學生的學習活動中產生的,可以決定學習的結果。學生的學習興趣是提高學習效果的一種推動力,要提高教學效果,就必須改善教學方法的同時還要引發(fā)學生對學習的興趣。要激發(fā)學生的學習興趣,首先吸引學生對新生事物的好奇心,在教學過程中舉一些和我們的日常生活有關的一些實際例子來引發(fā)學生的聯(lián)想,使學生克服思維中的依賴性,發(fā)揮學生的主觀能動性,引導學生積極思考,從被動轉為主動。 讓學生理解醫(yī)學微生物學不僅對今后臨床工作而且是我們的日常生活關系很密切,對我們工作、生活中必不可少的一門課程。向學生介紹自古以來在世界發(fā)生的一些生物戰(zhàn)爭。例如,二戰(zhàn)時期,日軍731部隊曾對中國10余個省施放鼠疫、霍亂、傷寒和炭疽桿菌等10余種戰(zhàn)劑、英國在格魯尼亞島試驗了一顆炭疽桿菌炸彈,至今該島仍不能住人、美國9.11事件也有一些利用炭疽桿菌粉末導致多人致病和死亡的事件等。通過這些案例,可引起學生對各種細菌、病毒,病原體的興趣,并激發(fā)學生思考更多有關微生物學方面的一些問題。③由于微生物是體積很小肉眼看不到的,對于形態(tài),結構等知識的講解還是借助于多媒體課件,給學生演示各種病原體的形態(tài)圖,結合實驗室自己在顯微鏡觀察的病原體和老師講解的結合起來。有關傳染性強,教學實驗室不能培養(yǎng),學生不能在實驗室觀察的病原體及其培養(yǎng)過程的一些內容老師用多媒體給學生講,讓學生用眼去體驗,合理運用多媒體的優(yōu)勢。這樣不僅可以提高學生的學習興趣還可以節(jié)省時間,將教學內容生動、直觀地展現(xiàn)在學生面前,達到很好的教學效果。
4.2 加強微生物學基礎內容的教學
學習醫(yī)學微生物學基礎理論知識,特別是學習與維吾爾醫(yī)藥學相關內容,對于維吾爾醫(yī)藥學專業(yè)的學生今后從事用維吾爾醫(yī)學治療一些感染性疾病、維吾爾藥物的生產、藥物鑒定、銷售管理、新藥物的研究并開發(fā)等各種相關工作都將起到很重要的指導作用。比如:病原微生物的形態(tài)與結構、致病因素、發(fā)病機制、營養(yǎng)、代謝、生長、生態(tài)、控制、遺傳變異等方面的相關知識與維吾爾藥物的通過微生物學方法檢測、鑒定、藥物作用靶點的研究、藥物的生產與研發(fā)、微生物學診斷、治療等具有緊密的聯(lián)系。掌握醫(yī)學微生物學基礎理論知識將為維吾爾醫(yī)學專業(yè)的學生今后從事維吾爾藥的開發(fā)、制造、臨床使用等相關工作奠定堅實的理論及實踐基礎。維吾爾醫(yī)學理論認為,體液(Hilit)是在火、氣、水、土等自然界四大物質和人體氣質的影響下,以攝取的各種飲食為基礎,通過肝臟的正常功能所產生的膽液質、血液質、粘液質和黑膽質等四種體液。④
這四種體液失去平衡引起各種感染性疾病,這四種體液質人群飲食、生活習慣、遺傳因素、體質、抵抗力都不一樣對感染性疾病的易感性也不一樣,因此從這些特點出發(fā)把維吾爾醫(yī)學基礎理論和病原微生物真正地聯(lián)系起來講述給學生,使學生理解它們之間的內在聯(lián)系。
4.3 優(yōu)化實驗教學內容
微生物學是應用性、實踐性很強的一門學科,實驗課是很重要的教學環(huán)節(jié),通過實驗課可以培養(yǎng)學生分析能力及操作能力,實驗室是學生踏入工作之前的很重要的一個實習基地。經過微生物學實驗教學,不僅可以培養(yǎng)學生“嚴謹、求實、勤奮、創(chuàng)新”的科學態(tài)度,還可以培養(yǎng)學生的合作能力、團隊精神、環(huán)境素養(yǎng)等基本素質。我們將醫(yī)學微生物學實驗根據其內容劃分為基本技能訓練模塊、驗證性實驗模塊、綜合運用性實驗模塊和研究性實驗模塊。前兩者為學生掌握基本理論知識及操作過程中加深對客觀知識的理解,對于維吾爾醫(yī)學專業(yè)學生來說后兩者對本專業(yè)的發(fā)展提供很多理論基礎,實驗思維能力,實驗操作方法,目前關于某些感染性疾病與維吾爾體液理論之間的關系進一步開始研究,因此激勵學生參與老師們各種科研課題從而鍛煉學生科研思維能力,動手能力等。也推進教師們的科研進程。
4.4 提高老師們的科學素養(yǎng)
飛速發(fā)展的醫(yī)學教育對教師的學術水平和科學素養(yǎng)提出了更高的要求,教師應重視自身的全面教育及發(fā)展,通過參加一些學術活動、學術會議、專業(yè)交流會、培訓班等,同時對維吾爾專業(yè)的學生來說老師不僅要精通微生物學專業(yè)還要了解維吾爾醫(yī)學基礎理論尤其是要學習有關感染性疾病與維吾爾醫(yī)學體液論之間的相互關系,用實際的臨床例子來給學生解釋這兩門學科之間的相互關系,所以這方面老師們要下功夫進一步學習一些相關學科的理論知識、技能技術、新的研究成果,新的研究進程等,豐富自身的周邊知識,提高學術水平、擴展原有的知識結構,提高自身的科學素養(yǎng),以適應新的醫(yī)學教育,培養(yǎng)對社會、對人民有用的實用性醫(yī)學人才。
總而言之,維吾爾醫(yī)學專業(yè)病原微生物教學過程是教與學雙方互相促進、協(xié)同完成的過程。只有教師、學生的共同努力,才能不斷提高維吾爾醫(yī)學教育的教學質量,培養(yǎng)出符合中國特色醫(yī)學界所需要的醫(yī)護人員。
注釋
① 哈木拉提·吾甫爾,劉西平.加強高等醫(yī)學教育,發(fā)展維吾爾醫(yī)學專業(yè)[J].中國高等醫(yī)學教育,2007(8):38-55.
② 凱賽爾·阿不都克熱木.民族地區(qū)維吾爾醫(yī)學教學改革的實踐與探索[J].新疆醫(yī)學,2012(42):170-181.
【關鍵詞】
緒論;藥學類專業(yè);微生物學;教學方法
Excellent introduction teaching to improve effectiveness of pharmaceutical Microbiology
CAI Rui, LI Shan, TAN Zhou-jin,et al.School of Preclinical Medicine,TCM University of Hunan,Hunan Changsha 410208,China
【Abstract】 Microbiology is one of important subjects in life sciences. Introduction lesson is the beginning of Microbiology. Combining the characteristics of Pharmacy in Traditional Chinese MedicineUniversity with Microbiology, excellent introduction lesson can mobilize the enthusiasm of students and improve microbiological teaching effectiveness.
