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隨著社會的發(fā)展和進(jìn)步,人們的生活水平和生活質(zhì)量都得到了很大的改善,因此,對醫(yī)學(xué)的發(fā)展也提高了關(guān)注。目前,醫(yī)學(xué)教學(xué)觀念和教學(xué)模式都發(fā)生了很大的轉(zhuǎn)變,學(xué)校也開始了對高素質(zhì)人才的有效培養(yǎng)和教學(xué),其中,虛擬仿真技術(shù)是醫(yī)學(xué)教學(xué)中的重要手段和方式,對傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)提出了很大的改進(jìn)。虛擬仿真技術(shù)對推動醫(yī)學(xué)教學(xué)改革、創(chuàng)新教學(xué)模式和培養(yǎng)學(xué)生的綜合技能都有著重要的作用和影響。本文主要介紹了虛擬仿真技術(shù)的概念,并分析了虛擬仿真技術(shù)在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的具體應(yīng)用。
關(guān)鍵詞:
虛擬仿真技術(shù);醫(yī)學(xué);實(shí)驗(yàn)教學(xué)
隨著科學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方面出現(xiàn)了許多的新技術(shù)和應(yīng)用,對醫(yī)學(xué)教學(xué)產(chǎn)生了很大的影響。其中虛擬仿真技術(shù)是目前比較先進(jìn)的技術(shù)應(yīng)用,且獲得了廣泛的應(yīng)用和發(fā)展,特別是對計(jì)算機(jī)技術(shù)和多媒體技術(shù)的應(yīng)用,提高了醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)質(zhì)量,創(chuàng)新了醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的模式。虛擬實(shí)驗(yàn)教學(xué)是一種在計(jì)算機(jī)技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的情景模擬技術(shù),能夠讓用戶體驗(yàn)到一種身臨其境的感覺,實(shí)現(xiàn)和具體的情景接觸,產(chǎn)生一定的體驗(yàn),為實(shí)際的操作提供一定的基礎(chǔ)。
1虛擬仿真技術(shù)的概述
虛擬仿真技術(shù)是在計(jì)算機(jī)技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新興的科學(xué)技術(shù),是指利用多媒體技術(shù)的結(jié)合,創(chuàng)造形成一個有視覺、聽覺和觸覺的虛擬現(xiàn)實(shí)環(huán)境,讓用戶體驗(yàn)到一種身臨其境的感覺。在這個虛擬的環(huán)境中,用戶能夠感受到空間中客體的存在,也可以和虛擬空間中的客體進(jìn)行相關(guān)的互動,這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用,主要是加快用戶對相關(guān)知識的認(rèn)識效率。虛擬仿真技術(shù)涉及的方面比較多,主要包括計(jì)算機(jī)技術(shù)、多媒體技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)和人工智能技術(shù)等,另外,還有計(jì)算機(jī)的圖像處理和模式的識別等,是現(xiàn)代仿真技術(shù)的有效發(fā)展和外延[1]。虛擬仿真技術(shù)的主要特點(diǎn)就是,讓用戶獲得真實(shí)的體驗(yàn),和虛構(gòu)的客體進(jìn)行交互,并產(chǎn)生一定的想象。在虛擬的空間中,實(shí)驗(yàn)人員可以進(jìn)行和現(xiàn)實(shí)世界中同樣的活動和實(shí)驗(yàn),而且受到的外界影響因素比較小,實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的效果也更好一些。特別是在醫(yī)學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用,能夠有效的提高學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力,因此,虛擬仿真技術(shù)的應(yīng)用具有重要的意義。
2虛擬仿真技術(shù)在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用
虛擬仿真技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用對醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)產(chǎn)生了很大的影響,特別是對傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方式和實(shí)驗(yàn)?zāi)J竭M(jìn)行了很大的改進(jìn)。傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,缺少實(shí)驗(yàn)的設(shè)備和實(shí)驗(yàn)的客體,學(xué)生的實(shí)際操作能力得不到有效的鍛煉,所以,對學(xué)生的學(xué)習(xí)和操作能力培養(yǎng)不到位[2]。虛擬仿真技術(shù)的應(yīng)用為學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作提供了一定的基礎(chǔ),也實(shí)現(xiàn)了對學(xué)生的有效培養(yǎng)。目前虛擬仿真技術(shù)在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下四個方面。
2.1虛擬仿真技術(shù)改善了醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)備在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,對設(shè)備的要求比較高,主要包括一些實(shí)驗(yàn)用的動物或者尸體、實(shí)驗(yàn)用到的儀器和設(shè)備以及相關(guān)的實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)等,都對實(shí)驗(yàn)教學(xué)的有效進(jìn)行產(chǎn)生了一定的影響。隨著社會的發(fā)展,解剖學(xué)在目前獲得了很大的發(fā)展,也是醫(yī)學(xué)教學(xué)中最基礎(chǔ)和最重要的課程,所以,一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)備在教學(xué)中是非常關(guān)鍵的,對教學(xué)的有效性影響也很大。目前,虛擬仿真技術(shù)的廣泛應(yīng)用和發(fā)展,很好的解決了醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的這些問題,不但豐富了實(shí)驗(yàn)教學(xué)設(shè)備,學(xué)生可以利用虛擬的“尸體”進(jìn)行操作和實(shí)踐,也很好的鍛煉了學(xué)生的實(shí)踐動手操作能力。
2.2虛擬仿真技術(shù)能夠提高學(xué)生的興趣虛擬仿真技術(shù)能夠?yàn)閷W(xué)生提供相關(guān)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境,創(chuàng)造一定的基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)條件,同時,還能夠?qū)崿F(xiàn)學(xué)生在虛擬的空間環(huán)境中和客體進(jìn)行有效的交流,提高學(xué)生對相關(guān)內(nèi)容的認(rèn)識和理解。虛擬仿真技術(shù)在醫(yī)學(xué)試驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用,能夠?qū)⒙曇簟D像和相關(guān)的多媒體演示功能進(jìn)行結(jié)合,豐富實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程和教學(xué)內(nèi)容,充分的提高了學(xué)生的興趣[3]。同時,將具體的教學(xué)內(nèi)容變得形象和生動,而且有一定的視覺沖擊力,方便了學(xué)生的理解和掌握,因此,提高了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的效率和質(zhì)量。比如,在進(jìn)行細(xì)胞膜的教學(xué)時,可以利用虛擬仿真技術(shù)建立細(xì)胞結(jié)構(gòu),動態(tài)化的展示,可以讓學(xué)生更好的觀察和學(xué)習(xí)。
