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[關(guān)鍵詞]產(chǎn)前篩查;梅毒;血清學(xué)檢測(cè);診斷
梅毒是一種傳染性較強(qiáng)的人類性傳播疾病,其病原體主要為梅毒螺旋體,傳染性較強(qiáng),危害性較為嚴(yán)重。梅毒通??煞譃橄忍煨悦范竞瞳@得性梅毒,其中先天性梅毒主要傳播方式為母嬰傳播,母體攜帶的梅毒螺旋體通過(guò)胎盤組織傳染給宮內(nèi)胎兒,可能會(huì)導(dǎo)致胎兒早產(chǎn)、流產(chǎn)等妊娠不利結(jié)局。因此,有必要在產(chǎn)前對(duì)孕婦進(jìn)行梅毒篩查,以便于及時(shí)采取相應(yīng)的干預(yù)措施,以減少梅毒的傳播,改善妊娠結(jié)局。本次研究為了探討不同梅毒血清檢測(cè)方法在產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查中的應(yīng)用效果,特于2014年1月~2015年6月選取500例進(jìn)行梅毒篩查的孕婦進(jìn)行研究,分別采取梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA法)、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST法)進(jìn)行檢測(cè)。現(xiàn)將研究結(jié)果分析如下。
1資料與方法
1.1一般資料
于2014年1月~2015年6月,選取在我院進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的500例孕婦進(jìn)行研究,所有孕婦均進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查,孕婦的年齡分布于20~37歲之間,平均為(29.67±6.34)歲,孕周為12~32周,平均孕周為(21.94±9.57)周,其中有427例初產(chǎn)婦、73例經(jīng)產(chǎn)婦。在進(jìn)行研究前,孕婦及其家屬均對(duì)研究方法和目的進(jìn)行了詳細(xì)的了解,并簽署知情同意書(shū)。此次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)許可通過(guò)。
1.2研究方法
分別采用梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA法)、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST法)對(duì)孕婦進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測(cè),每例孕婦均于清晨空腹?fàn)顟B(tài)時(shí)采集5mL的靜脈血液,以3000r/min的速度進(jìn)行離心處理,取血清進(jìn)行檢測(cè)。具體檢測(cè)方法如下:(1)TPPA法:使用微量滴管將血清稀釋液依次滴入微量反應(yīng)板的第1~4孔中,每孔均滴入25μL血清稀釋液,使用移液管將25μL血清稀釋液轉(zhuǎn)移到微量反應(yīng)板的第1孔中,再以2倍遞增的量依次轉(zhuǎn)移到第4孔,未致敏粒子滴入至第3孔中,將致敏粒子滴入至第4孔中,并使用平板振蕩器進(jìn)行30s的振蕩,使其混合,加蓋,放置于室溫中,2h后觀察并記錄結(jié)果。當(dāng)粒子環(huán)增大且外周邊緣不規(guī)則,或有均勻的凝集形成且呈膜狀延伸,表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。(2)免疫膠體金法:將血清和膠體金試紙放置于室溫中,將試紙帶有箭頭的一端放置入血清容器中,待10s后,將其平放,15min后觀察并記錄結(jié)果。當(dāng)試紙的檢測(cè)線和對(duì)照線位置均出現(xiàn)1條反應(yīng)線時(shí),表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。(3)TRUST法:在室溫環(huán)境中,取0.05mL血清,置入試驗(yàn)卡圈中,均勻涂抹,滴入1滴TRUST試劑液,以每分鐘100r的速度輕輕搖晃,8min后觀察并記錄結(jié)果。當(dāng)試驗(yàn)卡圈中出現(xiàn)粉紅色的凝集物質(zhì)時(shí),表示檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。
1.3觀察指標(biāo)
對(duì)比三種單一的梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法、三種方法聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值。
以暗視野顯微鏡檢查和VDRL非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)作為診斷金標(biāo)準(zhǔn),顯微鏡下可見(jiàn)梅毒螺旋體,且非梅毒螺旋體抗原試驗(yàn)結(jié)果為陰性,即確診為梅毒。敏感度=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陰性);特異度=真陰性/(真陰性+假陽(yáng)性);準(zhǔn)確性=(真陽(yáng)性+真陰性)/總例數(shù);陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陽(yáng)性);陰性預(yù)測(cè)值=真陰性/(真陰性+假陰性)。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
在SPSS17.0軟件中錄入數(shù)據(jù),并進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料表示為[n(%)],進(jìn)行x2檢驗(yàn)。三組之間的敏感度、特異度等數(shù)據(jù)采用2×3卡方表格檢驗(yàn),三組與三組聯(lián)合檢測(cè)之間的數(shù)據(jù)采用2×4卡方表格檢驗(yàn)。當(dāng)P
2結(jié)果
500例進(jìn)行產(chǎn)前梅毒常規(guī)篩查的孕婦中,有448例孕婦被確診為梅毒陽(yáng)性,52例孕婦為陰性。三種梅毒血清學(xué)檢測(cè)方法的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值均不存在顯著差異(x2=0.674、0.400、0.254、0.104、0.085,P=0.714、0.819、0.881、0.949、0.959),但三種檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值均明顯高于單一的檢測(cè)方法(x2=35.953、14.484、50.323、26.975、50.381,P=0.000、0.002、0.000、0.000、0.000)。見(jiàn)表1~2。
3討論
梅毒是一種由梅毒螺旋體入侵機(jī)體引發(fā)的感染性疾病,是一種較為常見(jiàn)的性傳播疾病,其臨床表現(xiàn)以生殖器官潰瘍?yōu)橹?。一般情況下,梅毒可分為先天性梅毒和獲得性梅毒,獲得性梅毒是指通過(guò)傳播的梅毒,先天性梅毒是指妊娠期孕婦體內(nèi)的梅毒經(jīng)胎盤組織進(jìn)入宮內(nèi)胎兒體內(nèi)引發(fā)的梅毒。近年來(lái),隨著生活方式和觀念的轉(zhuǎn)變,梅毒的發(fā)病率逐漸增高,通常表現(xiàn)為潛伏性的梅毒,如孕婦攜帶有梅毒螺旋體,很可能會(huì)傳染給其宮內(nèi)胎兒,導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)死亡、胎兒畸形等妊娠不利結(jié)局的發(fā)生。因此,有必要對(duì)妊娠期孕婦進(jìn)行產(chǎn)前梅毒篩查,以盡早發(fā)現(xiàn)孕婦的梅毒攜帶情況,并采取相應(yīng)的干預(yù)措施,能夠有效具有十分重要的意義。
