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對(duì)蝦養(yǎng)殖是海水養(yǎng)殖的一大產(chǎn)業(yè),人工培育苗種是該產(chǎn)業(yè)的主要環(huán)節(jié)。長(zhǎng)期以來(lái)人工育苗所需親蝦主要采捕于自然海區(qū),由于對(duì)蝦具有獨(dú)特的生殖系統(tǒng)和生殖行為,雄蝦在雌蝦產(chǎn)卵前就已將精莢輸入雌蝦交接器內(nèi),在其產(chǎn)卵時(shí)釋放出精子。因此,為了提高親蝦使用率和解決親蝦運(yùn)輸受傷或脫殼引起的受精困難問(wèn)題,臺(tái)灣的林明男、丁云源等及國(guó)內(nèi)有關(guān)單位開(kāi)展對(duì)蝦精莢移植技術(shù)研究,并將移植技術(shù)運(yùn)用于對(duì)蝦雜交育種方面。本文就對(duì)蝦人工移植精莢技術(shù)在對(duì)蝦育苗生產(chǎn)中應(yīng)用進(jìn)行試驗(yàn),使有限親蝦資源得到充分利用和保護(hù),從而降低育苗成本、提高孵化率,達(dá)到增產(chǎn)目的?,F(xiàn)就試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告于下。
一、材料與方法
1.試驗(yàn)材料:斑節(jié)對(duì)蝦(Penaeusmonodon)由馬來(lái)西亞海區(qū)采捕進(jìn)口(體長(zhǎng)16.3cm~24.9cm,體重70.0g~158.0g)。長(zhǎng)毛對(duì)蝦(P.penicillatus)購(gòu)自廈門海域采捕(體長(zhǎng)13.1cm~15.7cm,體重27.6g~41.2g)。2.試驗(yàn)池條件:全為室內(nèi)水泥池,規(guī)格分別為2.5m×4.0m×1.2m、3.0m×10.0m×1.9m、4.5m×6.0m×1.9m。水源均為運(yùn)水船從外海運(yùn)入,經(jīng)沉淀、過(guò)濾、消毒后的育苗水。3.雄蝦促排方法:采用夾取法、擠壓法和虹吸法。夾取法:用眼科鑷子輕輕插入雄親蝦第五步足基部的生殖孔,自然張開(kāi)夾取精莢。為防止操作時(shí)因雄蝦跳動(dòng)受傷或離水過(guò)久死亡,夾取精莢時(shí)雄蝦用濕毛巾包裹,僅留出夾取部位。擠壓法:用大拇指及食指擠壓雄親蝦第五步足基部,使精莢自生殖孔排出。虹吸法:采用注射器或吸管,從第五步足基部生殖孔插入將精莢吸出。4.精莢移植方法:由單人操作,將準(zhǔn)備移植精莢的雌親蝦放入手術(shù)用的充氣海水塑料盆內(nèi),用濕毛巾把雌親蝦包住,在毛巾缺口處留出納精囊位置,左手握蝦掌心向上,拇指、食指輕輕夾住頭胸甲,后三指握住腹部,使蝦無(wú)法弓起彈跳,并將頭胸甲呈傾斜狀置于盆內(nèi)充氣海水中。右手持彎頭眼科鑷子,夾取消毒脫脂棉將納精囊表面的海水吸干,用加工過(guò)10cm呈“八字形”彎曲眼科鑷子從納精囊中間Y縫線插入,放手讓鑷子自然張開(kāi)倒向尾部,再用另一彎頭眼科鑷子夾取已處理的精莢放入囊腔內(nèi),后用左手拇指輕按納精囊取出擴(kuò)張用鑷子,檢查精莢已放置好不會(huì)掉出,揭開(kāi)毛巾將雌蝦放入池內(nèi)。
二、結(jié)果