【Key words】
Introduction; Pharmacy specialty; Microbiology; Teaching methods
在中醫(yī)藥院校西醫(yī)基礎課程的理論教學中,教學方法因課程內容、教師、授課對象等不同而有所差異,即使是同一門課程,在不同的講授階段調整教學方法也是相當必要的。適時地選擇一種恰當的教學方法,能高效地幫助學生對所學知識充分消化和吸收,培養(yǎng)學生發(fā)現(xiàn)問題、分析問題、解決問題的能力,極大地提高學生學習的積極性、主動性和自覺性。微生物學是生命科學中至關重要的學科,是一門基礎理論與應用性都很強的學科,是藥學專業(yè)學生的必修課程之一。但一直以來,在中醫(yī)藥院校,本課程面臨著內容多(涵蓋了病原微生物學與免疫學),而課時較少(我校有60理論課時和42理論課時兩個層次)的窘境。因此,合理安排與取舍教學內容是教師們面臨的一大難題,采取適當的教學方法是提高教學效果的重要手段。
每門課程教學的第一章即為緒論,有的教師認為緒論中沒有實質內容[1],而且看上去淺顯易懂,因此,為了趕進度,緒論往往不會被重視,只是一帶而過,甚至只讓學生課后自學[2]。然而,筆者在教學中深刻體會到,能否吸引學生對新課程的注意力、培養(yǎng)學生對這門學科的興趣,關鍵在于能否給學生呈上精彩的第一課-緒論。緒論課講授的成敗直接影響到本課程的教學效果。
1 緒論在課程教學中的地位和作用
1.1 緒論在課程教學中的第一印象作用
緒論是一門課的開端,也是第一節(jié)課的開始。它包括該學科的定義、內容及任務,并介紹其發(fā)展簡史,學習目的及方法等。它使學生懂得“什么是微生物學”,“為什么要學微生物學”以及“怎樣學好微生物學”。緒論課是給學生上的第一堂課,好比我們認識一個人,第一印象非常重要。俗話說,良好的開始是成功的一半。如果緒論課教學條理清晰,說理透徹,具有吸引力,能提起學生的興趣,那么這門課就有了一個良好的開端。如果一個教師上緒論課使學生感到枯燥乏味,在語言和內容上不能吸引學生,這無疑將使學生喪失學習本門課的興趣和動力[3]。因此,緒論部分教學效果的優(yōu)劣,直接影響著學生對該課程后續(xù)內容的學習興趣和學習效果。
1.2 緒論對課程內容的概括作用
緒論是一門課的縮影。教材的緒論是本門學科的綜述,通常是對課程內容的概括性的介紹,它的任務是表明課程的性質、學科的研究方向、大致的內容結構,以及對其他需要說明的問題作一個概述,起統(tǒng)領全教材和整個課程教學的作用。緒論課是各門課程正式教學開始前的前言課、簡介課、概論課、導入課,是為了使學生明確學習本門課程的目的和基本內容,對這門課程有一個總體的、大概的認識,同時,初步了解該學科的教學特點、學習方法和教學的總體安排,為以后教學中師生的溝通與配合打下良好的基礎[3]。
2 藥學微生物學緒論教學中要注意的問題
2.1 藥學微生物學的內涵
在緒論的教學過程中,我們就要讓學生知道“藥學微生物學”與“醫(yī)學微生物學”的區(qū)別,雖然“藥學微生物學”與“醫(yī)學微生物學”同樣屬于應用微生物學的范疇,但是,“醫(yī)學微生物學”主要是講授微生物在疾病防治中的應用,包括病原微生物的生物學性狀、致病特點及其防控措施,而“藥學微生物學”應該主要講授微生物在藥物研發(fā)中的應用,包括利用微生物學基本原理研究中醫(yī)藥的療效及其作用機理、藥品質量控制的微生物學理論與技術、藥用微生物資源及其產品的開發(fā),等。
我們知道,藥學專業(yè)主要培養(yǎng)具備藥學學科基本理論、基本知識和實驗技能,能在藥品生產、檢驗、流通、使用和研究與開發(fā)領域從事鑒定、藥物設計、一般藥物制劑及臨床合理用藥等方面工作的高級科學技術人才。藥學微生物學是藥學專業(yè)必修課程之一。微生物學采用微生物作為研究材料,往往會加速生物學基本問題研究的進展,進而使之與藥學息息相關,在抗生素、維生素、酶制劑、有機酸、生物制品生產以及藥物的微生物學控制等方面有著廣闊的應用領域,構成了現(xiàn)代藥物生產、檢驗技術的基礎,還在基因工程工作中起著十分重要的作用[4]。但在中醫(yī)藥院校的教學中,本課程一直以病原微生物學和免疫學內容為主,微生物學在藥學中的應用部分極少。這一現(xiàn)象已經受到了廣大教學工作者的重視,藥學專業(yè)微生物學的教學模式與內容也在進一步改革和完善之中。
2.2 藥學微生物學緒論教學中要突出的內容
緒論教學中,我們往往通過介紹本課程的大致內容來激發(fā)學生的學習熱情,在藥學微生物學緒論教學中就要告訴學生為什么要學習微生物學,也就是學習微生物學后,在藥學專業(yè)中有些什么用。但由于中醫(yī)藥院校藥學專業(yè)臨床相關知識涉及不深,在舉例介紹病原微生物時應淡化其與臨床診斷密切相關的內容,而突出強調其與藥學有關的內容,從側面引導學生尋找抗微生物藥物研究的切入點,提高學生學習的自信心。
緒論講授中還應突出微生物學在藥學領域中的重要地位和應用,如微生物的藥用資源、微生物對藥物的污染與控制、微生物在制藥工程中的作用、藥物的微生物檢驗及抗微生物作用的檢測方法等,引導學生在以后的學習中能將微生物學的知識與所學專業(yè)緊密結合,使學生更深刻認識到本課程的重要性,并把這種認識轉化成自覺學習的推動力,并且?guī)е康膩韺W習這門課程。另外,恰當地補充國內外本學科的最新信息和動態(tài),對拓寬學生的知識面,鼓勵學生不拘泥于課本,發(fā)揮自己的創(chuàng)造力等方面也是相當必要的。
緒論教學的最后,老師要為自己在后續(xù)內容的備課和講解中注重理論聯(lián)系專業(yè)實踐設好藍圖,應該直截了當地讓學生明確學習這門課程必須達到的基本目的,向學生們提出要求,通過微生物學的學習,藥學類專業(yè)學生主要應該具備以下三個方面的素質:1)利用微生物學基本原理研究中醫(yī)藥的療效及其作用機理:要求學生掌握相關的基本理論與原理;2)藥品質量控制的微生物學理論與技術:要求學生熟悉藥品質量控制的微生物學指標、相關的病原微生物,掌握藥品微生物質量控制的基本技術;3)藥用微生物資源及其產品的開發(fā):要求學生掌握微生物藥物的主要種類,了解微生物在新藥開發(fā)與改造中的作用。這樣,可以使學生進一步明確學習微生物學的方向和目的。
3 結語
緒論教學是引導學生步入新課程的關鍵一步,處理得當會給教學帶來事半功倍的效果。講授中給學生以正確的引導,不僅要告訴學生本學科的主要研究內容和發(fā)展情況,還要端正學生的學習態(tài)度、提出良好的學習方法、激發(fā)學生的學習興趣。但教學過程是由多環(huán)節(jié)和內容,各種教學方法和手段構成的有機整體,只有合理配合才能收到好的教學效果[5]。
參 考 文 獻
[1] 賈淑平.淺談緒論在《免疫學基礎與病原生物學》教學中的作用.醫(yī)學理論與實踐,2005,18(9):1113-1114.