目前,臨床上檢測(cè)梅毒螺旋體的方法主要有梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA法)、免疫膠體金法、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST法),其中TPPA法主要是通過(guò)對(duì)梅毒病原體進(jìn)行分包處理,采用致敏粒子和未致敏粒子進(jìn)行對(duì)比,觀察其凝集反應(yīng),以檢測(cè)梅毒螺旋體,這種檢測(cè)方法相對(duì)較為簡(jiǎn)單,檢測(cè)所需時(shí)間較少,可在2h內(nèi)對(duì)結(jié)果進(jìn)行判斷,通常被應(yīng)用于大規(guī)模的梅毒篩查;膠體金法主要是通過(guò)試紙?jiān)谘逯蟹胖煤蟮姆磻?yīng)線出現(xiàn)數(shù)目進(jìn)行判斷,操作相對(duì)簡(jiǎn)單,檢測(cè)較為快速,但容易受到其他因素的干擾,容易出現(xiàn)漏診;TRUST法主要是通過(guò)特制的TRUST試劑液對(duì)血清中的反應(yīng)素進(jìn)行檢測(cè),操作簡(jiǎn)單,但容易受到機(jī)體其它免疫性病變的影響,容易出現(xiàn)假陽(yáng)性情況。
【關(guān)鍵詞】 梅毒;甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn);明膠顆粒凝集試驗(yàn);酶聯(lián)免疫吸咐試驗(yàn)
血清學(xué)檢測(cè)是診斷梅毒的重要依據(jù)之一。不同的檢測(cè)方法都有其特殊的臨床診斷價(jià)值,實(shí)驗(yàn)室如何更合理地選用檢測(cè)方法,避免誤診、漏診等問(wèn)題是非常必要的。筆者利用TRUST、TPPA、ELISA法檢測(cè)分析梅毒檢測(cè)呈陽(yáng)性的血清樣本及正常對(duì)照血清,以探討3種方法對(duì)梅毒的輔助診斷價(jià)值。
1 資料與方法
1.1 資料 本資料為本院2008~2010年手術(shù)和輸血前篩查的2340血清標(biāo)本。男1330例,女1010例。年齡4~78歲,平均45歲。
試劑與儀器:TRUST試劑盒為上海榮盛生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品,TPELISA為上??迫A有限公司提供的梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫診斷試劑盒;TPPA為日本東亞株式會(huì)社提供的梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)試劑盒。儀器:安圖2010型酶標(biāo)儀。
1.2 方法 TRUST、TPELISA、TPPA法均按操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,并在有效期內(nèi)使用。使用TRUST試劑盒檢測(cè)2340例手術(shù)和輸血前的血清標(biāo)本,檢出陽(yáng)性的標(biāo)本再用TPELISA試劑盒、TPPA試劑盒進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),對(duì)每項(xiàng)結(jié)果的陽(yáng)性數(shù)與陰性數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)得出結(jié)論。
2 結(jié)果
2.1 三種方法檢測(cè)結(jié)果比較2340血清標(biāo)本中經(jīng)流行病學(xué)等方法確診的梅毒患者58例,占2.47%,非梅毒患者2282例,占97.53%。TPELISA、TPPA、TRUST方法
檢測(cè)梅毒患者血清陽(yáng)性率分別為100%(58/58),2.39%(56/2340),2.09%(49/2340)。
2.2 三種方法檢測(cè)結(jié)果特異性比較 TPELISA、TPPA、TRUST特異性分別為99.8%,98.6%,99.2%。特異性以TPELISA法最高,TRUST法的特異性次之,TPPA法特異性最低[1]。提示TPPA法誤診率最高。
2.3 三種方法檢測(cè)結(jié)果靈敏性比較 TPELISA、TPPA、TRUST靈敏性分別為100%(58/58),96.55%(56/58),84.48%(49/58)。在上述三種方法中。靈敏性以TPELISA法最高,TPPA法次之,TRUST法最差。提示TRUST法漏診率最高。
3 討論
梅毒是由梅毒(蒼白螺旋體)引起,在不同感染時(shí)期機(jī)體產(chǎn)生的抗體也不同。一期梅毒抗體主要是IgM型,二期梅毒抗體有IgM、IgG型,三期梅毒抗體主要是IgG型。由于梅毒患者在不同分期梅毒抗體出現(xiàn)早晚有差異,故臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)同時(shí)檢測(cè)梅毒非特異性血清反應(yīng)素與特異性抗體,以避免梅毒患者的漏診。
TPELISA是利用基因重組工程合成梅毒特異性抗原包被在微孔板上,檢測(cè)血清中的梅毒特異性抗體是診斷梅毒螺旋體感染的依據(jù)之一。但其檢測(cè)的是梅毒IgM和IgG的混合抗體,梅毒IgG抗體治愈后相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)仍然存在較高的陽(yáng)性率,甚至終生陽(yáng)性。因此,TPELISA陽(yáng)性只能說(shuō)明正處于感染期或既往感染,不能判斷梅毒疾病活動(dòng)與否,不能作為療效監(jiān)測(cè)手段[2]。
用ELISA方法和TPPA試驗(yàn)可用來(lái)初篩梅毒,但由于TPPA采用手工操作,需主觀判斷且步驟繁瑣,操作水平要求較高,價(jià)格昂貴,不適用于篩查。ELISA價(jià)格適中、操作簡(jiǎn)便,可在自動(dòng)化儀器上直接讀取數(shù)據(jù),符合室間及室內(nèi)質(zhì)控要求,便于質(zhì)量控制管理。TRUST法檢測(cè)雖然價(jià)格低、操作簡(jiǎn)單,但特異性和靈敏度均較低,不適合于篩查。因此,目前梅毒血清學(xué)篩選試驗(yàn)應(yīng)首選ELISA法。
臨床應(yīng)該同時(shí)檢測(cè)非特異性抗類脂質(zhì)抗原的血清反應(yīng)素和特異性螺旋體抗體進(jìn)行確診。本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)合理選用不同的方法平行進(jìn)行梅毒的血清學(xué)檢測(cè),以減少漏診、誤診率,為梅毒的確診提供參考依據(jù),并且在判定梅毒的發(fā)展、痊愈及藥物療效方面都具有十分重要的意義。
參 考 文 獻(xiàn)
關(guān)鍵詞 梅毒抗體 類脂質(zhì)抗體 甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn) 酶聯(lián)免疫吸咐試驗(yàn) 膠乳顆粒凝集試驗(yàn)
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.03.071
資料與方法
標(biāo)本來(lái)源:2004年12月~2006年10月,臨床標(biāo)本中TPPA檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本66例,梅毒恢復(fù)期病人標(biāo)本30例,住院內(nèi)科相關(guān)疾病30例。(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎10例,系統(tǒng)性紅斑狼瘡5例,乙型肝炎8例,丙型肝炎3例,高脂血癥4例。
檢測(cè)試劑:TRUST、TP-ELSIA 試劑,TPPA試劑。
方法:TRUST、TP-ELISA-TPA法均按操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,并在有效期內(nèi)使用。
結(jié) 果
結(jié)果見(jiàn)表1、2。
討 論