1.人工移植精莢技術(shù)在對(duì)蝦育苗生產(chǎn)中應(yīng)用試驗(yàn)于每年3月至5月進(jìn)行,其結(jié)果見(jiàn)表1、表2。試驗(yàn)結(jié)果表明,斑節(jié)對(duì)蝦個(gè)體大殼較厚,實(shí)施人工移植精莢手術(shù)時(shí)間以脫殼后12小時(shí)~24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行最佳,效果最好,成功率最高。脫殼后10小時(shí)內(nèi)實(shí)施移植精莢手術(shù),因蝦殼偏軟,會(huì)劃傷納精囊和傷及親蝦,術(shù)后親蝦體質(zhì)恢復(fù)較慢,也容易引起死亡和褐變。如果脫殼后超過(guò)26小時(shí),蝦殼變硬,納精囊失去彈性,此時(shí)實(shí)施移植精莢手術(shù)困難,難以獲得理想的手術(shù)效果。通過(guò)對(duì)人工移植精莢后雌親蝦促熟觀察,一般經(jīng)4天~5天精養(yǎng)卵巢可發(fā)育成熟再次產(chǎn)卵。表2結(jié)果顯示,經(jīng)人工移植精莢的雌親蝦與未脫殼再產(chǎn)雌蝦比較,幼體在變態(tài)發(fā)育等方面與正常苗生長(zhǎng)無(wú)明顯差別。表3、表4列出長(zhǎng)毛對(duì)蝦雌親蝦實(shí)施人工移植精莢試驗(yàn)結(jié)果。表3數(shù)據(jù)顯示長(zhǎng)毛對(duì)蝦雌親蝦在脫殼后36小時(shí)~72小時(shí)內(nèi)實(shí)施移植精莢手術(shù)效果最好,可獲得較高成功率。而在脫殼后24小時(shí)以內(nèi)實(shí)施移植精莢手術(shù),不但難以獲得滿意效果,同時(shí)死亡率也較高。說(shuō)明長(zhǎng)毛對(duì)蝦殼薄,剛脫殼后不久蝦體虛弱,如馬上實(shí)施移植精莢手術(shù),不但成功率較低(10%~12.5%),還易引起親蝦死亡。表4數(shù)據(jù)顯示長(zhǎng)毛對(duì)蝦雌親蝦人工移植精莢個(gè)數(shù)變化對(duì)孵化率有一定影響。長(zhǎng)毛對(duì)蝦雌親蝦實(shí)施移植精莢后,在人工促熟精養(yǎng)期間其瓣?duì)铙w需6天~7天才萎縮成豆?fàn)蠲撀?,比自然交配的雌親蝦瓣?duì)铙w脫落時(shí)間遲1天~2天。此外,雌親蝦術(shù)后恢復(fù)需經(jīng)8天~9天精養(yǎng)性腺才能達(dá)到成熟產(chǎn)卵。2.雄蝦精莢促排結(jié)果雄蝦促排試驗(yàn)使用59尾親蝦,其中夾取組27尾,試驗(yàn)后雄親蝦存活22尾,擠壓組32尾,試驗(yàn)后雄性親蝦存活8尾,可見(jiàn)夾取法的成活率高于擠壓法(見(jiàn)表5)。表5的數(shù)據(jù)表明,經(jīng)過(guò)夾取法促排后,雄性親蝦再次成熟率分別為93.3%和66.7%,而擠壓法雄性親蝦再次成熟率為零。說(shuō)明雄性親蝦精莢促排方法以?shī)A取法為最佳,其次為擠壓法。因斑節(jié)對(duì)蝦殼厚,采用擠壓法不易獲得精莢,還會(huì)因操作不當(dāng)導(dǎo)致雄性親蝦受傷死亡。同樣,長(zhǎng)毛對(duì)蝦殼薄,只要雄親蝦精莢成熟度好,采用擠壓法雖可獲得完整精莢,但往往因擠壓時(shí)力度掌握不當(dāng),引起雄性親蝦損傷,甚至死亡。虹吸法促排,在操作上需兩人配合才能進(jìn)行,且難以獲得完整精莢。斑節(jié)對(duì)蝦的精莢呈三角形、較大,如用吸管或注射器吸取,往往僅將精莢乳白色物體吸出,無(wú)法吸出完整的精莢。而長(zhǎng)毛對(duì)蝦的精莢呈細(xì)長(zhǎng)條狀,精莢膜很薄,容易被吸破。
三、討論