[2] 于艷紅.淺談“緒論”教學的重要性.中國科教創(chuàng)新導刊,2008,11:157.
[3] 蔡立紅.關于緒論課教學的思考.廣西教育學院學報,2007,6:87-88.
【摘要】:一直以來,人類與病原微生物之間的斗爭從未間斷過。隨著現(xiàn)代科學技術的發(fā)展,人們檢測病原微生物的技術也在不斷提高,這大大降低了其對人畜的危害。本文主要講述了現(xiàn)代病原微生物檢驗技術的發(fā)展狀況。其中以PCR和DNA芯片技術為代表的分子生物學技術的發(fā)展,大大提高了病原微生物檢驗技術。
【關鍵詞】:病原微生物;檢驗技術;分子生物學
人類進入21世紀,雖然醫(yī)療事業(yè)已經發(fā)展到了歷史最高點,但是感染性疾病仍然是危害人類健康的重要疾患,其中造成人類感染的病原微生物種類紛繁復雜,范圍覆蓋面更廣,而且耐藥性越來越強,其中還有一些傳統(tǒng)的病原微生物像結核分支桿菌等又出現(xiàn)死灰復燃的現(xiàn)象,同時還出現(xiàn)了許多新的病原體,如2003年底出現(xiàn)的SARS病毒以及2004年又出現(xiàn)禽流感病毒。這些病毒給病原微生物的檢測帶來巨大困難,嚴峻的現(xiàn)實要求病原微生物檢驗技術不斷更新。人類與病原微生物之間的斗爭越來越激烈,本文所講述的是現(xiàn)代的生物科學技術的發(fā)展現(xiàn)狀。
一、 傳統(tǒng)微生物檢驗技術
傳統(tǒng)病原微生物的檢查是以染色、培養(yǎng)和生化鑒定等為主,這些方法測試結果比較可靠,特別是微生物的分離培養(yǎng),。在當前形勢下,該方法仍然是很多微生物病原體檢測的"金標準"。然而,細菌在生長繁殖時需要耗費不少的時間,這使得檢測周期一直不能降低;與此同時,很多病原體的培養(yǎng)還會與營養(yǎng)需求、抗生素的使用以及病原體含量多少等因素相關。然而由于時代的發(fā)展,這種技術已遠遠不能滿足對各種病原微生物的診斷,特別是針對流行病學的研究。隨著現(xiàn)代科學技術的不斷發(fā)展,特別是物理化學技術、分子生物技術、免疫學等的不斷發(fā)展,新的微生物診斷技術和方法己廣泛被應用。
二、 物理化學技術
物理化學技術主要是利用一些物理和化學反應來進行檢測微生物,具體有色譜檢測法和電阻抗法。
(1) 色譜檢測法
在色譜檢測法中,將細菌混合物通過不同固定相和流動相,進行溶解、解析、吸附和脫附等相關物理過程,在進行多次反復后得到分離,最后運用各種檢測手段對細菌的屬、種甚至株進行鑒定。在高效液相色譜法中,其分辨率高、分析速度快,同時操作簡單方便。
(2) 電阻抗法
在電阻抗法中,它是在微生物代謝過程中,通過檢測培養(yǎng)基導電特性變化,從而快速測定樣品中微生物含量。主要原因是由于生理代謝,在微生物培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基中的一些如碳水化合物、類脂、蛋白質等電惰性物質逐漸轉化為電活性物質。隨著微生物數量的增長,培養(yǎng)基中電活性物質逐漸取代了電惰性分子,而使得培養(yǎng)基導電性增強,最終導致電阻抗降低。
三、 分子生物學技術
21世紀將迎來以分子生物技術為代表的生命科學的時代。最近發(fā)展起來的分子生物學基因診斷技術已經廣泛應用在醫(yī)學、遺傳學等各個領域,這不斷促使現(xiàn)代醫(yī)學由細胞水平向分子水平、基因水平轉變,從而形成了分子微生物學,這就滿足了人們對微生物的認識需求:從以前的外部結構特征逐步轉到現(xiàn)狀微生物的內部基因結構特征研究。同時,微生物的檢測技術相應的轉向到基因水平的檢測。在此基礎上產生的眾多新的檢測技術中, 具有敏感、特異、快速等多種優(yōu)點的核酸雜交和聚合酶鏈反應(PCR)現(xiàn)在已經應用到了病原微生物的檢測中。此外,DNA芯片技術的興起,為微生物學的檢測帶來了日新月異的革命。
(1) 核酸雜交和聚合酶鏈反應(PCR)技術
PCR技術的高度敏感性和特異性應用在病原體檢測上時的優(yōu)勢如下:常規(guī)方法常難以準確檢測一些對形態(tài)和生化反應不典型的微生物鑒定,但是PCR技術的出現(xiàn),使得其成為可能,即使在出現(xiàn)大量死菌的情況下,也能做出準確而快速的鑒定;同時它還不受混合標本的影響,能夠很方便地從含有大量正常菌群的標本中檢測出病原菌;而且,對于如分支桿菌、幽門螺桿菌、支原體等一些生長緩慢甚至難于培養(yǎng)的微生物,采用PCR技術來鑒定這類菌株也有重要意義,采用其他方法則很難獲得信息。
(2) 基因(DNA)芯片技術
生物芯片是基于玻片和尼龍膜等的載體,有序排列了很多生物活性分子。這些分子在單位面積上密度非常高,從而在一次試驗下,就能夠同時檢測到多種疾病或者對多種生物樣品進行分析。
生物芯片根據芯片上固定的生物活性分子的不同可以分為蛋白芯片和基因芯片。而基因芯片的活性分子是寡核苷酸探針或靶DNA。DNA芯片與傳統(tǒng)的檢測方法相比,具有少樣品需求、可快速、準確、高效地顯示病原體的遺傳信息的優(yōu)點,已被廣泛應用在分析宰基因序列、快速診斷病原微生物感染、研究變異及耐藥機制、揭示發(fā)病機制以及感染性疾病的診斷和治療等。由此可見,基因芯片技術發(fā)展前景和空間非常廣闊。
隨著科技的發(fā)展,計算機技術在不斷提高。現(xiàn)代病原菌微生物檢測將沿著高度自動化和簡便快速的方向發(fā)展,其中尤其是對于分子生物學技術:通過在病原菌診斷、鑒定以及基因檢測等方面成功運用自動化儀器,生物芯片技術的發(fā)展最終將完全改變臨床病原菌檢驗的現(xiàn)狀,實現(xiàn)集高效、高質和廉價等與一體的技術。同時,隨著各學科之間的交叉發(fā)展,越來越多的新的檢測技術將會不斷涌現(xiàn),從而不斷促進病原微生物檢驗技術的發(fā)展。