從表1可見(jiàn),TP-ELISA與TPPA法靈敏度、特異性都高,經(jīng)X2檢驗(yàn),TP-ELISA與TPPA之間差異無(wú)顯著性。但TPPA試劑成本高,操作較繁瑣、耗時(shí)較長(zhǎng),而TP-ELISA操作簡(jiǎn)便,不受樣本中纖維蛋白和溶血的影響,一次可進(jìn)行多份樣本的檢測(cè),用酶標(biāo)儀分析,客觀準(zhǔn)確,結(jié)果便于標(biāo)準(zhǔn)化管理。其檢測(cè)的是梅毒螺旋體的特異性抗體,該抗體在梅毒潛伏期即產(chǎn)生(約感染2周后)。因此,我們認(rèn)為TP-ELISA法是目前梅毒篩選、早期診斷、確認(rèn)的最好方法之一。
TP-ELISA法主要缺點(diǎn)是該法檢測(cè)的是梅毒病原體IgM和IgG的混合抗體,梅毒IgG抗體治愈后相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)仍然存在較高的陽(yáng)性率,甚至終身。因此,TP-ELISA單獨(dú)陽(yáng)性只能說(shuō)明正在感染或曾經(jīng)感染過(guò),不能判斷梅毒疾病活動(dòng)與否,或處于恢復(fù)期,因此不能作為療效監(jiān)測(cè)手段。
感染梅毒后,人體會(huì)產(chǎn)生兩類抗體,一類是針對(duì)梅毒螺旋體的特異性抗體,另一類是針對(duì)類脂質(zhì)的非特異性抗體,而TRUST法就是檢測(cè)針對(duì)類脂質(zhì)的非特性抗體,除感染梅毒外,患另外一些疾病,如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡、乙丙型肝炎、鉤端螺旋體病、高脂血癥等都可能導(dǎo)致類脂質(zhì)抗體產(chǎn)生,因而造成實(shí)驗(yàn)假陽(yáng)性。從表2可知,TRUST法假陽(yáng)性率為27%,故TRUST法陽(yáng)性要緊密結(jié)合臨床表現(xiàn)和TP-ELISA法檢查。值得一提的是本文TP-ELISA、TPPA在這些疾病中也有4%的假陽(yáng)性。國(guó)內(nèi)曾報(bào)道其住院內(nèi)科患者中,TP-ELISA法、TPPA法假陽(yáng)性更高。
參考文獻(xiàn)
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梅毒(syphilis)是由蒼白梅毒螺旋體(T.pallidum,TP)感染而引起的慢性傳染病,幾乎可侵犯人體全身各器官,嚴(yán)重者可危及生命。梅毒的傳播方式主要有3種途徑,即性傳播、母嬰傳播和血液傳播。為了解本地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者的梅毒感染情況,提高輸血安全,筆者對(duì)焦作市2003年1月1日至2007年12月31日86 263名無(wú)償獻(xiàn)血者的梅毒檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行調(diào)查分析,報(bào)告如下。
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本來(lái)源 2003年1月1日至2007年12月31日焦作市無(wú)償獻(xiàn)血者86 263人,年齡18~55歲,經(jīng)體檢合格后獻(xiàn)血。
1.2 試劑 初檢用ELISA 試劑盒(北京現(xiàn)代高達(dá)生物技術(shù)有限公司),復(fù)檢用ELISA 試劑盒(北京萬(wàn)泰生物技術(shù)有限公司),TPPA試劑盒(日本富士瑞必歐株式會(huì)社)。所有試劑均經(jīng)批檢合格,在有效期內(nèi)使用。
1.3 主要儀器 STAR全自動(dòng)樣本處理系統(tǒng)(瑞士HAMILTON公司),F(xiàn)AME全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)(瑞士HAMILTON公司),HTⅢ掃描酶標(biāo)儀(奧地利ANTHOS公司),MK2洗板機(jī)(芬蘭Thermo公司)。
1.4 方法 用兩種ELISA試劑分別檢測(cè)無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本。所有操作均嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,并按試劑使用說(shuō)明書(shū)要求判讀結(jié)果。結(jié)果呈陽(yáng)性的標(biāo)本,用TPPA試劑進(jìn)行確認(rèn)。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用χ2檢驗(yàn),以P
2 結(jié)果
2003年1月1日至2007年12月31日共檢測(cè)無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本86 263例,經(jīng)TPPA試劑確認(rèn)陽(yáng)性者247例,結(jié)果見(jiàn)表1、表2。
3 討論
本文結(jié)果顯示,焦作地區(qū)無(wú)償獻(xiàn)血者梅毒感染率為0.286%,低于張家港的1.8%[1]和上海的0.98% [2],與包頭的0.27% [3]和毫州的0.28% [4]相近;247例梅毒陽(yáng)性獻(xiàn)血者中,男128例,女119例,男女比為1.08∶1,梅毒感染率的性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。從年齡段看,梅毒陽(yáng)性獻(xiàn)血者以26~45歲最多,感染率達(dá)0.404%,高于0.286%的總的梅毒感染率,這可能是因?yàn)檫@一年齡段人群性生活活躍且相對(duì)開(kāi)放所致。
從梅毒感染率的趨勢(shì)看,2003年最高,2004-2006年逐年降低,2007年略有回升,與文獻(xiàn)[3-5]報(bào)道的獻(xiàn)血者梅毒感染率逐年增高的結(jié)果不符。分析原因可能是,本血站于2004年7月1日起使用了獻(xiàn)血者信息指紋識(shí)別系統(tǒng),在獻(xiàn)血前對(duì)獻(xiàn)血員的所有信息進(jìn)行惟一性識(shí)別,杜絕梅毒抗體陽(yáng)性者的再次獻(xiàn)血;同時(shí)對(duì)梅毒陽(yáng)性獻(xiàn)血者的檢測(cè)結(jié)果反饋進(jìn)行了進(jìn)一步改進(jìn),由原來(lái)的語(yǔ)音電話、電話通知等方式改為了面對(duì)面交流反饋。一方面建議梅毒陽(yáng)性獻(xiàn)血者進(jìn)行積極治療;另一方面建議其配偶進(jìn)行認(rèn)真檢查,抗體陰性者也要跟蹤檢查半年,期間不得參加獻(xiàn)血。由此降低了獻(xiàn)血者梅毒陽(yáng)性檢出率,減少血液浪費(fèi),進(jìn)一步保證輸血安全。
綜上所述,為保證輸血安全,血站應(yīng)做好以下幾方面的工作:一是加強(qiáng)無(wú)償獻(xiàn)血隊(duì)伍建設(shè)。做好無(wú)償獻(xiàn)血的宣傳、動(dòng)員、招募工作,不斷發(fā)展、建立一支相對(duì)穩(wěn)定的低危獻(xiàn)血者隊(duì)伍,保證臨床用血安全。二是加強(qiáng)和改善獻(xiàn)血前的征詢工作。體檢醫(yī)生應(yīng)針對(duì)獻(xiàn)血員的特征,耐心細(xì)致地進(jìn)行講解、詢問(wèn),特別是對(duì)初次獻(xiàn)血者,更要進(jìn)行系統(tǒng)全面的詳細(xì)了解,盡可能篩除高危獻(xiàn)血者。三是注重試劑選擇。使用靈敏度高、特異性好的試劑進(jìn)行血液檢測(cè),以防漏出現(xiàn)假陽(yáng)性。四是加強(qiáng)血液管理,科學(xué)合理用血。除血小板等特殊用血外,其他用血盡量在2℃~6℃保存72 h以后方可發(fā)往臨床使用。五是加強(qiáng)獻(xiàn)血后的信息管理工作。如使用指紋識(shí)別系統(tǒng)識(shí)別獻(xiàn)血員信息、對(duì)梅毒陽(yáng)性者進(jìn)行面對(duì)面結(jié)果反饋等。
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[3] 馬波,彭成,王愛(ài)萍,等.包頭地區(qū)獻(xiàn)血者梅毒檢測(cè)情況調(diào)查分析.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)與臨床,2006,18(12):1024.