2.3虛擬仿真技術(shù)突破了時間和空間上的限制虛擬仿真技術(shù)的應(yīng)用,對傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)產(chǎn)生了很大改變,打破了時間和空間上的限制,學(xué)生可以通過虛擬仿真技術(shù)對動物的內(nèi)部結(jié)構(gòu)進(jìn)行有效的觀察,以及實(shí)現(xiàn)動態(tài)化的觀察[4]。比如要了解一些藥物的成分和產(chǎn)生的身體反應(yīng),在傳統(tǒng)的教學(xué)中,通過一定的講述過程是無法實(shí)現(xiàn)有效教學(xué)的,學(xué)生也難以理解。因此,虛擬仿真技術(shù)的應(yīng)用,實(shí)現(xiàn)了這些過程的快速進(jìn)行和變化,同時,將這些反應(yīng)過程和變化情況能夠清晰的表現(xiàn)出來,幫助學(xué)生進(jìn)行學(xué)習(xí)和理解。
2.4虛擬仿真技術(shù)避免了在具體實(shí)驗(yàn)中的危險情況醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)過程存在一定的危險性,會對人體的健康產(chǎn)生一定的危害,比如一些感染性的疾病等。所以,隨著虛擬仿真技術(shù)在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用,避免了學(xué)生和實(shí)驗(yàn)對象的直接接觸,而是通過虛擬的方式產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)的客體,所以,不需要考慮實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生一些危險性的因素,因此,對相關(guān)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行有很大的幫助。除此之外,虛擬仿真技術(shù)也很好的幫助學(xué)生積累了臨床經(jīng)驗(yàn),有效的鍛煉了學(xué)生的實(shí)際操作能力,有利于學(xué)生的綜合水平提高和發(fā)展。
3結(jié)語
隨著虛擬仿真技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,改善了醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué),虛擬仿真技術(shù)的應(yīng)用,加深了學(xué)生對于醫(yī)學(xué)知識的認(rèn)識和理解,提高了醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量和效率。另外,虛擬仿真技術(shù)打破了時間和空間上的限制,完善了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的設(shè)備,并有效的避免了在試驗(yàn)中的不安全因素,對醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)具有重要的意義。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞:高中數(shù)學(xué);學(xué)習(xí)方法;探究
中圖分類號:G633.6文獻(xiàn)標(biāo)識碼:B文章編號:1672-1578(2013)04-0190-01
1.導(dǎo)致學(xué)生數(shù)學(xué)成績差的原因
1.1被動學(xué)習(xí)。許多同學(xué)進(jìn)入高中后,還像初中那樣,有很強(qiáng)的依賴心理,跟隨老師慣性運(yùn)轉(zhuǎn),沒有掌握學(xué)習(xí)主動權(quán)。表現(xiàn)在不定計(jì)劃,坐等上課,課前沒有 預(yù)習(xí),對老師要上課的內(nèi)容不了解,上課忙于記筆記,沒聽到"門道",沒有真正理解所學(xué)內(nèi)容。
1.2學(xué)不得法。老師上課一般都要講清知識的來龍去脈,剖析概念的內(nèi)涵,分析重點(diǎn)難點(diǎn),突出思想方法。而一部分同學(xué)上課沒能專心聽課,對要點(diǎn)沒聽到或聽不全,筆記記了一大本,問題也有一大堆,課后又不能及時鞏固、總結(jié)、尋找知識間的聯(lián)系,只是趕做作業(yè),亂套題型,對概念、法則、公式、定理一知半解,機(jī)械模仿,死記硬背.也有的晚上加班加點(diǎn),白天無精打采,或是上課根本不聽,自己另搞一套,結(jié)果是事倍功半,收 效甚微。
1.3不重視基礎(chǔ)。一些"自我感覺良好"的同學(xué),常輕視基本知識、基本技能和基本方法的學(xué)習(xí)與訓(xùn)練,經(jīng)常是知道怎么做就算了,而不去 認(rèn)真演算書寫,但對難題很感興趣,以顯示自己的"水平",好高鶩遠(yuǎn),重"量"輕"質(zhì)",陷入題海,到正規(guī)作業(yè)或考試中不是演算出錯就是中途"卡殼"。
1.4進(jìn)一步學(xué)習(xí)條件不具備。高中數(shù)學(xué)與初中數(shù)學(xué)相比,知識的深度、廣度,能力要求都是一次飛躍。這就要求必須掌握基礎(chǔ)知識與技能為進(jìn)一步學(xué)習(xí)作好準(zhǔn)備。高中數(shù)學(xué)很多地方難度大、方法新、分析能力要求高。如二次函數(shù)在閉區(qū)間上的最值問題,函數(shù)值域的求法,實(shí)根分布與參變量方程,三角公式的變形與靈活運(yùn)用,空間概念的形成,排列組合應(yīng)用題及實(shí)際應(yīng)用問題等??陀^上這些觀點(diǎn)就是分化點(diǎn),有的內(nèi)容還是高初中教材都不講的脫節(jié)內(nèi)容,如不采取補(bǔ)救措施,查缺補(bǔ)漏,分化是不可避免的。
2.解決方法
2.1研究學(xué)科特點(diǎn),尋找最佳學(xué)習(xí)方法。數(shù)學(xué)學(xué)科擔(dān)負(fù)著培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)算能力、邏輯思維能力、空間想象能力,以及運(yùn)用所學(xué)知識分析問題、解決問題的能力的重任.它的特點(diǎn)是具有高度的抽象性、邏輯性和廣泛的適用性,對能力要求較高.學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)一定要講究"活",只看書不做題不行,埋頭做題不總結(jié)積累不行,對課本知識既要能鉆進(jìn)去,又要能跳出來,結(jié)合自身特點(diǎn),尋找最佳學(xué)習(xí)方法.華羅庚先生倡導(dǎo)的"由薄到厚"和"由厚到薄"的學(xué)習(xí)過程就是這個道理.方法因人而異,但學(xué)習(xí)的四個環(huán)節(jié)(預(yù)習(xí)、上課、整理、作業(yè))和一個步驟(復(fù)結(jié))是少不了的。
2.2加強(qiáng)輔導(dǎo),化解分化點(diǎn)。如前所述高中數(shù)學(xué)中易分化的地方多,這些地方一般都有方法新、難度大、靈活性強(qiáng)等特點(diǎn).對易分化的地方教師應(yīng)當(dāng)采取多次反復(fù),加強(qiáng)輔導(dǎo),開辟專題講座,指導(dǎo)閱讀參考書等方法,將出現(xiàn)的錯誤提出來讓學(xué)生議一議,充分展示他們的思維過程,通過變式練習(xí),提高他們的鑒賞能力,以達(dá)到靈活掌握知識、運(yùn)用知識的目的。
2.3循序漸進(jìn),防止急躁。由于學(xué)生年齡較小,閱歷有限,為數(shù)不少的高中學(xué)生容易急躁,有的同學(xué)貪多求快,囫圇吞棗,有的同學(xué)想靠幾天"沖刺"一蹴而就,有的取得一點(diǎn)成績便洋洋自得,遇到挫折又一蹶不振.針對這些情況,教師要讓學(xué)生懂得學(xué)習(xí)是一個長期的鞏固舊知識、發(fā)現(xiàn)新知識的積累過程,決非一朝一夕可以完成,為什么高中要上三年而不是三天!許多優(yōu)秀的同學(xué)能取得好成績,其中一個重要原因是他們的基本功扎實(shí),他們的閱讀、書寫、運(yùn)算技能達(dá)到了自動化或半自動化的熟練程度。
2.4研究學(xué)科特點(diǎn),尋找最佳學(xué)習(xí)方法。數(shù)學(xué)學(xué)科擔(dān)負(fù)著培養(yǎng)學(xué)生運(yùn)算能力、邏輯思維能力、空間想象能力,以及運(yùn)用所學(xué)知識分析問題、解決問題的能力的重任.它的特點(diǎn)是具有高度的抽象性、邏輯性和廣泛的適用性,對能力要求較高.學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)一定要講究"活",只看書不做題不行,埋頭做題不總結(jié)積累不行,對課本知識既要能鉆進(jìn)去,又要能跳出來,結(jié)合自身特點(diǎn),尋找最佳學(xué)習(xí)方法.華羅庚先生倡導(dǎo)的"由薄到厚"和"由厚到薄"的學(xué)習(xí)過程就是這個道理.方法因人而異,但學(xué)習(xí)的四個環(huán)節(jié)(預(yù)習(xí)、上課、整理、作業(yè))和一個步驟(復(fù)結(jié))是少不了的。