參考文獻
關鍵詞:醫(yī)學微生物學;實驗考核;多媒體素材庫;教學改革
醫(yī)學微生物學是一門重要的醫(yī)學基礎課程,它與臨床結合緊密,實踐性較強。因此,實驗課程是教學過程中的重要環(huán)節(jié)[1]。在實驗教學中能讓學生掌握基本實驗技能,同時通過對各種微生物形態(tài)及培養(yǎng)物的觀察,可以幫助學生更好地記憶和理解理論課上所講授的各種病原微生物特點。然而,作為評價實驗教學重要指標之一的實驗考核,由于受到考核時間、內容、人力等因素的影響,使得實驗考核缺乏合理性和客觀性[2]。隨著近年來許多學校擴招,師資力量不足,傳統(tǒng)的考核方式不得不取消,而采用只書寫實驗報告單一評價學生的實驗成績,這不僅不能真實地反映學生的學習情況,而且使許多學生產生不重視實驗過程,只注重實驗報告書寫,有的學生甚至不來上實驗課,課后抄襲他人實驗報告,這種實驗成績評價方式不能調動學生學習的積極性[3],也不能客觀地評價實驗教學效果。近3年開始嘗試采用多媒體技術對學生進行實驗考核,經過在2009級、2010級及2011級臨床醫(yī)學本科專業(yè)中的實踐應用,取得了初步的成效。
1 實驗教學試題庫的構建
1.1考核內容 根據實驗教學大綱的要求及教學內容確定實驗考核范圍,內容包括微生物形態(tài)、生理、實驗原理及實驗基本技能等方面??己祟}型包括圖片辨認、填空、判斷題、簡答、病例分析等形式。
1.2實驗教學多媒體素材的收集 玻片標本利用顯微數碼攝像系統(tǒng)進行圖片采集;各種病原微生物培養(yǎng)物、生化反應、凝集反應、特殊實驗等結果,采用數碼照相機進行拍攝;此外,收集本專業(yè)各種教材、專業(yè)圖譜、互聯(lián)網網站等相關各種微生物形態(tài)、結構、電鏡照片等圖片。所有圖片用Photoshop軟件進行圖片編輯處理,并在每張圖片的典型特點上用不同形狀、顏色的箭頭或數字進行標注;實驗原理、步驟、操作等利用電腦軟件制成線條圖和動畫。
1.3多媒體考題制作 將試題制成PPT課件,內容以圖片、表格、動畫、線條圖及文字的方式展現(xiàn),根據試題的難度系數及各次實驗內容的比例,分為若干套試卷,形成若干套難度系數均等、內容全面的試題庫。
2 多媒體技術在實驗考核中的應用
2.1考場安排 以實驗室為單位進行考核,每次安排考生16名,監(jiān)考老師2名,考場地點為配有顯微互動系統(tǒng)實驗室。
2.2考核實施 同一考場學生進入考場后按指定座位號就坐,由學生隨機抽取試卷號,老師根據學生抽取試卷號打開試卷,利用顯微互動系統(tǒng)將試題發(fā)到每臺學生電腦上,試卷按預先設置的播放速度、時間及順序進行自動播放,學生在規(guī)定時間按要求完成答題。
2.3實驗成績評價 實驗考核方式改革之后,學生實驗總評成績按平時成績占20%,實驗考核成績占10%進行統(tǒng)計,這樣比較全面地評價了實驗教學效果,同時也真實地、客觀地反映了學生的學習態(tài)度及對實驗技能的掌握程度。相比之前的年級,2009級、2010級、2011級同學實驗操作的規(guī)范性、實驗報告書寫能力等均有了一定程度的提高。
3 總結
80年代初我校實行的教師與學生一對一的考核方式存在許多弊端,如需要耗費大量的時間和人力;繁瑣的考前實驗室準備工作;由于受實驗材料的限制,考試內容局限;考題單一,考核內容不夠全面,主要側重于微生物學實驗基本技能;考題重復率高,已考過的學生容易將考題泄露給正準備考試的學生,導致考核出現(xiàn)不公平性。
隨著多媒體技術在醫(yī)學微生物學教學中的普及,近年來開始嘗試將多媒體技術應用于實驗考核中,經過3年的實踐嘗試,得到了老師及學生的普遍認同。與傳統(tǒng)實驗考核方式相比,多媒體技術應用于醫(yī)學微生物學實驗考核中有許多優(yōu)勢,如以實驗室為單位,每次在2名教師的監(jiān)督下可容納多名學生同時進行考試,這節(jié)約了考核時間及人力資源;之前的傳統(tǒng)實驗考核只重視實驗基本技能的測試,而采用多媒體技術進行實驗考核,可將實驗考核內容擴展到病原微生物的形態(tài)、生理特性、生化鑒定、實驗原理等多方面,使實驗考核內容比較全面,通過考核能全面了解學生對所學知識點的掌握情況。
在3年的實踐改革中發(fā)現(xiàn)將實驗考核成績納入學生最后的實驗總評成績中,使得學生意識到只有平時努力認真地學習,才能牢固地掌握所學知識,在考核中取得優(yōu)秀的成績,學生學習的主動性和積極性明顯得到調動,實驗教學效果也得到明顯地提高。雖然,采用多媒體技術進行醫(yī)學微生物學實驗考核有許多優(yōu)勢,但也要客觀地看待其局限性,如對實驗技能的考核,采用動畫方式來展示,讓學生通過觀察來進行判斷,這種考核方式并不能代替學生的實踐動手能力[4]。因此,在平時實驗教學中應加強學生動手能力培養(yǎng),要正確、合理地掌握多媒體技術在醫(yī)學微生物實驗考核中的使用度[5]。
參考文獻:
[1]林樂勛,付英梅,佟雷,等.醫(yī)學微生物學實驗教學改革初探[J].基礎醫(yī)學教育,2011,13(2):147-149.
[2]陳曉寧,王清河,趙蕾,等.構建網絡考試平臺探索新的實驗考核模式[J].中國病原生物學雜志,2007,2(2):159.
[3]王小麗,鐘有添,謝瓊.實驗教學改革條件下醫(yī)學微生物學實驗考核評價體系的構建與實踐[J].微生物學通報,2012,39(12):1817-1824.