【關(guān)鍵詞】 血清固定; 梅毒螺旋體IgM抗體; 免疫印跡法; RPR
梅毒是由蒼白密螺旋體(treponema pallidum,TP)感染所致的一種慢性系統(tǒng)性性傳播疾病,可侵犯全身各組織器官,造成多器官的損害[1],是我國(guó)目前主要性傳播疾病之一。近年來(lái),梅毒的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[2],隨著發(fā)病率的上升,梅毒病人治療后的一種血清學(xué)現(xiàn)象日益受到關(guān)注,即少數(shù)患者經(jīng)驅(qū)梅治療后梅毒血清試驗(yàn)持續(xù)不陰轉(zhuǎn),這種現(xiàn)象稱之為血清固定(sero-fixation)[3]或者血清抵抗(sero-resistance)。據(jù)報(bào)道近年來(lái)梅毒患者血清固定發(fā)生率顯著升高[4],各期梅毒治療后血清固定發(fā)生率不一。
目前,臨床上通常采用熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS)、梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)(TPPA)、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR)等方法來(lái)為梅毒的診斷提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。其中,RPR通常用作梅毒篩查、療效觀察、判斷復(fù)發(fā)及再感染的監(jiān)測(cè)[5],而FTA-ABS、TPHA、TPPA通常用作確證梅毒。上述各種方法均已成熟,但仍各有缺點(diǎn),不足以完全解決梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷問(wèn)題。本文采用抗原特異性免疫印跡法(WB)檢測(cè)梅毒螺旋體特異性IgM抗體,用于血清固定病例的確證,現(xiàn)總結(jié)如下。
1一般資料
1.1病例資料
梅毒患者285例,來(lái)自2012年1月1日至7月31日我院皮膚科門診。梅毒初篩實(shí)驗(yàn)采用快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)(RPR),選取病程1年以上、RPR陽(yáng)性且滴度固定病例用梅毒螺旋體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑盒(WB法)做確診實(shí)驗(yàn)。
1.2檢測(cè)試劑
快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)(RPR)試劑盒由上海科華生物工程股份有限公司提供,梅毒蒼白螺旋體特異性IgM抗體檢測(cè)試劑盒(WB法)由無(wú)錫博慧斯生物醫(yī)藥科技有限公司提供。所有試劑均在有效期內(nèi)。
1.3儀器
梅毒旋轉(zhuǎn)振蕩器1臺(tái), XK96-9型,由姜堰市新康醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn);低速離心機(jī)1臺(tái), SC-04型,由安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。
2結(jié)果
2.1梅毒患者RPR實(shí)驗(yàn)結(jié)果
285例來(lái)我院就診的梅毒患者均按照中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部頒布的《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》明確診斷,其中一期梅毒108例,二期梅毒121例,潛伏梅毒56例;RPR陽(yáng)性198例,滴度在1∶1~1∶32之間,RPR陰性87例。198例RPR陽(yáng)性梅毒患者病程在1周~5年之間,其中28例患者病程1年以上,且RPR滴度固定。28例患者中二期梅毒17例,潛伏梅毒11例,無(wú)一期梅毒。
2.2梅毒患者血清固定情況
在28例血清固定的患者中,RPR滴度固定于原倍者17例,1∶2者9例,1∶4者2例,無(wú)RPR滴度大于1∶4者。見(jiàn)表1。RPR滴度轉(zhuǎn)陰后復(fù)升者1例,為二期梅毒。
3討論
機(jī)體感染梅毒螺旋體后產(chǎn)生的抗體分為兩類:梅毒螺旋體特異性抗體和非梅毒螺旋體特異性抗體。前者包括TP-IgM抗體和TP-IgG抗體,TP-IgM抗體在感染2周后產(chǎn)生,4周后機(jī)體產(chǎn)生TP-IgG抗體;后者主要是類脂質(zhì)又稱為反應(yīng)素,是組織被梅毒螺旋體破壞后釋放的心磷脂等刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體[6]。因此梅毒血清學(xué)抗體的檢測(cè)有特異性和非特異性兩類,性病研究所實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(TRUST)、RPR等非梅毒螺旋體特異性實(shí)驗(yàn)用于常規(guī)篩選、療效觀察、判斷復(fù)發(fā)或再感染;TPHA、TPPA、TP-ELISA和梅毒螺旋體免疫印跡試驗(yàn)(WB)等梅毒螺旋體特異性試驗(yàn)常用作確診試驗(yàn)[7]。