[摘要]目的:觀察益氣、活血方藥對老年大鼠肝臟衰老相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法:以自然衰老大鼠為衰老模型,采用RTPCR、Western blotting法研究益氣、活血方藥對老年大鼠肝臟p16、p21、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、cyclin D1和cyclin E mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:老年大鼠肝臟p16、p21、cyclin D1 mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達(dá)增加;PCNA、cyclin E mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白的表達(dá)降低。與老年大鼠比較,益氣、活血方藥可下調(diào)老年大鼠肝臟cyclin D1 mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá),上調(diào)促進(jìn)增殖基因cyclin E mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá),但對p16、p21和PCNA的調(diào)節(jié)作用不明顯。結(jié)論:益氣、活血方藥主要通過調(diào)控cyclin D1和cyclin E mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞增殖。
[關(guān)鍵詞]衰老大鼠; 肝細(xì)胞; p16; p21; 增殖細(xì)胞核抗原; cyclin D1; cyclin E; 益氣方; 活血方
Effects of recipes for replenishing qi and activating blood on senescence related gene expressions in the liver of aging rats
ABSTRACT Objective: To observe the effects of recipes for replenishing qi and activating blood on p16, p21, proliferating cell nuclear antigen (PCNA), cyclin D1 and cyclin E gene expressions in the liver of aging rats. Methods: A recipe for replenishing qi and a recipe for activating blood were administered to aging rats respectively, and the effects of the above recipes on the expressions of senescence related genes (p16, p21, PCNA, cyclin D1 and cyclin E) were examined by RTPCR and Western blotting methods. Results: The expressions of p16, p21 and cyclin D1 mRNAs and proteins in the liver of the untreated aging rats were upregulated, while the expressions of PCNA and cyclin E mRNAs and proteins decreased. As compared with the untreated aging rats, both recipes could downregulate the expressions of cyclin D1 mRNA and protein and upregulate the expressions of cyclin E mRNA and protein, but had no obvious effects on the expressions of mRNAs and proteins of p16, p21 and PCNA. Conclusion: Recipes for replenishing qi and activating blood can improve the liver cell proliferation of aging rats via downregulating the expressions of cyclin D1 mRNA and protein and upregulating the expressions of cyclin E mRNA and protein.
KEY WORDS aging rats; hepatocytes; p16; p21; proliferating cell nuclear antigen; cyclin D1; cyclin E; qibenefiting recipe; bloodactivating recipe
隨著細(xì)胞及分子生物學(xué)的發(fā)展,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一些與細(xì)胞衰老密切相關(guān)的基因及轉(zhuǎn)錄因子(反式作用因子)[1~3]??v觀歷代中醫(yī)文獻(xiàn),延緩衰老的方藥基本屬于補(bǔ)腎、健脾、益氣和活血范疇。近代研究顯示:上述四類方藥均有不同程度抗自由基、調(diào)節(jié)免疫功能、提高肝臟蛋白質(zhì)含量、改善肝臟超微結(jié)構(gòu)等延緩衰老的作用[4]。實(shí)驗(yàn)研究還表明:補(bǔ)腎方藥能促進(jìn)老年大鼠肝臟cHras、cmyc、cfos、cjun mRNA的表達(dá),下調(diào)p53 mRNA的表達(dá)[5]。本實(shí)驗(yàn)從細(xì)胞增殖調(diào)控角度,根據(jù)中醫(yī)理論,從益氣活血的抗衰經(jīng)典方中分別選擇幾味有代表性的中藥組成小復(fù)方,以自然衰老大鼠為衰老模型,應(yīng)用RTPCR和Western blotting法研究益氣、活血方藥對老年大鼠肝臟衰老相關(guān)基因p16、p21、cyclin D1、增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和cyclin E表達(dá)的影響。
1材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)中藥 益氣方選用黨參、黃芪、炙甘草(取自《時氏醫(yī)道》保元湯),活血方選用川芎、當(dāng)歸、赤芍(取自經(jīng)方四物湯)。中藥制劑采用水提醇沉法制備后,分裝于消毒好的塑料瓶中,于-20 ℃保存。
1.2實(shí)驗(yàn)動物 SD雄性大鼠(上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供)24只,分成青年對照組(5月齡)、老年對照組(22月齡)、老年益氣組(22月齡)和老年活血組(22月齡)。老年益氣組和活血組的用藥劑量為臨床成人劑量的20倍(按每千克體質(zhì)量的用藥量進(jìn)行換算),采用飲料方式給藥,每周服藥5 d,停藥2 d,自18~22月齡連續(xù)給藥4個月。
1.3RTPCR 肝組織細(xì)胞總的RNA按Trizol一步法提取,具體步驟按試劑說明書操作。βactin PCR引物[6]:5’CCAGCCATGTACGTTGCTATCCAG 3’,5’GGAACCGCTCATTGCCAATGGTGA 3’,擴(kuò)增片段為378 bp;p16 PCR引物:5’ATGGAGTCCTCTGCAGATAG 3’,5’TTAG CGCTGCTTTGGGGGTT 3’,擴(kuò)增片段為480 bp;p21PCR引物:5’ATGTCCGATCCTGGTGATGT3’,5’GGGCTTTCTCTTGCAGAAGA 3’,擴(kuò)增片段為495 bp;cyclin D1 PCR引物:5’ATGGAACACCAGCTCCTGTG 3’,5’TGGTGTTCCATGTCGGTGG 3’,擴(kuò)增片段為888 bp;PCNA PCR引物:5’ATGTTTGAGGCACGCCTGAT3’,5’AGATCCTTCTTCATCTTCGA 3’,擴(kuò)增片段為786 bp;cyclin E PCR引物:5’AAAGAAGAAGGTGGTTCCGA 3’,5’TCATTCTGTCTCCT GCTCAC 3’,擴(kuò)增片段為1 191 bp。PCR擴(kuò)增反應(yīng)總體積為50 μl。擴(kuò)增程序?yàn)椋?5 ℃(30 s) [變性94 ℃(30 s)退火55 ℃(30 s)延伸72 ℃ (30 s)]×30個循環(huán)72 ℃ (7 min)4 ℃貯存。根據(jù)目的片段的長短及引物的Tm值設(shè)置退火溫度及延伸時間。PCR產(chǎn)物鑒定電泳,紫外燈下觀察,圖像分析系統(tǒng)掃描。