關鍵詞 醫(yī)學微生物學 教學 實驗課 設計性實驗
中圖分類號:G424 文獻標識碼:A
實驗課可以進一步加深學生對理論課的知識的理解和記憶,也是提升學生觀察能力、操作能力、思維能力、運用能力等智力因素的一個重要途徑,也是培養(yǎng)學生創(chuàng)新能力和創(chuàng)新精神的一個重要手段。①因此,實驗教學在知識、能力、素質的培養(yǎng)方面具有其它教學方式不可取代的重要地位和作用。然而,目前包括我校在內的大部分高校的醫(yī)學微生物學實驗教學大多為驗證性實驗,其基本模式是教師為學生準備好所有的實驗材料,并按照預先制定好的實驗程序安排學生機械地完成規(guī)定的實驗內容。②這嚴重制約了學生的主動性和積極性,不利于學生創(chuàng)新能力和獨立工作能力的培養(yǎng),不利于學生個性的發(fā)展。因此,迫切需要在實驗教學中引入能啟發(fā)學生創(chuàng)造力的設計性綜合實驗。
設計性實驗是指由學生自行設計實驗方案,并在教師指導下加以實施的一種實驗課教學模式。它將學生在已有的理論知識基礎上,進一步有目的地獲取新的知識,可調動學生的學習積極性、主動性,最終提高學生發(fā)現(xiàn)分析和解決問題的能力。③為提高實驗課的教學質量,《普通高等學校本科教學工作水平評估方案(試行)》中明確了設計性實驗的重要性和在整個課程中所占的比例。④本文分析本教研室今年來采用的設計性實驗教學的實踐活動,探討了微生物設計性實驗的教學模式、教學方法和教學組織形式。
1 本文的設計性實驗教學的思想
近年來,在世界范圍內發(fā)生了一些新型傳染性疾病,如禽流感和豬流感病毒導致的人的感染、NDM-1超級耐藥細菌的感染等,引發(fā)高度關注。為了激發(fā)學生的學習興趣,我們將相關病原微生物的關鍵分子,如流感病毒血凝素和NDM-1金屬- -內酰胺酶等的原核表達引入實驗課中,并開展設計性實驗教學研究探索。在學生完成基礎實驗的前提下,我們指導學生設計實驗,表達上述關鍵分子;最后指導學生撰寫論文,并模仿研究生答辯的方式進行總結匯報。我們希望在實驗中引入受到廣泛關注的新型病原微生物,并且采用臨床醫(yī)學生向往的分子生物學技術,以激發(fā)學生對醫(yī)學微生物學的學習興趣,提高學生的科研能力。在這一過程中,我們也嘗試建立一套適合于培養(yǎng)我校臨床醫(yī)學專業(yè)的醫(yī)學微生物學和實驗課的教學體系。
2 設計性實驗教學的實施方案
2.1 實驗前的準備
我校的醫(yī)學本科生課程中,生物化學、分子生物學和醫(yī)學微生物學分別依次在第三個連續(xù)的學期開課。因此,在生物化學開課的學期,我們從32個實驗班中選取所有課程總平均成績相差在5分以內的6個班,隨機將這6個班分成兩組,每組三個班。其中一組為實驗組,采用上述實驗教學方法,另一組采用常規(guī)教學方法。通過年級的學習部向實驗組學生發(fā)放相關資料,讓學生初步了解實驗課教學改革的思想,并建議學生在完成正常的課程學習后,重點學習分子生物學相關技術原理,如PCR及DNA瓊脂糖凝膠電泳、質粒提取、DNA酶切及連接、感受態(tài)細胞制備、蛋白誘導表達、SDS-PAGE等,為下學期實驗課中所需的分子生物學知識扎實的基礎。
在開課前四周,利用課余時間,進一步向學生講授上述技術原理,操作步驟及注意事項。并采用閉卷考的形式,檢查學生對相關知識的掌握情況。最后,教師親自操作,向學生演示上述實驗技術的操作要領。
2.2 設計實驗方案
在設計性實驗開始的前8周里,我們規(guī)定學生在兩周內,以《分子克隆實驗指南》(第三版)為主要參考書目,并在CNKI或highwire等數據庫中查閱一定量的文獻,然后采用小組討論的方式,完成具體實驗方案的制定。然后由指導教師對實驗方案提出修改意見,進行修改,在第8周末確定最終實驗方案。
2.3 實驗操作
從第9周開始,學生根據自己設計的實驗方案,利用課余時間進入實驗室開展實驗。在此后的四周時間里,實驗室全天對學生開放,為學生配備所需的實驗材料、試劑、培養(yǎng)基和儀器等。在學生實驗期間,安排教師全時段值班并陪同學生實驗,解決學生在實驗過程中遇到的問題,并確保實驗室安全,以防出現(xiàn)事故。學生在實驗過程中做實驗記錄,寫實驗報告。
2.4 實驗論文的撰寫及實驗匯報
在實驗前和實驗中,分多次系統(tǒng)地向學生講解論文寫作的相關知識,首先講解論文寫作的意義、一般要求,然后用舉例的方式,重點講解摘要、前言、材料和方法、結果和討論的格式和具體要求。在實驗完成后,指導每個小組的學生完成論文寫作,并幫助學生修改論文,在反復修改后,以小班為單位,要求各組將自己的論文以PPT報告的形式,按照研究生畢業(yè)答辯的要求進行交流,并擇優(yōu)在全班范圍內進行交流。
3 教學方法的成果分析及問題總結
在多年的教學實踐中,我們發(fā)現(xiàn),雖然每個實驗班在實驗的過程中會遇到一些問題,但是經過四~五周的實驗,每個實驗小組最終都能完成實驗方案的全部內容,并能獨立完成論文寫作和實驗總結報告。通過認真分析學生的學術論文和總結匯報,并且最后比較實驗班和非實驗班的醫(yī)學微生物學這門課程的期末考試成績,我們認為,本教研室采用的設計性、創(chuàng)新實驗取得了滿意的效果,完全達到預期的目的。這種教學模式的成果主要表現(xiàn)在以下幾個方面:
3.1 設計實驗課對醫(yī)學微生物學學習的促進作用
我們采用的是綜合性實驗,實驗過程中需要用到多種分子生物學和基本的微生物學技術和操作,通過系統(tǒng)的訓練,學生的實驗操作能力明顯得到提升。從實驗考核(表1)來看(以2010級本科生為例),實驗班高分段(>90分和80分~90分)人數和平均成績明顯高于非實驗班。這表明與傳統(tǒng)的實驗教學模式相比,新實驗教學模式在培養(yǎng)和提高學生的動手能力方面有較大的優(yōu)勢。在學生準備及實驗過程中,針對實驗方案所涉及的領域查閱一些相關資料,對相關病原微生物學的基本特性、致病機制等方面的內容有了進一步的熟悉和理解,從而豐富了微生物學知識體系。因此,值得一提的是,在實驗班的期末考試的成績(表2)也顯著高于非實驗班(以2010級本科生為例),這表明設計實驗可以提高學生對醫(yī)學微生物學課程學習的興趣,增強了學生對微生物學知識的學習、理解和記憶的能力。
3.2 學生的科研能力得到提高
3.2.1 文獻調研、論文寫作能力得到了提高
由于在實驗方案的準備及論文寫作的過程中需要參考資料,每個實驗小組都在網絡數據庫查閱了相關的文獻,并查閱了相關的圖書資料,因此,學生查閱文獻的能力在這一過程中得到了有效的鍛煉和提高。由于要求學生按照公開發(fā)表的學術論文的格式進行論文寫作,而在這一過程中,學生必須認真總結自己的實驗過程和實驗數據,并對實驗數據進行適當的分析和討論,而且在論文寫作過程中,需要反復按照老師的意見和建議進行修改,因此,在這一過程中不僅有效鍛煉了學生的文字功夫,還使他們系統(tǒng)分析問題的能力得到了較大的提高。最后由于我們要求每個實驗小組安排一名同學進行實驗總結報告,在這一過程中,學生需要自己組織PPT多媒體文件,并進行匯報。
3.2.2 科研思維和實驗技能得到了有效的訓練