早期梅毒經(jīng)規(guī)范化治療后,多數(shù)患者的梅毒血清反應(yīng)素抗體可轉(zhuǎn)陰,但有部分患者的梅毒血清反應(yīng)素抗體滴度下降較慢或不轉(zhuǎn)陰。GOH等認(rèn)為早期梅毒患者接受規(guī)范驅(qū)梅治療后12個(gè)月血清反應(yīng)素試驗(yàn)不陰轉(zhuǎn)者即為血清固定。血清固定形成的原因和機(jī)制尚不完全清楚,根據(jù)長(zhǎng)期臨床經(jīng)驗(yàn)推測(cè)血清固定可能與以下因素有關(guān):部分梅毒患者感染梅毒螺旋體后,因無(wú)臨床癥狀而忽視,未經(jīng)治療;部分患者雖經(jīng)治療,但不規(guī)范或劑量不足,未按要求定期復(fù)查;部分患者因個(gè)體的免疫狀態(tài)不同出現(xiàn)細(xì)胞免疫抑制或免疫失衡,逃避免疫系統(tǒng)的梅毒螺旋體長(zhǎng)期潛伏于組織中,機(jī)體受其持續(xù)刺激產(chǎn)生抗體,導(dǎo)致血清學(xué)檢測(cè)持續(xù)陽(yáng)性[8]。因此機(jī)體免疫抑制可能是造成梅毒血清固定的重要因素。趙建斌等[9,10]對(duì)免疫抑制的研究也得出類似觀點(diǎn),外周血CD4+CDbright調(diào)節(jié)性T細(xì)胞比例增高造成免疫抑制,導(dǎo)致梅毒患者血清固定。有研究認(rèn)為未經(jīng)正規(guī)驅(qū)梅治療的早期梅毒患者存在明顯的細(xì)胞免疫抑制現(xiàn)象,表現(xiàn)為Th(CD4)、NK、Th/Ts(CD4/CD8)明顯降低,而Ts(CD8)明顯增高[11]。Levene等[12]發(fā)現(xiàn)二期梅毒患者的血漿中含有大量由進(jìn)入血液的蒼白螺旋體脫落的莢膜粘多糖,它能滅活Th/Tc細(xì)胞,從而導(dǎo)致Th低下。在梅毒非特異性抗體血清學(xué)檢測(cè)中(如RPR),常出現(xiàn)生物學(xué)假陽(yáng)性。由于磷脂抗體的非特異性,在梅毒患者合并某些結(jié)締組織病及伴有自身抗體的疾病中,生物學(xué)假陽(yáng)性維持時(shí)間較長(zhǎng),可持續(xù)數(shù)月或數(shù)年甚至終身[13],這在一定程度上造成了梅毒血清固定患者的假陽(yáng)性。
近年來(lái),隨著梅毒患者的增多,血清固定發(fā)生率也隨之增加,血清固定后是否需要重新治療,應(yīng)根據(jù)腦脊液VDRL檢測(cè)結(jié)果來(lái)確定,但由于部分醫(yī)院醫(yī)療條件和病人依從性的限制,腦脊液檢測(cè)較難普遍開(kāi)展,因而治療和處理十分棘手,成為梅毒防治工作中的難題,嚴(yán)重影響患者身心健康。而TP-IgM抗體是大分子蛋白,不易通過(guò)腦脊液,因此我們探討TP-IgM抗體是否可作為梅毒血清固定患者感染并活動(dòng)的一項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)。
本研究采用快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片實(shí)驗(yàn)(RPR)對(duì)285例梅毒患者血清作初篩,其中28例患者病程在1年以上,RPR陽(yáng)性且滴度固定,即血清固定,再用抗原特異性免疫印跡法對(duì)28例血清固定患者做確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。本研究中血清固定發(fā)生率為9.82%,較楊文林等報(bào)道17.5%低[4],其中二期梅毒發(fā)生血清固定率為14.05%,潛伏梅毒血清固定率為19.64%,一期梅毒無(wú)血清固定。大部分潛伏梅毒患者病期不明,患病早期治療不及時(shí)不規(guī)范,容易形成血清固定,該部分患者通常仍具有一定的傳染性[14]。何玉清等[15]研究認(rèn)為部分梅毒患者在兩年內(nèi)機(jī)體內(nèi)仍有少量梅毒螺旋體存在,使TP-IgM抗體產(chǎn)生并維持一定水平。
本研究28例梅毒血清固定患者中8例經(jīng)免疫印跡法檢測(cè)為TP-IgM陽(yáng)性,按照神經(jīng)梅毒給予頭孢曲松鈉治療半個(gè)月,一年后復(fù)查TP-IgM 6例轉(zhuǎn)陰,RPR 3例轉(zhuǎn)陰。頭孢曲松鈉藥代動(dòng)力學(xué)顯示可以在腦脊液中達(dá)有效濃度,并維持對(duì)敏感細(xì)菌的殺菌作用達(dá)24h,證明在部分梅毒血清固定患者機(jī)體內(nèi)確實(shí)存在活的梅毒螺旋體,也在一定意義上提示我們TP-IgM抗體可作為梅毒血清固定患者感染并活動(dòng)的一項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)。但由于本研究樣本量較小,存在一定的局限性,有待進(jìn)一步研究探討。
楊琳等[16]研究顯示部分梅毒患者反應(yīng)素持續(xù)陽(yáng)性,但TP-IgM抗體經(jīng)3次以上檢測(cè)均為陰性。本研究28例梅毒血清固定患者中20例經(jīng)免疫印跡法檢測(cè)為TP-IgM陰性,8例TP-IgM陽(yáng)性患者經(jīng)抗菌治療后6例陰轉(zhuǎn),說(shuō)明該部分梅毒血清固定患者機(jī)體內(nèi)已不存在活動(dòng)的梅毒螺旋體。TP-IgM抗體的檢測(cè)對(duì)梅毒患者判愈更有意義。一般認(rèn)為一期梅毒患者TP-IgM抗體陰轉(zhuǎn)為3個(gè)月,二期梅毒患者達(dá)到9個(gè)月,潛伏梅毒患者時(shí)間較長(zhǎng),可達(dá)到2年[17]。對(duì)TP-IgM抗體的檢測(cè)結(jié)果分析,當(dāng)TP-IgM抗體轉(zhuǎn)陰,說(shuō)明患者體內(nèi)沒(méi)有活動(dòng)的梅毒螺旋體,可酌情繼續(xù)隨訪或判愈;TP-IgM抗體不轉(zhuǎn)陰,說(shuō)明患者體內(nèi)可能殘存梅毒螺旋體,需繼續(xù)治療;某些特殊病例中,TP-IgM抗體陰轉(zhuǎn)患者隨訪時(shí)再轉(zhuǎn)陽(yáng)性,表明再次感染梅毒[18]。
在8例TP-IgM抗體陽(yáng)性患者中,4例RPR固定在1∶1,占TP-IgM陽(yáng)性的50%,他們具有以下臨床特征:年齡偏大,平均60.75歲,感染后治療時(shí)間較晚,3例合并有基礎(chǔ)性疾??;3例固定在1∶2;1例固定在1∶4。但TP-IgM抗體與RPR固定滴度的關(guān)系尚不明確,與以上三項(xiàng)是否相關(guān)有待進(jìn)一步研究。同時(shí)本研究樣本數(shù)有限,還需在今后的工作中進(jìn)一步擴(kuò)大研究。
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[12]趙建斌,龔匡隆.梅毒患者外周血CD+CDbright調(diào)節(jié)性T細(xì)胞檢測(cè).中華皮膚科雜志, 2005, 39(5): 247-249.