1.從試驗(yàn)觀察到斑節(jié)對(duì)蝦和長(zhǎng)毛對(duì)蝦在室內(nèi)全暗環(huán)境里脫殼次數(shù)多、脫殼間距時(shí)間短,與曾文陽(yáng)所報(bào)道相同。其次,斑節(jié)對(duì)蝦與長(zhǎng)毛對(duì)蝦在全暗環(huán)境下的自然交配率為零,這一現(xiàn)象與林明男、洪德仁等所指出一致??梢?jiàn)在生產(chǎn)中盡管使用大量雄性親蝦,但在室內(nèi)全暗的促熟池里仍無(wú)法獲得自然交配雌蝦的原因。2.人工實(shí)施移植精莢是育苗生產(chǎn)在短時(shí)間內(nèi)獲得可使用雌親蝦的有效途徑。在實(shí)施移植手術(shù)過(guò)程觀察到精莢植入納精囊后,雌親蝦會(huì)自行分泌黏液將納精囊閉合,沒(méi)有植入精莢的雌親蝦則無(wú)黏液分泌,該現(xiàn)象與林明男的描述是一致的。但是,不論是斑節(jié)對(duì)蝦或是長(zhǎng)毛對(duì)蝦,一旦納精囊變硬后再植入精莢,沒(méi)有觀察到黏液分泌,納精囊也無(wú)法正常閉合。因此,分泌黏液閉合納精囊是否與雌蝦甲殼變硬有關(guān),值得進(jìn)一步探討。3.在生產(chǎn)試驗(yàn)中還觀察到,瓣?duì)铙w與精莢一起移植后,留在體外的瓣?duì)铙w有被雌蝦攝食的現(xiàn)象,尤其在精養(yǎng)促熟中這種情況最明顯。術(shù)后親蝦側(cè)臥池底或網(wǎng)箱內(nèi),用步足將瓣?duì)铙w送入口中吃掉,使剛植入的精莢被拉出納精囊失落水中,出現(xiàn)這種情況是否與餌料或其他刺激有關(guān),尚需作進(jìn)一步觀察。4.對(duì)實(shí)施移植精莢后雌蝦產(chǎn)卵孵化率觀察,結(jié)果與林明男、張子平等的觀察基本一致。鑒于斑節(jié)對(duì)蝦移植精莢后直接放入生產(chǎn)性大池(27m2)產(chǎn)卵,產(chǎn)卵量和孵化率采樣計(jì)算有難度,因此,采取計(jì)算無(wú)節(jié)幼體數(shù)量方式進(jìn)行比較。從實(shí)施移植精莢組孵化幼體生長(zhǎng)觀察看,其變態(tài)、生長(zhǎng)與未脫殼再產(chǎn)卵組孵化的幼體并無(wú)差別,成活率也達(dá)50%以上??梢?jiàn),采用人工移植精莢后對(duì)雌蝦產(chǎn)卵孵化幼體的生長(zhǎng)沒(méi)有異常影響。5.在雄性親蝦促排試驗(yàn)中,精莢一般是同步成熟,成雙釋放。尤其是精莢囊飽滿、第五步足基部明顯發(fā)白的雄性親蝦,促排時(shí)雙側(cè)釋放最明顯。同時(shí),一次促排僅能獲得兩個(gè)精莢,促排后雄性親蝦在恢復(fù)至再成熟期間,不能促排成型的精莢,只能排出或夾取出粘狀物,此現(xiàn)象與張子平所報(bào)道相同。6.經(jīng)過(guò)反復(fù)比較試驗(yàn),認(rèn)為生產(chǎn)中以采用夾取法獲取精莢方法為主。因?yàn)?,夾取法獲取精莢,偶爾會(huì)因操作不當(dāng)造成機(jī)械傷害,但經(jīng)過(guò)一段時(shí)間精養(yǎng),雄性親蝦還可促熟再用。而擠壓法獲取精莢,常因用力不當(dāng),造成雄性親蝦鰓部或心臟不可恢復(fù)損傷、引起死亡,即使沒(méi)有死亡,雄性親蝦體質(zhì)恢復(fù)慢,難于在短期內(nèi)再次成熟促排。所以,在育苗生產(chǎn)獲取精莢方法以?shī)A取法獲取精莢簡(jiǎn)便易行,比較容易被生產(chǎn)者所接受。