本實驗需要用到較多的分子生物學技術,此外,還需要用到培養(yǎng)基配制、細菌分離培養(yǎng)及鑒定(蛋白表達宿主菌)、無菌操作技術、感受態(tài)細胞制備及發(fā)酵技術等微生物學技術。在開展實驗前,學生必須首先理解相關的技術原理,然后將實驗所需的多項實驗技術組成一個有序、連貫的有機整體。這一過程的深度和廣度是傳統(tǒng)實驗課的內容無法達到的。在規(guī)定內容實驗課上,學生每次學到的是一項或幾項實驗技術,而在自主設計實驗過程中,學生自主地組合并綜合應用這些技術。在實驗過程中,學生組成團隊分工合作,密切配合,共同完成了實驗,這培養(yǎng)了他們的團結合作精神。學生往往需要要進行1~2次的復復實踐才能掌握這些技術,尤其是當出現(xiàn)問題時,實驗重復的次數會增加。學生在老師的指點下,分析并解決問題,不僅掌握了技術本身,而且學會了分析并解決問題的科研思維能力。
3.3 教師的素質獲得提高
首先,我們所采用的自主設計實驗難度接近科研課題,教師必須具備較強的科研能力才能順利完成該實驗,因此對施教老師的素質和能力也提出了更高的要求。其次,教師需要自己開展預實驗,并向學生講述實驗技術的原理、示范相關操作要領;再次,在制定實驗方案的過程中,教師要在查閱相關文獻資料的基礎上,才能發(fā)現(xiàn)學生擬定的實驗方案中存在的問題,這對促進教師的教學起到了積極作用。教師在于學生交流的過程中,自身的科研水平也得到了提高,更有利于實驗教學工作,從而達到以教促學,以學促教,教學相長,共同發(fā)展的良性循環(huán)。
4 存在的問題及對策
為了完成自主設計實驗,本教研室的教師付出了比傳統(tǒng)教學實驗更多的時間和精力,做出了更多的犧牲。首先,需要我們在上學期就要開始為該學期的實驗設計進行提前宣傳,做好準備。在自主設計實驗的過程中,教師要利用業(yè)余時間為學生講解相關病原微生物的各種知識、各個實驗技術的原理和操作注意事項。在指導學生修改實驗方案的過程中,需要對學生的實驗方案進行修改。在實驗過程中,即使是在晚上和周末,只要學生做實驗,教師就要全時段值班,指導實驗。因此,教師需要花大量的時間。這就要求我們的教師必須有無私奉獻的精神,要對工作負責,從工作的角度出發(fā),不計較個人得失。
5 總結
與傳統(tǒng)的驗證性實驗相比,我們所采用的設計性實驗首先通過具有轟動效應的病原微生物激發(fā)學生的實驗興趣和熱情。其次,我們的設計性實驗使學生由被動學習轉變?yōu)橹鲃訉W習,由“授之以魚”轉變成“授之以漁”。這種實驗課的教學模式首先直接提高了醫(yī)學微生物學的實驗技能,并間接增強了醫(yī)學微生物學的學習效果。它在培養(yǎng)學生解決問題能力和創(chuàng)新能力方面的作用遠遠超過傳統(tǒng)的驗證性實驗。在完成自主設計實驗的過程中,學生對科研工作有了初步的認識,對查閱資料、設計方案、開展實驗、進行報告和總結等方面進行了初步嘗試,積累了一定的經驗,這為今后繼續(xù)學習,積累了一定經驗,奠定了基礎。雖然我們在醫(yī)學微生物學實驗教學中進行了上述的嘗試,也取得了一定的成績,但是當然還存在一定的問題,這需要我們堅持在教學改革的道路上繼續(xù)探索。
注釋
① 陳瓊華,錢黎明.微生物學實驗教學改革中培養(yǎng)學生創(chuàng)新能力的探索.中山大學學報論叢[J].2006.26(6):22-26.
② 易力,,陳萬光等.推進微生物學實驗教學改革培養(yǎng)學生的綜合能力[J].實驗室科學,2010.13(1):10-11.
本書是在《微生物定量風險分析》第1版的基礎上修訂的,共歷時14年。書中涉及的微生物從第1版中的食源性細菌、病毒、單細胞動物拓展到近幾年新發(fā)現(xiàn)及流行的冠狀病毒、流感病毒、生物恐怖因子以及人畜共患病病原體等。在本版中作者延續(xù)了第1版中的風險評估方法,并在此基礎上增加了一些新的內容,包括現(xiàn)代病原微生物分析方法、預測微生物學(病原體生長與凋亡)、風險分析模型以及人群中疾病擴散模型等。同時本版也刪除了一些內容,如,不再反映微生物劑量應對指標的復雜圖表等。
本書共分為11章:1.動機,主要介紹傳染病的流行趨勢、現(xiàn)有手段、覆蓋范圍、定量微生物風險分析的潛在目標、特定地域的估計、地域集綜二次傳播、地方性傳染病暴發(fā)案例等;2.微生物病原體與傳播,按照三種分類法分別描述各類病原體的特征、臨床特點、潛伏期以及宿主特征。這三類分別為種群分類(真核、原核、病毒、類病毒)、微生物分類(病毒、細菌、單細胞動物)、傳播途徑分類(呼吸道、皮膚接觸、食道);3.風險評估范例,通過案例詳細介紹風險評估――定性或定量評估在人群或個體中潛在對健康不利因素的分析方法,例如,化學品風險評估、生態(tài)環(huán)境風險評估、微生物潛在風險評估、微生物定量風險評估過程和發(fā)展等;4.危險品標識是識別治病微生物病原體的標志,詳細描述不同的標識;5.定量微生物風險分析方法,著重講述不同的微生物分析方法,從不同的病原體采集方法到針對細菌、單細胞生物以及病毒的分子生物學檢測方法;6.疾病的暴露評估,通過大量的數學公式以及統(tǒng)計方法分析病原體的載量與疾病在人群中暴露的關系;7.預測微生物學,通過大量數據與統(tǒng)計學方法預測微生物病原體的生長與凋亡過程;8.微生物劑量反應評估,通過不同的模型與數學算法詳細描述病原體的載量與患病率、死亡率、及潛在免疫狀態(tài)的影響;9.不確定,本章列舉出了一些在風險評估中的不確定因素。10.人群疾病傳播,主要通過模型來分析人群與社區(qū)中的疾病傳播過程、潛伏期、以及相對應的檢測方法男;11.風險特征與決策,作為本書的最后一章,概括了全書的內容并指出當風險評估的定量分析結果需要一個定性的決策時,還需要考慮很多其他因素。
本書作為全面介紹微生物風險評估的專業(yè)教材,既滿足各高等學校生物類、環(huán)境類、 生物工程類、公共衛(wèi)生、微生物類學科本科教學的需求,同時也滿足不同層次和其他相關專業(yè)研究生的教學需要。
馬雪征,碩士,助理研究員
(中國檢驗檢疫科學研究院,衛(wèi)生檢疫研究所)
【關鍵詞】生物安全;微生物學與免疫學實驗室
生物安全( biosafety) 指的是避免危險生物因子造成實驗室人員暴露、向實驗室外擴散并導致危害的綜合措施[1]。而實驗室生物安全(laboratory biosafety)是我國衛(wèi)生行政管理的重要內容,隨著科技進步及生物技術的發(fā)展,目前實驗室生物安全問題已經成為科研單位、醫(yī)院、高校等重要場所管理及工作學習人員最為關心的內容之一。
早在1983年,世界衛(wèi)生組織就出版了《實驗室生物安全手冊》來增強人們對實驗室生物安全問題的重視。但是,2003 年9 月到2004 年初在新加坡、臺灣以及北京連續(xù)發(fā)生的實驗室人員感染SARS 冠狀病毒的事件,2005 年的H2N2流感病毒樣本風波, 2010 年11 月至2011 年3 月東北某農業(yè)大學發(fā)生嚴重的布魯氏菌實驗室感染事件[2],這些生物安全事件的發(fā)生又一次次給人們敲響了警鐘。我校微生物學與免疫學實驗室是具有對周圍環(huán)境和教師及學生造成潛在生物危害的主要場所。本文將從以下幾個方面來分析一下我校的生物安全工作。