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1.遼寧省鐵嶺市中心血站,遼寧鐵嶺 112000;2.遼寧省調(diào)兵山市鐵法煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院,遼寧調(diào)兵山 112700
[摘要] 目的 探究分析血清梅毒抗體檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性與臨床有關(guān)問(wèn)題。方法 于2012年11月—2013年11月期間接受血清梅毒抗體檢測(cè)的1410例患者,通過(guò)兩種不同的檢驗(yàn)方法加以檢測(cè),并且根據(jù)患者年齡的不同、性別的不同對(duì)比分析其關(guān)系。結(jié)果 不同性別患者采取梅毒血清檢測(cè)后,檢測(cè)結(jié)果對(duì)比不存在差異性,P>0.05不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但對(duì)于不同年齡階段的患者采取梅毒血清檢測(cè)發(fā)現(xiàn),檢測(cè)結(jié)果有明顯差異性,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 因?yàn)榛颊弑旧碓?、檢測(cè)試劑原因,易導(dǎo)致血清試驗(yàn)存在一定假陽(yáng)性率,引發(fā)臨床上的醫(yī)患糾紛事件。血清梅毒抗體檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者應(yīng)結(jié)合臨床綜合因素具體分析判斷。
[
關(guān)鍵詞 ] 血清梅毒抗體檢測(cè);陽(yáng)性結(jié)果;臨床相關(guān)問(wèn)題
[中圖分類號(hào)] R759.1
[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A
[文章編號(hào)] 1672-5654(2014)05(c)-009-02
Study on detection of syphilis antibody positive results and related clirnical problems
SHI BoLIU Liya
1.Liaoning province liaoning tieling tieling blood center of Diaobingshan City ,Liaoning 112000 ,China;2.Tiefa coal industry group general hoaspital,Liaoning Diaobingshan ,Liaoning 112700 ,China
[Abstract] Objective Analysis of serum syphilis antibody test results are positive and clinical study on the issues related to abstract. Methods From 2012 November -2013 year in November 1410 cases underwent detection of serum antibody of syphilis patients, to be detected by the two different test methods, and the comparison of different gender patients, according to different age analysis of their relationship. Results The patients with different gender take syphilis serum detection, detection results there is no difference, P> 0.05 is not statistically significant. But for the different age patients with syphilis serum detection, the detection results have significant differences, P< 0.05 had statistical significance. Conclusion Because patients itself causes, detection reagent, easily lead to serum test has some false positive rate, cause clinically doctor-patient dispute. Serum syphilis antibody test results were positive patients should be combined with clinical comprehensive factors specific analysis and judgment.
[Key words] Detection of serum antibrly of syphilis; Positive results;Related clincal probleus梅毒螺旋體(簡(jiǎn)稱TP)是密螺旋體中蒼白螺旋體的一個(gè)亞種[1],就是導(dǎo)致人類性病梅毒的一種病原體,對(duì)人類的身體健康產(chǎn)生極為嚴(yán)重的危害。對(duì)TP的臨床診斷,現(xiàn)階段一般依據(jù)臨床鐵法煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院檢查、患者病史以及暗視野顯微鏡檢查TP,檢測(cè)血清學(xué)抗體。目前,對(duì)于手術(shù)前、輸血前的患者檢查將血清梅毒抗體的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)設(shè)為常規(guī)檢查項(xiàng)目?,F(xiàn)選取于2012年11月—2013年11月期間接受血清梅毒抗體檢測(cè)的1410例患者,統(tǒng)計(jì)其血清梅毒抗體檢測(cè)的結(jié)果并具體分析,總結(jié)如下。
1資料與方法
1.1一般資料
選取鐵法煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院于2012年11月-2013年11月期間接受血清梅毒抗體檢測(cè)的1410例患者,均屬于手術(shù)前、輸血前的患者。其中,女性患者665例,男性患者745例。年齡均在2~77歲之間,平均年齡(43.62±3.52)歲。同時(shí),選取同期在鐵法煤業(yè)集團(tuán)總醫(yī)院體檢的465例健康者作為對(duì)照,其中335例男性,130例女性。
1.2檢測(cè)試劑
RPR試劑盒來(lái)自廈門創(chuàng)新公司生產(chǎn),F(xiàn)TA-ABS 檢測(cè)試劑盒選自軍事醫(yī)學(xué)院生物流行病學(xué)研究所。
1.3檢測(cè)儀器
Genesis BMP 酶標(biāo)儀由瑞士 TECAN 公司制造。
1.4方法
1.4.1非密螺旋體抗原檢測(cè)RPR 檢測(cè),即為快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)。試驗(yàn)操作方法、步驟均根據(jù)RPR試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。
1.4.2密螺旋體抗原檢測(cè)FTA-ABS 檢測(cè),即為熒光密螺旋體抗體吸收檢測(cè)。試驗(yàn)操作方法、步驟均根據(jù)FTA-ABS試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行[2]。
2結(jié)果
2.1性別不同的患者行梅毒血清學(xué)檢測(cè)對(duì)比情況
不同性別患者采取梅毒血清檢測(cè)后,檢測(cè)結(jié)果對(duì)比不存在差異性,P>0.05不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見(jiàn)表1。
2.2年齡不同的患者梅毒血清學(xué)檢測(cè)對(duì)比情況
對(duì)于不同年齡階段的患者采取梅毒血清檢測(cè)發(fā)現(xiàn),檢測(cè)結(jié)果有明顯差異性,P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見(jiàn)表2。
2.3影響陽(yáng)性結(jié)果的相關(guān)因素
對(duì)陽(yáng)性結(jié)果造成影響的相關(guān)因素:①早期梅毒通常發(fā)生硬下疳后1~2周才會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)素,所以早起血清反應(yīng)結(jié)果為陰性。②感染梅毒以后,立即治療,因?yàn)檠宸磻?yīng)素較低,檢測(cè)易為陰性。③如果梅毒患者同時(shí)伴有艾滋病,檢測(cè)時(shí)易出現(xiàn)漏診。④由于技術(shù)操作、抗原敏感性較低時(shí),會(huì)引起血清試。
3討論
現(xiàn)階段,對(duì)梅毒疾病血清學(xué)檢測(cè)的擇取由國(guó)際WHO推薦應(yīng)用RPR檢測(cè)、 VDRLFA 檢測(cè)等方法,對(duì)血清加以過(guò)篩試驗(yàn),檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性的患者通過(guò)FTA-ABS 予以檢測(cè)。利用ELISA 與免疫印跡試驗(yàn)等方法作進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)。
RPR檢測(cè)是血清梅毒抗體檢測(cè)十分有效的篩選試驗(yàn)方法之一,也可以檢測(cè)患者血清機(jī)體血清內(nèi)的反應(yīng)素,即為抗脂質(zhì)抗體。并且反應(yīng)素能夠在非密螺旋體患者血清內(nèi)發(fā)現(xiàn),包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等機(jī)體自身免疫系統(tǒng)疾病,水痘、風(fēng)疹等機(jī)體病毒性感染,瘧疾、麻風(fēng)以及吸毒者,妊娠期女性、甚至個(gè)別健康者也有可能出現(xiàn)生物學(xué)假陽(yáng)性的結(jié)果,特異性并不高,能夠?qū)е屡R床中陽(yáng)性率呈偏高的現(xiàn)象,所以還需要進(jìn)一步通過(guò)特異性比較強(qiáng)的密螺旋體抗原檢測(cè)作進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)。
FTA-ABS檢測(cè)則是通過(guò)密螺旋體抗原對(duì)患者血清內(nèi)的抗 TP 的 IgG/IgM 類抗體進(jìn)行檢測(cè)[3],其最先應(yīng)用吸收劑(其含有非密螺旋體的一種 Reitr 株提取物),在非特異性螺旋體抗體去除以后,在對(duì)其加入梅毒螺旋體抗原 Nichols 株,患者發(fā)生特異性抗體反應(yīng),該種方法具有比較強(qiáng)的特異性。但是其仍然不能區(qū)別開(kāi)地方性梅毒、品他病以及雅司病。因?yàn)樯n白螺旋體蒼白亞種(即為梅毒螺旋體)、品他密螺旋體以及蒼白螺旋體地方極細(xì)亞種、亞種,在抗原、形態(tài)結(jié)構(gòu),甚至是DNA 同源性方面均比較相似,不能把它們一一區(qū)別出來(lái)。所以除了微生物學(xué)檢查里面檢測(cè)出密螺旋體、梅毒血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性能夠輔助臨床診斷是密螺旋體感染以外,還需要根據(jù)臨床實(shí)際表現(xiàn),才能夠確定是具體哪種密螺旋體引起的感染。但是前者不屬于性病范圍內(nèi),部分非性病傳播疾病大多發(fā)生于經(jīng)濟(jì)比較落后地區(qū)的兒童人群。
本次研究可見(jiàn)表一中性別不同的患者采取血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果可知,男性(1.34%)與女性(1.35%)之間發(fā)生梅毒陽(yáng)性率不存在明顯的差異性。而表二中年齡不同的患者采取梅毒血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn),差異性尤為明顯。本次研究中1410例患者并不屬于性疾病傳播的高危人群,在不同的年齡階段中,在61~77歲段檢測(cè)結(jié)果顯示陽(yáng)性率是最高的,約為1.60%。這部分老年患者中,部分通過(guò)臨床試驗(yàn)證實(shí)確實(shí)存在梅毒,但是其他老年患者除了單純血清梅毒抗體陽(yáng)性之外,不存在任何臨床癥狀表現(xiàn)、體征征象,詳細(xì)詢問(wèn)患者病史也未發(fā)現(xiàn)有關(guān)證據(jù)證明他們確實(shí)感染了梅毒。所以,難以向患者及其家屬給予明確解釋,從而很容易產(chǎn)生醫(yī)患糾紛事件。除此之外,患者本身原因、檢測(cè)試劑、檢測(cè)時(shí)間、血清因素等都會(huì)對(duì)梅素檢測(cè)結(jié)果造成影響。
對(duì)于老年患者梅毒血清學(xué)檢測(cè)抗體結(jié)果陽(yáng)性率相對(duì)較高,可能產(chǎn)生的主要因素:這部分老年患者存在基礎(chǔ)疾病,體內(nèi)可能釋放出可誘導(dǎo)抗類脂抗體分泌,或是TP抗體交叉抗原的產(chǎn)生。同時(shí),還有現(xiàn)在市場(chǎng)上出售的密螺旋體抗原檢測(cè)所用的部分試驗(yàn)試劑盒內(nèi),未佩帶吸收稀釋劑,需要進(jìn)行檢測(cè)的血清均沒(méi)有應(yīng)用吸收劑加以吸除及非梅毒螺旋體交叉反應(yīng)的抗體。根據(jù)上述研究分析,可引起梅毒血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果存在假陽(yáng)性率,特別是高年齡段老年患者。總之,血清梅毒抗體檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性,只能說(shuō)明檢測(cè)血清標(biāo)本內(nèi)含有抗類脂抗體、TP抗體,無(wú)法作為患者確實(shí)感染梅毒螺旋體的可靠依據(jù)。對(duì)于檢測(cè)結(jié)果存在爭(zhēng)議時(shí),需要為患者或其技術(shù)給出合理的、客觀的解釋,以免發(fā)生誤診。對(duì)于血清梅毒檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的患者,必須結(jié)合其臨床癥狀表現(xiàn)、疾病史分析、有關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果加以綜合分析,再給予最終的正確診斷。
[
參考文獻(xiàn)]
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[2]武建國(guó).老年人抗梅毒螺旋體抗體測(cè)定的假陽(yáng)性率偏高[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2010,24(4):241-243.