1.4Western Blotting 采用放射免疫沉淀測定法(radioimmunoprecipitation assay, RIPA)[7]。取肝臟組織100 mg加入單去污細(xì)胞裂解液900 μl,冰浴中勻漿。勻漿后立即加入100 μl蛋白酶抑制劑苯甲基磺酰氟液(phenylmethylsulphonyl fluoride, PMSF)和40 μl混合蛋白酶抑制complete液(complete EDTAfree protease inhibitor cocktail tablet, 1片加1 ml水),4 ℃ 10 000 r/min離心10 min,取上清液于-70 ℃冷凍保存。24 h后10 000 r/min離心10 min,取上清液分裝,-70 ℃冷凍保存。Lowry (FolinCiocalteau)法[8]測定蛋白含量。各組蛋白各取30 μg,采用十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecylsulfatepolyacrylamide gel electrophoresis, SDSPAGE)和免疫印跡反應(yīng),用Supersignal ECL發(fā)光劑熒光顯色X光膠片曝光,觀察蛋白條帶。
1.5圖像處理及統(tǒng)計(jì)分析 RTPCR、Westernblotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別采用Leica Q500IW和上海復(fù)日Smartview 2001生物電泳圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用方差分析及q檢驗(yàn)。
2結(jié)果
2.1益氣、活血方藥對大鼠肝臟衰老相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響與青年組比較,老年大鼠肝臟p16、p21、cyclin D1基因mRNA的表達(dá)明顯上調(diào)(P
2.2益氣、活血方藥對大鼠肝臟衰老相關(guān)基因蛋白表達(dá)的影響與青年組比較,老年大鼠肝臟p16、p21、cyclin D1基因蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P
圖1 p16和p21瓊脂糖凝膠電泳(略)
Fig 1 Agarose gel electrophoresis of p16 and p21
M: Marker; 1:Young control group; 2: Untreated group; 3: Qibenefiting recipetreated group; 4: Bloodactivating recipe treated group
圖2 cyclin D1、PCNA和cyclin E瓊脂糖凝膠電泳(略)
Fig 2 Agarose gel electrophoresis of cyclin D1, PCNA and cyclin E
M: Marker; 1: Young control group; 2: Untreated group; 3: Qibenefiting recipetreated group; 4: Bloodactivating recipetreated group
表1 益氣、活血方藥對大鼠肝臟衰老相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響(目的基因/βactin)(略)
Tab 1 Effects of qibenefiting and bloodactivating recipes on mRNA expressions of p16, p21, PCNA, cyclin D1 and
cyclin E genes in the liver of rats (target gene/βactin)
*P
表2 益氣、活血方藥對大鼠肝臟衰老相關(guān)基因蛋白表達(dá)的影響(目的基因/βactin)(略)
Tab 2 Effects of qibenefiting and bloodactivating recipes on protein expressions of p16,p21,PCNA,cyclin D1 and
cyclin E genes in the liver of rats (target gene/βactin)
**P
圖3 p16、p21、PCNA、cyclin D1和cyclin E蛋白印跡雜交結(jié)果(略)
Fig 3 Western blotting results of p16, p21, PCNA, cyclin D1 and cyclin E genes
1:Young control group; 2: Untreated group; 3: Qibenefiting recipetreated group; 4: Bloodactivating recipetreated group
3討論
衰老是生物體在其生命的后期階段所出現(xiàn)的進(jìn)行性、全身性、內(nèi)在性,由多因素共同作用的循序漸進(jìn)的退化過程。近年來從基因水平研究衰老過程已成為衰老機(jī)制研究中的熱點(diǎn)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn):有些細(xì)胞增殖調(diào)控相關(guān)基因,主要是原癌基因、抑癌基因及端粒酶調(diào)控相關(guān)基因等,在年輕和衰老細(xì)胞中的表達(dá)明顯不同。原癌基因是一組參與細(xì)胞增殖和生長調(diào)控的基因。細(xì)胞衰老時,多數(shù)原癌基因的表達(dá)水平降低,少數(shù)升高。由于原癌基因表達(dá)產(chǎn)物大多是信號傳導(dǎo)途徑或細(xì)胞周期蛋白相關(guān)成員,它們的表達(dá)水平降低或活性減弱,會使細(xì)胞對刺激的反應(yīng)性降低,或使細(xì)胞周期進(jìn)程減慢,從而降低細(xì)胞增殖水平。抑癌基因的主要功能是對細(xì)胞分裂和生長進(jìn)行適當(dāng)抑制,防止細(xì)胞周期失控導(dǎo)致無限擴(kuò)增和分裂生長。衰老時,有些抑癌基因的表達(dá)或活性增加。具有細(xì)胞增殖調(diào)控功能的衰老相關(guān)基因包括p21、p16、細(xì)胞周期素(cyclin)D1、周期素依賴性激酶(cyclindependent kinases, CDK) 2、p53、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinablastoma, Rb)基因和PCNA等。上述衰老相關(guān)基因的調(diào)控是相互聯(lián)系的[9]。
中醫(yī)認(rèn)為人體的生長、發(fā)育和衰老與“腎”密切相關(guān)?!澳I精虛衰”是衰老的主要原因。同時又認(rèn)為“脾胃為血?dú)怅庩栔佟?,“脾胃既和,其人壽;脾胃不和,其人夭”,因此也重視奉養(yǎng)脾胃精氣在延年中的作用?!端貑?至真要大論》還提出“氣血正平,長有天命”,氣血運(yùn)行失常,則能影響臟腑、經(jīng)絡(luò)、陰陽等方面功能的平衡,出現(xiàn)五臟六腑各方面病變,加速衰老過程。因此縱觀歷代文獻(xiàn)有關(guān)“耐老”、“不老”方藥,研究其治法基本屬于補(bǔ)腎、健脾、益氣、活血范疇。
本實(shí)驗(yàn)主要在比較補(bǔ)腎、健脾、益氣、活血方藥對衰老的人胚肺二倍體成纖維細(xì)胞2BS細(xì)胞增殖調(diào)控作用的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步觀察益氣、活血方藥對老年大鼠肝臟衰老相關(guān)基因p16、p21、cyclin D1、PCNA和cyclin E的mRNA轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)的影響,以探討益氣、活血方藥對老年大鼠肝臟細(xì)胞增殖的作用機(jī)制。結(jié)果表明:老年大鼠肝臟p16、p21、cyclin D1基因mRNA和蛋白表達(dá)明顯升高;PCNA、cyclin E mRNA和蛋白表達(dá)明顯降低。提示:老年大鼠肝臟細(xì)胞周期蛋白依賴的激酶抑制因子p21、p16表達(dá)增高,可能通過抑制cyclin D1CDK4和cyclin ECDK2的活性,使Rb蛋白磷酸化水平降低,從而抑制細(xì)胞增殖。p21還可能與PCNA結(jié)合,使DNA合成受阻。由于細(xì)胞不能進(jìn)入增殖周期,最終發(fā)生衰老。細(xì)胞周期蛋白cyclin D1是原癌基因的表達(dá)物,與CDK4結(jié)合后,可促進(jìn)G1/S期轉(zhuǎn)變。文獻(xiàn)報(bào)道:衰老時cyclin D1蛋白水平升高,但cyclin D1CDK4復(fù)合物活性降低,影響細(xì)胞增殖[10]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:衰老大鼠肝臟cyclin D1的升高與文獻(xiàn)報(bào)道一致。PCNA為DNA聚合酶δ的附屬蛋白,參與DNA復(fù)制;cyclin E與CDK2結(jié)合,參與G1/S期的轉(zhuǎn)變。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:與青年鼠比較,老年大鼠PCNA和cyclin E的表達(dá)明顯下調(diào),則必然影響細(xì)胞周期的正常運(yùn)行,抑制細(xì)胞增殖。益氣、活血方藥能不同程度降低老年大鼠肝臟cyclin D1基因mRNA和蛋白的表達(dá),上調(diào)肝臟cyclin E基因mRNA和蛋白的表達(dá),但對p16、p21、PCNA mRNA和蛋白的表達(dá)作用不明顯。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期的結(jié)果(益氣、活血方藥可降低老年大鼠肝組織細(xì)胞G0/G1期比例,增加G2/G1期細(xì)胞比值),提示益氣、活血方藥可促進(jìn)老年大鼠肝組織細(xì)胞的增殖[11]。益氣、活血方藥還能不同程度提高2BS衰老細(xì)胞的代謝活力和降低衰老相關(guān)半乳糖苷酶的活力[12,13],推測益氣、活血方藥促進(jìn)老年大鼠肝組織細(xì)胞增殖的作用可能部分與下調(diào)cyclin D1、上調(diào)cyclin E mRNA和蛋白的表達(dá)有關(guān)。