1 實驗室功能介紹
我校微生物與免疫學實驗室(以下簡稱微免實驗室)主要由以下幾個獨立實驗室組成:病原生物與免疫學實驗室、醫(yī)學微生物學檢驗實驗室、醫(yī)學免疫學檢驗實驗室、寄生蟲學檢驗實驗室。分別承擔了《病原生物與免疫學》、《微生物學檢驗技術》、《免疫學檢驗技術》、《寄生蟲學檢驗技術》等課程的實訓教學任務。教學對象主要是五年制高職護理、助產、涉外、藥學、醫(yī)學檢驗等專業(yè)學生。
2 學生實驗現(xiàn)狀分析
2.1 專業(yè)層次不一
病原生物與免疫學實驗的學生為高職護理等專業(yè)二年級的學生。她們的醫(yī)學知識相對薄弱、對病原生物的認識也剛剛開始。而對于微生物學檢驗實驗室和免疫學實驗室來說,授課對象主要是高職醫(yī)學檢驗專業(yè)學生,不同年級的學生會有交叉,既有剛剛接觸微生物學檢驗基礎和免疫學檢驗基礎的低年級學生,也有即將面臨畢業(yè)的高年級學生,他們無論在知識儲備、操作技能還是安全防護意識上都有一定差距。
2.2 生物安全意識弱
初次進入微免實訓室的學生,都是低年級學生,她們年齡偏小,存在著強烈的好奇心。尤其面對一些形形的病原標本興趣濃厚。在實訓過程中表現(xiàn)出來的問題有:聲音過于嘈雜、未經允許觸摸標本、實驗過的標本隨意丟棄、帶與實驗無關的東西進實驗室、防護服穿著不當等等問題。而且按照教學進度,學生是先學習免疫學再學習微生物學知識,也就導致第一次實訓課時,她們并不能充分認識到自己所處的實驗室環(huán)境會對她們有什么樣的潛在危害,也沒有很好的生物安全保護意識。檢驗專業(yè)的同學雖然有一定的專業(yè)基礎,但在做一些膿汁標本、大小便標本檢驗時依然存在麻痹大意的思想,容易造成環(huán)境的生物污染。同時,實驗室也保存有大量的病原微生物標本,如:傷寒沙門菌、變形桿菌、克雷伯菌、炭疽桿菌等具有強致病性的微生物菌種,他們在操作技能上不熟練也有導致菌種泄露造成生物污染的風險。
2.3 實訓內容安排不合理
對于護理專業(yè),《病原生物與免疫學》課程的學習中,往往是先學習免疫學,再學習微生物學。所以,學生沒有學習到微生物學的知識就進行入微免實訓室免疫室進行實訓,這也造成了她們只是在老師的要求下去遵守實驗室規(guī)章制度,并不能很好的理解微生物會對她們和環(huán)境造成什么影響。而且由于實訓場地限制,有些實驗采取分組進行,同學之間有著較強的互動意識,這也在一定程度上增加了生物安全危險因素的傳播風險。
目前我校微免實驗室主要承擔教學工作,由于學生數量龐大,且層次不一,盡管有相關制度的約束,但是生物安全工作仍然是每次實訓課上教師要反復強調的問題。有研究表明,從事衛(wèi)生檢驗工作人員發(fā)生職業(yè)病危害的概率比普通人群高5-7倍[3],所以在傳授技能的同時提高她們的自身防護意識就顯得非常重要。
3 實驗室生物安全工作方向
3.1 制度建設
制度建設是實驗室生物安全管理工作的最基本的環(huán)節(jié),對開展工作具有指導意義和約束力[4]。微生物學與免疫學實驗室不同于其他實驗室,里面存放著很多具有致病性質的病原生物,為了避免生物安全事故的發(fā)生,保證實驗老師和學生的生命安全,我校制定了一系列實驗室生物安全規(guī)章制度。如《生物安全管理制度》、《生物安全保衛(wèi)制度和措施》、《工作人員執(zhí)行生物安全相關規(guī)定》、《生物安全工作內部自查制度》、《生物安全管理人員及實驗室人員培訓制度》、《實驗室人員準入規(guī)定》及《發(fā)現(xiàn)存在生物安全問題時的反饋和糾正措施程序》等。根據學校相關制度,微免實驗室也制定了微免實驗室管理制度、實驗室生物安全手冊、儀器室管理制度、準備室管理制度、大型儀器操作規(guī)范等來規(guī)范實驗室工作人員、任課教師和學生的行為,避免實驗室生物感染情況的發(fā)生。
3.2 提高生物安全意識
要加強實驗室管理人員及實驗室人員對生物安全的認識,舉辦生物安全管理為內容的學習班,通過學習提高相關人員特別是微免實驗室工作人員的生物安全意識,轉變觀念,為做好生物安全工作起積極推動作用。對于學生,如護理、助產、檢驗等專業(yè)畢業(yè)生將來從事臨床一線工作,她們負責標本的直接采集和檢驗,如果不注意生物安全,其被感染的可能性很大。所以在平時的實訓課中,更應該加強對她們生物安全意識的培養(yǎng),幫助她們養(yǎng)成良好的工作習慣。包括學習學校制定的各種生物安全制度、認真研讀實驗室生物安全手冊,進行生物安全專題培訓等。
3.3 加強學生技能訓練
在實訓過程中,對學生嚴格要求,勤學苦練增強專業(yè)技能。如對于護理、助產專業(yè),要加強消毒滅菌操作練習,這些工作是確保醫(yī)療安全的基礎[5]。對于檢驗專業(yè)來說,每天面對各種各樣的臨床標本,各類標本中都有很多未知的病原生物,這就要求他們更應加強對生物安全的重視程度[6]。學生在實訓操作前應穿好工作服,必要時還應該帶好口罩和手套等防護用品,認真聽老師講解的操作要領和注意事項后,方可進行實訓。對于涉及病原性細菌的接種、分離、培養(yǎng)等操作時,要嚴格要求無菌操作,操作過程要規(guī)范、切忌毛手毛腳,避免危險性病原生物對自己及周圍環(huán)境造成污染。在進行免疫學檢驗實驗時,由于涉及大量的具有傳染性的血清標本,如梅毒陽性血清、乙肝陽性血清等,操作時一定要做好防護,避免其經過皮膚傷口感染。
3.4 科學合理安排實訓內容
對于實訓內容的安排應該遵循由易到難、由簡單到復雜的原則。對于一些病原生物與免疫學的實驗內容最好先安排微生物學內容,因為實驗室存儲的各種病原生物是最主要的生物安全危險因素。對微生物的了解可以幫助她們樹立無菌觀念、為今后的實訓內容打下安全基礎。
3.5 杜絕各類生物安全隱患
任何實訓課上,老師都要對學生的操作情況認真指導。杜絕學生在觀察細菌培養(yǎng)物、病原性細菌鑒定、臨床標本鑒定等實訓課上發(fā)生菌液等危險因子的外漏。如果遇到此類情況,老師一定要在第一時間做好消毒滅菌措施,必要時,匯報實驗室管理人員妥善處理。
綜上,生物安全建設依然是一項長期而又艱巨的工作,作為一所醫(yī)學類院校,良好的醫(yī)學素養(yǎng)是我校對學生的培養(yǎng)目標之一,而生物安全素養(yǎng)作為醫(yī)學素養(yǎng)的一部分直接關系到學生今后在工作中的自身安全。雖然工作之后也有諸多培訓,但在學生階段對她們行為習慣的養(yǎng)成卻是非常關鍵的時期。生物安全牽涉到我校師生的生命財產、關系著我校各項教學、科研工作的順利發(fā)展,我校將繼續(xù)改進生物安全相關制度、規(guī)范實驗室使用規(guī)范、改善教學內容、對老師和學生嚴格要求,在學校領導和全體師生的共同努力下做好生物安全工作,杜絕任何生物安全事故的發(fā)生。
【參考文獻】
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[4]張潔,朱昌平,馬文哲,等.高校實驗室生物安全管理工作的思考[J].實驗室科學,2012,15(1):195-197.