【關(guān)鍵詞】 梅毒;TPELISA;TPPA;RPR;對(duì)比
作者單位:610051 四川省成都市第六人民醫(yī)院梅毒是通過(guò)傳播的高傳染性疾病,發(fā)病率高,嚴(yán)重危害人體健康[1]。梅毒發(fā)病是梅毒螺旋體感染造成的,一般有兩種抗體產(chǎn)生:非特異性抗類脂質(zhì)抗體;特異性抗螺旋體抗體[2]。為對(duì)患病者進(jìn)行早期診斷和治療,目前采用的診斷方法主要通過(guò)血清法檢測(cè)梅毒抗體,以陽(yáng)性結(jié)果作為判斷標(biāo)準(zhǔn),該方法實(shí)施便捷,效果顯著。本文就900份血液樣本以TPELISA、TPPA、RPR等方法檢測(cè),并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。
1 資料與方法
1.1 血液樣本 選擇我院提供的900份血液樣本。
1.2 試劑和儀器 TPELISA試劑由珠海麗珠公司提供;TPPA試劑由富士瑞必歐株式會(huì)社提供;RPR試劑由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司提供。RPR使用儀器由上海汗諾儀器有限公司提供。
1.3 方法步驟 第一 采用TPELISA法、TPPA法檢測(cè)血液樣本,第二TPELISA法、TPPA法結(jié)果顯示陽(yáng)性的樣本采用RPR法檢測(cè)滴度。試劑使用必須根據(jù)說(shuō)明書(shū)中規(guī)定的步驟執(zhí)行。檢測(cè)結(jié)果:①ELISA: 樣本OD值≥cutoff(CO)為陽(yáng)性,否則為陰性。CO=0.2+陰性對(duì)照平均OD值,如果陰性對(duì)照均值<0.05,則按0.05計(jì)算。② TPPA 、RPR: 根據(jù)說(shuō)明書(shū)規(guī)定的時(shí)間范圍內(nèi)判定結(jié)果。
2 結(jié)果
2.1 TPELISA法檢測(cè)900份血液樣本其中陽(yáng)性反應(yīng)132例,TPPA法130例陽(yáng)性,RPR法72例陽(yáng)性。
2.2 TPPA法結(jié)果為陽(yáng)性的樣本采用TPELISA法復(fù)檢仍顯示陽(yáng)性,而TPELISA法結(jié)果為陽(yáng)性的樣本在使用TPPA法復(fù)檢時(shí)有2例顯示陰性,吻合率98.48%,兩組結(jié)果無(wú)顯著差異。
2.3 RPR法檢測(cè)樣本得到72例陽(yáng)性反應(yīng),對(duì)比TPELISA組吻合率54.54%,TPPA組55.38%,結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)源意義(P
3 討論
TPELISA法和TPPA法的原理都是通過(guò)合成抗原檢測(cè)梅毒特異性抗體,由于所用抗原的不同,二者檢測(cè)的結(jié)果會(huì)出現(xiàn)差異。本研究132份TPELISA陽(yáng)性結(jié)果通過(guò)TPPA法檢測(cè),其中130份結(jié)果吻合,吻合率為98.48%,另外2份TPPA和RPR檢測(cè)結(jié)果一致為陰性,假陽(yáng)性率為1.53%。結(jié)果顯示TPELISA法具有較高的敏感性,可以用于同時(shí)對(duì)較多對(duì)象進(jìn)行梅毒檢測(cè)。TPPA法可以用于確診梅毒螺旋體感染,排除TPELISA法中的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,有利于早期患者確診。
RPR法操作簡(jiǎn)單易行,用于檢測(cè)梅毒非螺旋體抗體,即反應(yīng)素的檢測(cè),結(jié)果出現(xiàn)的時(shí)間相對(duì)特異性抗體檢測(cè)要晚一些,對(duì)于一、三期、潛伏期梅毒和神經(jīng)梅毒診斷結(jié)果不理想,同時(shí)由于其他疾病出現(xiàn)同樣的非特異性反應(yīng),造成假陽(yáng)性結(jié)果。這就限制了RPR僅可以用于梅毒篩選,另一方面,通過(guò)觀察RPR的滴度可以判斷梅毒病情的變化。
由上可得,血清法檢測(cè)梅毒抗體,第一步需要通過(guò)TPELISA法和TPPA法檢測(cè),篩選陽(yáng)性反應(yīng),為負(fù)責(zé)醫(yī)師通過(guò)檢測(cè)結(jié)果和患者表征,進(jìn)一步對(duì)病情進(jìn)行診斷,降低梅毒漏診、誤診的可能性[3]。第二,通過(guò)RPR法對(duì)上一步確診感染梅毒患者進(jìn)行滴度檢測(cè),密切關(guān)注患者是否出現(xiàn)梅毒復(fù)發(fā)或再感染狀況,為患者施治提供依據(jù)。所以,單一方式檢測(cè)梅毒抗體不能作為最終結(jié)果,需要聯(lián)系患者實(shí)際,選擇RPR法、TPELISA法和TPPA法篩選確診,有效提高梅毒抗體的確診率,為下一步的臨床治療提供參考,保證生活質(zhì)量。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] 李韶深,劉春莉,劉琳.梅毒ELISA和TPPA兩種試驗(yàn)方法的血清質(zhì)量控制的體會(huì).中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志, 2005,(03).
一、導(dǎo)入新課
成功的課堂開(kāi)頭,是師生建立感情的第一座橋梁,也是經(jīng)營(yíng)整個(gè)課堂氣氛的第一道關(guān)卡。導(dǎo)入的功能主要在于使新舊學(xué)習(xí)任務(wù)之間能順利的過(guò)渡銜接。這一環(huán)節(jié)應(yīng)做好兩方面的事情:一是上課伊始,運(yùn)用新穎的刺激和引人入勝的活動(dòng),引導(dǎo)學(xué)生把注意指向新的學(xué)習(xí)課題,引導(dǎo)學(xué)生對(duì)課題的關(guān)注,使心理活動(dòng)集中于要掌握的內(nèi)容;二是利用學(xué)生熟知的素材把它作為“引子”過(guò)渡,找到新知識(shí)與學(xué)生舊有經(jīng)驗(yàn)的“契合點(diǎn)”,建立新舊知識(shí)的聯(lián)系,做好學(xué)習(xí)的準(zhǔn)備。
二、出示教學(xué)目標(biāo)
教學(xué)目標(biāo)是指教學(xué)活動(dòng)的主體在具體教學(xué)活動(dòng)中所要達(dá)到的預(yù)期結(jié)果。它具體而精確的體現(xiàn)了教學(xué)過(guò)程結(jié)束時(shí)教師和學(xué)生共同完成的教學(xué)任務(wù)。教學(xué)目標(biāo)應(yīng)包括知識(shí)和能力、過(guò)程和方法、情感態(tài)度和價(jià)值觀三方面。教師要明確重點(diǎn)、難點(diǎn),提醒學(xué)生注意。
三、整體感知課文
這一環(huán)節(jié)主要是學(xué)生走進(jìn)文本,感知文本的過(guò)程。學(xué)生通過(guò)讀,對(duì)全文有個(gè)整體的了解和把握。這一環(huán)節(jié)要給足時(shí)間,讓學(xué)生充分感知,除了解決必要的字、詞障礙外,最終達(dá)到能概括出讀懂的內(nèi)容,能提出疑惑的問(wèn)題。一般安排默讀或小聲讀,可以自讀、聽(tīng)讀、也可以采取分組閱讀等形式。感知內(nèi)容時(shí)一般不安排大聲讀,齊讀。
四、設(shè)計(jì)與探究問(wèn)題
這一環(huán)節(jié)也叫主題探究,就是讓學(xué)生圍繞問(wèn)題展開(kāi)的探究活動(dòng)。在這一活動(dòng)中,問(wèn)題是核心,要呈現(xiàn)有利于探究的“有效問(wèn)題”,為下文深入探究做準(zhǔn)備。師生要針對(duì)學(xué)生疑惑的問(wèn)題,結(jié)合重點(diǎn)內(nèi)容,共同篩選、整理好探究問(wèn)題(一般不過(guò)四條)。學(xué)習(xí)的形式是合作、探究,每組同學(xué)可以根據(jù)自己的興趣愛(ài)好一起合作、探究完成??梢圆捎脝?wèn)答的方法,可以采用討論的方法,也可以采用集體校對(duì)的方法,只要最終能解決問(wèn)題均可。教師也要參與進(jìn)來(lái),并要適時(shí)調(diào)動(dòng)學(xué)生積極思考和討論。