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【關(guān)鍵詞】 益氣活血復(fù)方;,,自發(fā)性高血壓大鼠;,,,左室肥厚;,,形態(tài)結(jié)構(gòu)
摘要:目的探討益氣活血復(fù)方對自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)左室肥厚(left ventricular hypertrophy, LVH)及左室心肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。方法雄性14周齡SHR 50只,隨機(jī)分為復(fù)方高劑量組(SHRY1)、復(fù)方中劑量組(SHRY2)、復(fù)方低劑量組(SHRY3)、模型對照組(SHRC)、硝苯地平組(SHRX)。監(jiān)測尾動脈收縮壓(systolic blood pressure, SBP),每4周1次,8周后取材。測算心臟重量指數(shù)(heart weight index, HWI)、左室質(zhì)量指數(shù)(left ventricular mass index, LVMI);光鏡、透射電鏡觀察左室心肌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果(1)與SHRC組比較,灌胃4,8周后,各治療組SBP顯著降低(P<0.01);(2)與SHRC組比較,灌胃8周后,SHRY1、SHRY2及SHRX組HWI、LVMI均明顯降低(P<0.05或P<0.01);(3)光鏡觀察發(fā)現(xiàn):SHRC組心肌纖維增粗或萎縮、斷裂或排列紊亂,部分心肌細(xì)胞核肥大或固縮;透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn):SHRC組可見部分心肌細(xì)胞核膜皺縮,核染色質(zhì)凝聚、趨邊,偶見核固縮,部分心肌細(xì)胞線粒體明顯腫脹。與SHRC組比較,SHRY1組上述病變明顯減輕;SHRY2、SHRX組病變有所改善;SHRY3組病變改善不明顯。結(jié)論 益氣活血復(fù)方、硝苯地平均能降低SBP、HWI、LVMI,減緩SHR左室肥厚形成、發(fā)展過程中左室組織結(jié)構(gòu)的破壞。
關(guān)鍵詞:益氣活血復(fù)方; 自發(fā)性高血壓大鼠; 左室肥厚; 形態(tài)結(jié)構(gòu)
Effects of Yiqihuoxue Decoction on the Morphological Structure of Myocardial Cells in Left Ventricle of Spontaneously Hypertensive Rats
Abstract:ObjectiveTo explore the effects of Yiqihuoxue decoction on left ventricular hypertrophy and the morphological structure of myocardial cells in left ventricle of spontaneously hypertensive rats(SHR). MethodsFifty fourteenweekold male SHR were pided randomly into 5 groups: SHRY1(treated with high dose of Yiqihuoxue decoction), SHRY2(treated with moderate dose of Yiqihuoxue decoction), SHRY3(treated with low dose of Yiqihuoxue decoction), SHRC(untreated), SHRX(treated with nifedipine). The systolic blood pressure(SBP) was measured before and during treatment every four weeks. After 8 weeks of treatment, all rats were killed. Heart weight index(HWI), left ventricular mass index(LVMI) were calculated. The morphological and structural changes of myocardial cells in left ventricle of SHRs were observed with light microscope and transmission electron microscope(TEM). Results(1) After 4 or 8 weeks' treatment, compared each treatment group with SHR-C,the SBP decreased significantly(P<0.01). (2)After 8 weeks' treatment, compared SHRY1, SHRY2 and SHRX with SHRC respectively, both HWI and LVMI decreased significantly(P<0.05 or P<0.01). (3) The results under light microscope were:in SHRC, cardiac muscle fibers were swollen, decreased, disrupted or disorganized arrangement, as well as some hypertrophic nuclear or pyknosis of myocardial cells. The results under TEM were: in some left ventricular tissues obtained from SHRC group, nuclear membrane shrank and nuclear chromatin condensed and congregated under nuclear membrane like speckle, abutting against the nuclear envelope; and pyknosis was observed by chance. Mitochondria of some myocardial cells were markedly swollen with some disorganized or disrupted mitochondrial cristae which displayed like uneven vacuole. Compared with SHRC,the above-mentioned pathological changes of SHRY1 were less obvious; the pathological changes ameliorated slightly in SHRY2 and SHRX; but there was no significant improvement in SHRY3. ConclusionYiqihuoxue decoction and nifedipine can reduce the SBP, HWI, LVMI and slow down the damages of left ventricle in SHRs during the process of LVH.
Key words:Yiqihuoxue decoction; Spontaneously hypertensive rats; Left ventricular hypertrophy; Morphological structure
左室肥厚(LVH)是心肌細(xì)胞肥大所致的心臟擴(kuò)大及左室重量增加,多發(fā)于高血壓病中晚期,其機(jī)理目前尚未完全闡明。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,高血壓LVH的可能機(jī)制在于久病氣虛血淤,本虛標(biāo)實(shí)。據(jù)此,本研究選擇益氣活血法作為防治LVH的主要治法,自擬益氣活血復(fù)方,旨在探討不同劑量益氣活血復(fù)方對自發(fā)性高血壓大鼠LVH及左室心肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。
1 材料與方法
1.1 藥物益氣活血復(fù)方由人參、黃芪、當(dāng)歸、川芎、赤芍、丹參、葛根、降香等組成(廣州二天堂醫(yī)藥公司提供),加水煎成200 %濃度(即1 ml藥液含2 g生藥)。硝苯地平,10 mg/片(廣東華南制藥廠生產(chǎn),批號:040602)。