“興趣是最好的老師”。在教學中,教師如何激發(fā)學生的學習興趣,培養(yǎng)其對醫(yī)學微生物學的興趣和熱愛,是學好醫(yī)學微生物學的動力源泉。在對教學工作的不斷探索和改革中我們發(fā)現(xiàn),首次的緒論課會給學生帶來先入為主的影響,關系到學生對教師及課程的評價,直接影響學生對課程的學習積極性和主觀能動性。通過緒論課可以啟發(fā)學生的學習動機,激發(fā)他們的學習興趣。同時,在緒論課上可以設置一些問題(如人體自身腸道中的微生物與機體組織之間存在怎樣的相互作用?微生物的耐藥性是怎么產生的,我們應該怎樣解決耐藥現(xiàn)象日益嚴重這一問題?曾經一度被控制的傳染病又開始死灰復燃,原因是什么,我們應該如何應對?),在后續(xù)的授課過程中逐漸揭開謎底。這樣帶著問題開展學習,可以較好地啟發(fā)學生的學習積極性,讓學生主動開啟微生物知識的大門。近年來由病原微生物引起的傳染病嚴重威脅著人類的健康,大量的新聞報道使學生對這些病原微生物有了一些粗淺的認識,將這些內容加入課堂教學內容中不僅可以增強學生學習的興趣,使內容變得更加生動,而且使學生充分認識到微生物原來距離我們如此之近,使理論知識找到實際落腳點。比如2010年8月,美國雞蛋因受沙門氏菌污染從而導致至少1300人受到沙門氏菌的感染。2011年,德國下薩克森州的豆芽被腸出血性大腸桿菌EHEC污染,從而造成22人因生食豆芽死亡,2200人住院治療。此外,還有近來流行的H7N9病毒、埃博拉病毒等。我們通過這些公共衛(wèi)生事件的引入,講解相關病原微生物的生物學性狀、致病性及免疫性、微生物學檢查法及防治原則,使學生有強烈的探索欲望,有效提高了課堂學習效率。
2靈活多樣,結合臨床,增強學生的主觀能動性
教學方法的選擇應根據不同的認知對象、不同的學科、同一學科的不同內容從而選擇不同的方法,但不管采取何種教學方法,關鍵在于把課上活,充分調動學生參與教學的積極性。因而根據教學內容的不同,我們采取了多種教學方法。如對于細菌的形態(tài)和結構這一章節(jié)內容,采用直觀的多媒體教學可以讓學生形象地看到各種細菌的形態(tài)、基本結構及特殊結構;在細菌各論部分,選取部分教學單元由學生自主教學。教師事先根據教學目的、教學內容提出授課提綱、學習重點及難點并確定人員分組。小組成員細致分工、相互協(xié)作,在課后完成資料素材收集及教學課件的準備。在此期間,教師與學生進行充分溝通,及時為學生排疑解惑,引導學生在教學大綱的框架下安排課堂講授內容,并傳授講課技巧及注意事項。同時設計《學生自主學習實踐評價標準》,由學生從教學內容安排、課件制作、語言表達等多方面互相進行評議、分析和總結,教師最后進行點評總結。這種教學方式一方面活躍了課堂氣氛,加深學生對所學知識的理解,增強了學生的團隊意識,另一方面也可以讓教師在與學生的互動中、從學生獨特的視角中發(fā)現(xiàn)許多平時不會思索的問題;在學習引起人類疾病的常見病毒這一部分內容時,采取專題討論方式進行學習。專題討論式學習由教師提出專題,分組學生在本專題內提出應深入討論的問題,查資料,作綜述,課堂進行討論。例如“人類免疫缺陷病毒”的討論式教學,學生提出一系列問題,如HIV-1感染的分子機制及免疫反應、T細胞功能受損的疾病、HIV疫苗的研究等,經過討論,不僅全面完成了教學內容,而且為學生提供了一次“綜述訓練”的機會,教學效果令人滿意。此外,作為一門與臨床學科關系十分緊密的基礎課程,我們在教學過程中十分注重微生物學知識的臨床應用,采用PBL教學法將臨床病例分析引入課堂討論教學,由病引入菌,菌中解析病,菌病結合,解除病菌。如此,在整個講授過程中就將病原微生物的生物學特性、致病物質與致病機制、檢查及防治原則講解清楚。
3反映前沿,開闊視野,培養(yǎng)學生創(chuàng)新能力
在教學過程中,既要將教材中最基本、最核心的理論知識傳授給學生,為學生自主學習打下堅實的基礎,同時要補充一些開拓性、時代性和應用性較強的學科前沿內容。如微生物的耐藥性這一章節(jié),我們?yōu)閷W生播放與耐藥機制相關的視頻和短片,引導學生就微生物耐藥機制的產生及防控進行積極的討論,鼓勵學生查閱耐藥機制最新的高質量學術論文并就學習心得進行討論交流,取得了良好的效果。此外,在授課過程中結合教研室老師的科研方向,為學生講授該領域的研究進展,如人體微生態(tài)學與免疫性疾病的相關性研究進展、新出現(xiàn)的傳染病病原體、流行性感冒病毒的研究進展等教材中鮮有介紹的前沿動態(tài),從而啟迪學生思維,拓寬學生的知識面。同時鼓勵學生積極參與教師的科研課題,通過進行科學實驗研究進一步激發(fā)學生學習微生物學的興趣及愛好,培養(yǎng)學生發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的能力和創(chuàng)新能力,全面提高學生綜合素質。
4利用網絡,練習鞏固,搭建師生交流的良好平臺