五、教師點(diǎn)撥指導(dǎo)
教師既可在學(xué)生發(fā)言中點(diǎn)撥,也可以在進(jìn)行小結(jié)時(shí)點(diǎn)撥。教師要指導(dǎo)學(xué)生運(yùn)用恰當(dāng)?shù)膶W(xué)習(xí)方法,發(fā)現(xiàn)學(xué)生的個(gè)性特點(diǎn)。在學(xué)生回答時(shí),要注意引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)發(fā)表意見(jiàn),或根據(jù)問(wèn)題的難易選擇不同類型的學(xué)生來(lái)回答,并及時(shí)肯定學(xué)生的積極表現(xiàn)。
六、學(xué)習(xí)效果反饋
這一環(huán)節(jié)也可叫做強(qiáng)化鞏固。就是要引導(dǎo)學(xué)生動(dòng)手、動(dòng)口、動(dòng)腦,在做中用、用中學(xué)。當(dāng)然讓學(xué)生回答課后的問(wèn)題也是一項(xiàng)不錯(cuò)的練習(xí)?,F(xiàn)行教材的課后問(wèn)題設(shè)計(jì)的都比較的科學(xué)、合理,難度適合。通過(guò)口答、筆答等形式,很容易鞏固所學(xué)知識(shí)和了解到學(xué)生學(xué)習(xí)的情況。通常利用五分鐘左右完成,并且可以查缺補(bǔ)漏。
七、總結(jié)與提升
好的課堂教學(xué),不僅應(yīng)當(dāng)有引人入勝的導(dǎo)入,還應(yīng)有發(fā)人深思、余味無(wú)窮的結(jié)語(yǔ)。結(jié)課的功能表現(xiàn)在:
a.對(duì)教學(xué)內(nèi)容的梳理;
b.促進(jìn)知識(shí)的拓展,延伸和遷移,做好銜接和過(guò)渡;
c.激發(fā)學(xué)習(xí)熱情,鼓勵(lì)探索創(chuàng)新。
教學(xué)有法,教無(wú)定法。模式只是我們教學(xué)中參照、借鑒的依據(jù),不應(yīng)成為束縛我們教學(xué)的枷鎖。我們可以遵循模式但不惟模式,具體的情況靈活運(yùn)用。
在新課程理念下,上好一節(jié)課,應(yīng)努力做到:
1.落實(shí)教學(xué)的三維目標(biāo)。教學(xué)目標(biāo)是課堂教學(xué)的核心和靈魂,是課堂教學(xué)的根本出發(fā)點(diǎn)及歸宿。在備課與上課時(shí)不能只考慮“知識(shí)目標(biāo)”,眼中只有“知識(shí)點(diǎn)”,應(yīng)充分挖掘教學(xué)內(nèi)容中蘊(yùn)含的及教學(xué)過(guò)程中“生成”的情感態(tài)度和價(jià)值觀,并且要重“過(guò)程和方法”的設(shè)計(jì)。教學(xué)中做到目標(biāo)全面,三維目標(biāo)和諧統(tǒng)一。
2.注重教學(xué)內(nèi)容的生活性。好課在教學(xué)內(nèi)容的組織上下大功夫,要注意教學(xué)內(nèi)容貼近學(xué)生的實(shí)際生活,只有那些和學(xué)生實(shí)際生活緊密相連,使其產(chǎn)生迷惑、興趣、求解的問(wèn)題,才有可能促使學(xué)生打開(kāi)思路、積極思維,才能取得良好的教學(xué)效果。
3.體現(xiàn)知識(shí)的建構(gòu)性。知識(shí)是主體建構(gòu)的,如果沒(méi)有主體的主動(dòng)建構(gòu),是不可能傳遞給主體并被主體消化的。因此不能將知識(shí)機(jī)械的灌輸給學(xué)生,必須靠學(xué)生根據(jù)已有的知識(shí)和經(jīng)驗(yàn)主動(dòng)建構(gòu)。善于利用學(xué)生生活中已有的知識(shí)喚起學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性。
4.實(shí)現(xiàn)教學(xué)方法的多樣性。“自主、合作、探究”是新課標(biāo)大力提倡的學(xué)習(xí)方式,課堂教學(xué)理應(yīng)體現(xiàn)這種精神和原則。但不能教條的理解,要符合學(xué)科特點(diǎn)。語(yǔ)文課重在朗讀、欣賞、體悟,因此多采用情景法、感悟法、欣賞法。創(chuàng)設(shè)情景,引發(fā)思考,引導(dǎo)欣賞。
5.加強(qiáng)教學(xué)的互動(dòng)性。要想提高教學(xué)的有效性,教師要加強(qiáng)教學(xué)的互動(dòng)性。包括師生互動(dòng),生生互動(dòng),群體互動(dòng)。教師在加強(qiáng)互動(dòng)時(shí),應(yīng)注意在師生互動(dòng)中,教師的角色不能是權(quán)威,要平等的加入學(xué)生的交往中,當(dāng)然是平等中的首席;教師要建立多層次的互動(dòng),提高互動(dòng)的有效性。
6.重視教學(xué)過(guò)程的生成性。課程與教學(xué)應(yīng)考慮知識(shí)的不確定性,允許學(xué)生與教師在“互動(dòng)”與“對(duì)話”中對(duì)課程的“動(dòng)態(tài)生成”、“改造”,鼓勵(lì)個(gè)性化地賦予創(chuàng)造性地學(xué)習(xí),而不是把知識(shí)及其學(xué)習(xí)作為滿足預(yù)訂目標(biāo)的嘗試。把教學(xué)看成是一個(gè)活的、流動(dòng)的過(guò)程。
有人曾經(jīng)感言:“教學(xué)方式是水池,內(nèi)容則是水池中的水。多年來(lái)我們一直在研究水池應(yīng)該是挖成圓的還是挖成方的,卻偏偏很少考慮水池有多少水!水池是圓是方并不妨礙它成為水池。但沒(méi)有了水,任何形狀的池子都毫無(wú)意義。
【關(guān)鍵詞】 濱州
【關(guān)鍵詞】 梅毒;蒼白螺旋體;傳染病
梅毒是由蒼白螺旋體引起的慢性傳染病,主要通過(guò)胎盤及性接觸傳播。為了解濱州市獻(xiàn)血者梅毒感染流行狀況及對(duì)血液質(zhì)量的影響,筆者對(duì)2001―2004 年無(wú)償獻(xiàn)血的血液標(biāo)本進(jìn)行了梅毒檢測(cè)情況統(tǒng)計(jì)分析,報(bào)告如下。
1 材料與方法
11 標(biāo)本來(lái)源
2001―2004 年本市各單位、街頭無(wú)償獻(xiàn)血者的血液標(biāo)本共106 763 人份,其中男 60 218 份,女 46 545 份,年齡 18 ~ 55 歲。
12 方法
所有標(biāo)本均采用 RPR 及ELISA法(上海榮盛和北京金豪有限公司試劑盒)檢測(cè),嚴(yán)格按照試劑盒使用說(shuō)明書(shū)操作,以 ELISA 法檢測(cè)結(jié)果為判斷標(biāo)準(zhǔn)。
13 儀器
MK3 酶標(biāo)儀(韓國(guó)),TECAN 洗板機(jī)(奧地利)。
14 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用χ2檢驗(yàn)。
2 結(jié)果
21 對(duì)2001-2004年,查體合格的獻(xiàn)血者 106 763份進(jìn)行復(fù)檢,檢出梅毒陽(yáng)性者 304 份,見(jiàn)表 1。表 1 不同年份獻(xiàn)血者梅毒檢測(cè)陽(yáng)性比率(略)
22 不同性別獻(xiàn)血者梅毒檢測(cè)陽(yáng)性率 男性感染率為033%(196/60 218),顯著高于女性的023%(108/46 545),χ2=807,P<001。
3 討論
濱州市的梅毒感染比率正逐年增高,2004 年比2001 年增長(zhǎng) 292%,但從國(guó)內(nèi)近幾年發(fā)表的有關(guān)梅毒流行狀況的報(bào)道看,本市自然人群感染率在全國(guó)居中等以下水平。分析增高的原因:①隨著改革開(kāi)放,外來(lái)人員、流動(dòng)人員多,人員復(fù)雜,有梅毒感染高危行為的人群增多,使自然人群的梅毒感染率逐年增高。②因梅毒疾病的特殊性,獻(xiàn)血者確知自己感染梅毒的高危行為,卻可能礙于面子而隱瞞其行為史或迫于家庭、同事、朋友、單位等壓力或出于為獲得獻(xiàn)血后好處的動(dòng)機(jī)而獻(xiàn)血,致使可能感染梅毒的獻(xiàn)血者增多。