1.2 動物及分組 清潔級雄性14周齡SHR大鼠50只,體重(257±12) g,購自上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限責(zé)任公司。普通飼料喂養(yǎng),避免噪音及其他干擾,觀察期為8周。SHR隨機(jī)分為5組,即復(fù)方高劑量組(SHRY1)、復(fù)方中劑量組(SHRY2)、復(fù)方低劑量組(SHRY3)、模型對照組(SHRC)、硝苯地平組(SHRX),每組10只。按體表面積法[1]換算:大鼠復(fù)方每日用量為13 g/kg體重,硝苯地平每日用量為5.4 mg/kg體重。以復(fù)方換算劑量為SHRY2組給藥劑量,SHRY1、SHRY3組分別為其3、1/3倍;SHRX組按大鼠換算劑量灌胃。即:SHRY1、SHRY2、SHRY3、SHRX組分別予以39 ,13,4.3 ,5.4 mg/kg?d藥物灌胃;SHRC組予等體積蒸餾水灌胃。動物禁食12 h后灌胃,1次/d。將藥物按不同劑量以蒸餾水稀釋,最終每只動物均予5 ml液體灌胃。干預(yù)8周間,每周稱重1次,根據(jù)體重調(diào)整藥量。
1.3 指標(biāo)檢測
1.3.1 SBP測定大鼠40 ℃預(yù)熱10 min后,用RBP1 B型大鼠尾壓心率測定儀(中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所研制)測量大鼠清醒、安靜狀態(tài)時尾動脈SBP,連續(xù)測量3次,每次間隔約1 min,取其均值作為該SHR的SBP(kPa)。實(shí)驗(yàn)前測壓1次,以后每4周測壓1次。
1.3.2 HWI、LVMI測定將禁食12 h的SHR用3 %戊巴比妥鈉行腹腔注射(30 mg/kg),麻醉后再次稱重,開胸取心,沖洗血污,濾紙吸干水份后,稱取心臟重量。沿房室交界處去除心房、大血管及右心室游離壁,將左室游離壁和室間隔準(zhǔn)確稱重,作為左心室重量。心臟重量、左心室重量與動物體重的比值分別作HWI(mg/kg),LVMI(mg/kg)。
1.3.3 光鏡標(biāo)本制備 取左室游離壁水平軸中部心肌約1.5 cm × 0.8 cm × 0.4 cm,立即置于4%多聚甲醛液(pH 7.4、4℃)固定24 h以上,常規(guī)石蠟包埋,切片(4 μm)HE染色,光鏡觀察。
1.3.4 電鏡標(biāo)本制備 每組隨機(jī)取2只SHR,取其左室游離壁中部心肌約2 mm × 3 mm × 5 mm,立即置于2.5 %戊二醛固定液1 h,在墊有冰塊的平皿上迅速切取成約1 mm×1 mm×1 mm的組織塊,置于新鮮的2.5 %戊二醛固定液4 h以上,低溫保存。0.1 mol/L磷酸緩沖液洗滌3次后,加入1 %鋨酸固定液,4 ℃下固定1.5 h。常規(guī)乙醇、丙酮逐級脫水,Epon 812樹脂平板定向包埋。用Reichert Jung Ultracut E 超薄切片機(jī)先切約1.0 μm半薄切片,1 %甲苯胺蘭染色,光鏡觀察定位,再行超薄切片。超薄切片醋酸雙氧鈾硝酸鉛雙重染色,JEOL100CXⅡ/T透射電鏡觀察、攝片。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有計(jì)量資料均采用 ±s表示,對來自同一整體的數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)。組間比較,采用單因素方差分析;組內(nèi)比較,采用t檢驗(yàn)。取檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,運(yùn)用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
2 結(jié)果
2.1 各組SBP、HWI、LVMI比較 隨著周齡增加,SHRC組SBP逐漸升高(P<0.05或P<0.01)。灌胃4周、8周后,與SHR-C比較,各治療組SBP均明顯降低(P<0.01)。灌胃4周后與治療前比較,SHRY1、SHRY2、SHRX組SBP均降低(P<0.05或0.01)。灌胃8周后與治療前比較,各治療組SBP均明顯降低(P<0.01)。灌胃8周后,SHRY1、SHRY2、SHRX組HWI、LVMI均較SHRC組降低(P<0.05或P<0.01)。結(jié)果見表1。
表1 各組SBP、HWI、LVMI比較(略)
與SHRC比較,#P<0.05,# #P<0.01;與SHRY3比較,P<0.05;與灌胃前比較,P
2.2 各組SHR左室心肌形態(tài)結(jié)構(gòu)比較
2.2.1 心肌光鏡檢查結(jié)果 SHRC組心肌纖維增粗,間距縮小或心肌纖維萎縮,間距增大,部分心肌纖維斷裂或排列紊亂。伴隨明顯大面積心肌水樣變性,部分心肌細(xì)胞核肥大或固縮。細(xì)胞內(nèi)容物呈顆粒狀,斷裂或融合,甚至有壞死,血管壁增厚。與SHRC組比較,SHRY1組上述病變明顯減輕;SHRY2、SHRX組病變有所改善;SHRY3組病變改善不明顯。見圖1~5。
2.2.2 心肌電鏡檢查結(jié)果 SHRC組可見凋亡心肌細(xì)胞。凋亡心肌細(xì)胞核核膜皺縮,染色質(zhì)凝聚、趨邊,在核膜下聚集呈斑塊狀;部分核仁消失,偶見胞核固縮。肌原纖維模糊、排列紊亂、部分溶解,以閏盤兩側(cè)為重。部分心肌細(xì)胞線粒體腫脹,嵴紊亂、斷裂或溶解,內(nèi)有大小不等的空泡區(qū)形成。與SHRC組比較,SHRY1組上述病變明顯減輕;SHRY2、SHRX組病變有所改善;SHRY3組病變改善不明顯。見圖6~11。
圖1 SHRC組 (×400)(略)
圖2 SHRY1組 (×400)(略)
圖3 SHRY2組 (×400)(略)
圖4 SHRY3組 (×400)(略)
圖5 SHRX組 (×400)(略)
圖6 SHRC組 (×13000) (略)
圖7 SHRC組 (×10000)(略)
圖8 SHRY1組 (×8000)(略)
圖9 SHRY2組 (×13000)(略)
圖10 SHRY3組 (×10000) (略)
圖11 SHRX組 (×8000)(略)
3 討論
近年研究表明[2~4]:高血壓LVH與久病氣虛血淤關(guān)系密切,益氣活血法對左室重構(gòu)有影響;鈣通道阻滯劑(calcium channel blocker, CCB)能逆轉(zhuǎn)高血壓LVH。既往的實(shí)驗(yàn)研究[5]已證實(shí):益氣活血復(fù)方具有CCB樣作用。高血壓狀態(tài)下,心肌壓力負(fù)荷過重,為維持心臟功能,早期心肌纖維代償性過度收縮,形態(tài)改變?yōu)榧」?jié)錯位,隨后出現(xiàn)心肌細(xì)胞代償性增生,這種增生早期可提高心臟功能,維持心臟正常泵血。然而,隨著代償性增生的發(fā)展,心肌細(xì)胞與供其血液的毛細(xì)血管比例失調(diào),導(dǎo)致心肌細(xì)胞能量供應(yīng)相對不足[6]。線粒體作為心肌細(xì)胞的能量代謝中心,其結(jié)構(gòu)與功能受損,表現(xiàn)為線粒體腫脹、嵴溶解,甚至出現(xiàn)部分肌纖維溶解現(xiàn)象[7]。益氣活血復(fù)方選用人參、黃芪、當(dāng)歸補(bǔ)氣養(yǎng)血;丹參、川芎、赤芍活血行氣止痛;降香行氣止痛、活血止血;葛根擴(kuò)張冠狀血管,減少外周阻力而降血壓。研究發(fā)現(xiàn):人參皂苷為人參的主要有效成分之一,人參皂苷Rb1能阻滯細(xì)胞膜上鈣離子通道的活動,減輕細(xì)胞內(nèi)鈣離子的積聚而抑制細(xì)胞凋亡[8];黃芪具有雙向免疫調(diào)節(jié)、擴(kuò)張血管、抗缺氧等功能;當(dāng)歸中阿魏酸有很強(qiáng)的抗氧化與清除氧自由基,降血脂及改善動脈粥樣硬化,抗菌、抗血栓等作用[9];黃芪、當(dāng)歸配伍具有較佳的抗血小板聚集作用[10~12];丹參能拮抗心肌細(xì)胞Ca2+內(nèi)流,具有CCB樣作用[13],并有拮抗血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ, AngⅡ)促心肌細(xì)胞肥大的作用[14,15];川芎、赤芍合用可明顯降低血清膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白,在抗氧化及保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能方面,有協(xié)同作用[16]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:益氣活血復(fù)方、硝苯地平均能降低SBP、HWI、LVMI,減緩SHR左室肥厚形成、發(fā)展過程中左室組織結(jié)構(gòu)破壞。兩者防治、逆轉(zhuǎn)LVH的可能機(jī)制為:① 擴(kuò)張阻力血管,減輕心臟后負(fù)荷,心肌做功減少,LVH減輕。② AngⅡ通過刺激交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮或組織局部AngⅡ直接促進(jìn)心肌蛋白合成,使心肌細(xì)胞生長肥大而致LVH,AngⅡ的這些作用依賴于細(xì)胞內(nèi)鈣水平,需要鈣離子介導(dǎo)。CCB通過減少胞內(nèi)鈣而阻斷AngⅡ的作用,使LVH減輕。益氣活血復(fù)方逆轉(zhuǎn)LVH的具體途徑、機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
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[關(guān)鍵詞] 益氣除痰方;肺癌;DP化療;全血細(xì)胞計(jì)數(shù)
[中圖分類號] R734.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721(2017)01(b)-0134-04
近年來,肺癌發(fā)病率和死亡率增長快速,已成為對人類健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一[1]。大約80%的肺癌患者在確診時已無手術(shù)條件,國際上越來越重視肺癌患者的生存質(zhì)量和生存時間[2]。中醫(yī)扶正治療不僅意味著“最好的支持治療”,還有更為深奧和實(shí)用的意義與價值。許多中醫(yī)藥學(xué)者著力于應(yīng)用扶正祛邪等方劑提高肺癌化療患者的免疫功能,以此提高其生存質(zhì)量,穩(wěn)定癌瘤和延長生存期[3-4]。對于非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者,化療在殺滅癌細(xì)胞的同時對人體正常細(xì)胞亦有較大殺傷作用,因此在化療期間聯(lián)合使用保護(hù)機(jī)體免疫功能、減輕化療毒性的藥物非常必要。本研究探討益氣除痰方對NSCLC患者DP方案化療期間的全細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響和臨床療效,現(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1一般資料
收集2014年3月~2016年3月廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科以及中山醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院接受DP方案化療的NSCLC患者,所有患者符合《新編常見惡性腫瘤診治規(guī)范》的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[5],病理學(xué)確診為NSCLC,影像學(xué)顯示有可測量病灶。中醫(yī)肺癌參照《中醫(yī)腫瘤學(xué)》分型標(biāo)準(zhǔn)[6],分為肺郁痰瘀、脾虛痰濕、陰虛痰熱、氣陰兩虛4種證型。本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會審查通過,患者均被告知并簽署化療方案和參與實(shí)驗(yàn)研究的知情同意書?;颊吖?3例,其中男43例,女20例,平均年齡為(63.71±11.45)歲。將63例患者分為西醫(yī)組(33例)、中西醫(yī)結(jié)合組(30例)。兩組患者的年齡、性別、評分等比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1),具有可比性。
1.2納入標(biāo)準(zhǔn)
經(jīng)病理學(xué)明確診斷,使用DP化療方案者;年齡為18~90歲;不伴嚴(yán)重的心、肝、腎及骨髓功能障礙者,化療前白細(xì)胞計(jì)數(shù)≥4.0×109/L,中性粒細(xì)胞絕對值≥2.0×109/L,血紅蛋白含量≥100 g/L,血小板計(jì)數(shù)≥100×109/L,KPS評分≥60分者;預(yù)計(jì)生存期>6個月;近期未使用任何防治骨髓抑制的藥物。
1.3排除標(biāo)準(zhǔn)
無明確病理的晚期肺癌患者;合并肺癌以外癌癥、嚴(yán)重感染的患者;合并心、腦、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重疾病和精神病患者;資料不全、依從性差的患者;孕D或兒童。
1.4治療方法
兩組均給予對癥支持治療。西醫(yī)組給予單純DP治療方案:順鉑(DDP)25 mg/m2,靜滴,第1天,多烯紫杉醇(DOC)75 mg/m2,靜滴,第1~3天。21 d為1個療程,至少2個療程[7]。中西醫(yī)結(jié)合組在西醫(yī)組治療基礎(chǔ)上給予中藥治療:以益氣除痰方為主方,辨證施治,隨證加減。益氣除痰方:黨參30 g、茯苓15 g、薏苡仁30 g、生半夏15 g(先煎)、浙貝15 g、山慈菇15 g、守宮6 g、魚腥草30 g、天冬20 g、仙鶴草30 g。隨證加減:肺郁痰瘀型加桃仁15 g,貓爪草15 g;脾虛痰濕型加白術(shù)15 g,葶藶子15 g;陰虛痰熱型加生地24 g,知母15 g;氣陰兩虛型加西洋參10 g,五味子10 g。煎服方法:水800 ml,煎至150 ml,復(fù)煎150 ml,兩次藥混勻,分2次飯后溫服[8-11]。治療周期:30 d為1個療程,2個療程以上。
1.5觀察指標(biāo)及評價方法
觀察患者化療前,化療第21、42天的全血細(xì)胞(白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞絕對值、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板)計(jì)數(shù)。觀察兩組患者治療42 d后的KPS評分[7];生活質(zhì)量評分:參照我國試行的腫瘤患者生活質(zhì)量評分(1990年)[12];體重變化情況;不良癥狀積分評定標(biāo)準(zhǔn)參照中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則(試行)[13]。
1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
收集所有數(shù)據(jù),整理建表,應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 13.0進(jìn)行分析。臨床資料、不良癥狀積分采用t檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)。全血細(xì)胞計(jì)數(shù)、生活質(zhì)量評分、KPS評分和體重經(jīng)SW法分布分析,非正態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)M,四分位數(shù)間距Q(P25,P75)表示,采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn),以P
2結(jié)果
2.1兩組患者化療前后全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的比較
中西醫(yī)結(jié)合組化療第21、42天的全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(除外化療第21天血小板計(jì)數(shù)組內(nèi)前后比較)分別與化療前比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
2.2兩組患者化療前后KPS評分、生活質(zhì)量評分、體重的比較
中西醫(yī)結(jié)合組化療第21、42天的KPS評分、生活質(zhì)量評分、體重分別與化療前比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
2.3兩組患者治療后不良癥狀積分比較
中西醫(yī)結(jié)合組治療后的咳嗽、咳痰、氣促積分均明顯低于西醫(yī)組(P
與西醫(yī)組比較,*P
3討論
以鉑類為基礎(chǔ)的化療方案是目前對不能手術(shù)的中晚期NSCLC最主要的治療手段之一[14-15]。Davidoff等[16]研究發(fā)現(xiàn)少數(shù)美國老年肺癌患者接受西醫(yī)治療,其中多數(shù)僅使用單方抗癌藥物。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,肺癌的病理病機(jī)主要由于正氣虛損、陰陽失衡、臟腑功能失調(diào)導(dǎo)致氣滯血瘀、痰凝毒聚、蘊(yùn)郁積聚于肺。益氣除痰方具有固本扶正、祛濕除痰、化痰散結(jié)和補(bǔ)脾益氣之功效。
骨髓抑制是化療較常見的毒副作用,化療藥物對骨髓抑制作用與血細(xì)胞壽命有關(guān)。白細(xì)胞的半壽期為6 h,血小板的半壽期5~7 d,紅細(xì)胞的半壽期為120 d,因此白細(xì)胞及血小板減少較易較早發(fā)生。紅細(xì)胞系干細(xì)胞數(shù)減少,不易從外周血紅細(xì)胞計(jì)數(shù)反映出來[17]。目前對腫瘤化療治療中患者骨髓造血功能狀況的監(jiān)測主要是檢測全血細(xì)胞計(jì)數(shù)?;颊咴诨熎陂g使用益氣除痰方配合溫補(bǔ)肺、脾、腎三臟,陽獾靡蘊(yùn)嶸,可提高化療耐受性,降低骨髓抑制程度。本研究結(jié)果顯示,中西醫(yī)結(jié)合組化療第21、第42天的全血細(xì)胞計(jì)數(shù)降低程度明顯輕于西醫(yī)組,提示NSCLC化療患者結(jié)合中醫(yī)藥治療能減輕骨髓抑制。
化療屬中醫(yī)學(xué)攻法的范疇,傷正氣,類似苦寒之劑,最易傷及脾胃,導(dǎo)致機(jī)體虛弱,脾胃功能失調(diào),傷陽耗氣,出現(xiàn)脾虛或脾腎陽虛之證。謝勁松等[18]認(rèn)為中醫(yī)藥治療肺癌的主要作用機(jī)制是調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌,提高患者的免疫功能,抑制腫瘤細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡,防止其轉(zhuǎn)移,逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥,對腫瘤放化療有增敏減毒作用。劉俊波[19]從肺癌的病因病機(jī)、辨證論治和中西醫(yī)結(jié)合治療方面綜述了近幾年中醫(yī)藥治療晚期NSCLC的長足進(jìn)步。中醫(yī)對肺癌的辨證施治、規(guī)范化治療及其療效評定標(biāo)準(zhǔn),在腫瘤治療具有很好的優(yōu)勢。在提高肺癌化療患者生活質(zhì)量方面,中醫(yī)藥結(jié)合聯(lián)合化療起重要作用。中醫(yī)藥及中西醫(yī)結(jié)合治療肺癌在放化療階段及晚期患者的治療階段均為最佳治療方案;建立規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的中醫(yī)腫瘤臨床療效評價體系,探索最佳的對NSCLC治療模式生活質(zhì)量評價體系將是未來的發(fā)展趨勢。
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關(guān)鍵詞 計(jì)算機(jī)仿真技術(shù) 網(wǎng)絡(luò)技術(shù) 醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn) 應(yīng)用
一、計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)相結(jié)合是實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵技術(shù)
與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)手段相比,利用計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)相結(jié)合的醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)具有實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的豐富性、實(shí)驗(yàn)過程的完整性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的及時性、直觀性。由于模擬仿真醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)無需相關(guān)實(shí)驗(yàn)器具,無需實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備即可引導(dǎo)學(xué)生理解實(shí)驗(yàn)的操作步驟以及實(shí)驗(yàn)效果,可以作為機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的一個有益補(bǔ)充。對教師而言起到輔助教學(xué)的作用,對學(xué)生而言,則起到對所學(xué)知識的理解和強(qiáng)化作用。
(一)計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)的發(fā)展為醫(yī)學(xué)機(jī)能仿真實(shí)驗(yàn)提供了必要的技術(shù)條件
(1)仿真技術(shù):仿真就是對現(xiàn)實(shí)系統(tǒng)的某一層次抽象屬性的模仿。我們利用這樣的模型進(jìn)行試驗(yàn),從中得到所需的信息,然后幫助我們對現(xiàn)實(shí)中的某一層次的問題做出決策。仿真是一個相對概念,任何逼真的仿真都只能是對真實(shí)系統(tǒng)某些屬性的逼近。
(2)傳統(tǒng)的仿真方法:是一個迭代過程,即針對實(shí)際系統(tǒng)某一層次的特性(過程),抽象出一個模型,然后假設(shè)態(tài)勢(輸入),進(jìn)行試驗(yàn),由試驗(yàn)者判讀輸出結(jié)果和驗(yàn)證模型,根據(jù)判斷的情況來修改模型和有關(guān)的參數(shù)。如此迭代地進(jìn)行,直到認(rèn)為這個模型已滿足試驗(yàn)者對客觀系統(tǒng)的某一層次的仿真目的為止。
(3)計(jì)算機(jī)仿真技術(shù):即是利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行仿真實(shí)驗(yàn),也稱為仿真機(jī)。從70年代末起,應(yīng)用大規(guī)模集成電路計(jì)算機(jī)的發(fā)展,各種專用和通用仿真機(jī)得到極大普及和推廣。隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的迅猛發(fā)展,人們在綜合集成數(shù)字仿真和模擬仿真的優(yōu)勢的基礎(chǔ)上,設(shè)計(jì)出在更高層次上的數(shù)字模擬混合仿真機(jī),在一些特定的仿真領(lǐng)域內(nèi),這種智能仿真計(jì)算機(jī)機(jī)和高層次的數(shù)字模擬仿真機(jī)都取得令人鼓舞的成果。
(4)計(jì)算機(jī)仿真系統(tǒng)構(gòu)成:為了建立一個有效的仿真系統(tǒng),一般都要經(jīng)歷建立模型、仿真實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)處理、分析驗(yàn)證等步驟。為了構(gòu)成一個實(shí)用的較大規(guī)模的仿真系統(tǒng),除仿真機(jī)外,還需配有控制和顯示設(shè)備。
(5)醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)(仿真系統(tǒng)):隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展,對醫(yī)學(xué)工作者提出了更高的要求,即不但要掌握人類已知醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的醫(yī)學(xué)知識,也要具備解決未知醫(yī)學(xué)問題的能力,即創(chuàng)新能力和科學(xué)實(shí)驗(yàn)的能力,而實(shí)驗(yàn)學(xué)科在醫(yī)學(xué)學(xué)生能力培養(yǎng)中起著至關(guān)重要的作用?,F(xiàn)代機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)把生理學(xué)、病理生理學(xué)和藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)有機(jī)的融合在一起,成為一門獨(dú)立實(shí)驗(yàn)學(xué)科。醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)課程以活體為主要實(shí)驗(yàn)對象,以正常生理功能——疾病生理——藥物作用為主線,把機(jī)體的不同功能變化通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)有機(jī)的聯(lián)系起來。醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)中,部分實(shí)驗(yàn)具有操作難度大、實(shí)驗(yàn)具有一定危險性,實(shí)驗(yàn)成本高等問題。譬如:醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)中研究藥物對動物記憶的影響、安定的抗驚厥作用、杜冷丁的鎮(zhèn)痛作用、神經(jīng)體液因素及藥物對心血管活動的影響、藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)、藥物半衰期的測定等實(shí)驗(yàn)就存在一定的危險性,實(shí)驗(yàn)操作難度大等問題。我們利用計(jì)算機(jī)仿真技術(shù),則可以在很大程度上解決目前醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)中所面臨的這些困難,并取得良好的教學(xué)實(shí)驗(yàn)效果。由于模擬仿真實(shí)驗(yàn)無需相關(guān)實(shí)驗(yàn)器具,無需復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備即可引導(dǎo)學(xué)生理解實(shí)驗(yàn)的操作步驟以及實(shí)驗(yàn)效果,因此醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)有機(jī)整合,既豐富了實(shí)驗(yàn)教學(xué)手段,又提升了教學(xué)質(zhì)量,有助于培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐操作能力、創(chuàng)新精神和科研興趣。
(二)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的飛速發(fā)展為計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)在醫(yī)學(xué)機(jī)能中的應(yīng)用提供了廣闊前景
(1)網(wǎng)絡(luò)技術(shù):網(wǎng)絡(luò)技術(shù)是從上世紀(jì)六十年代末美國國防部遠(yuǎn)景研究規(guī)劃局為軍事實(shí)驗(yàn)用而建立的網(wǎng)絡(luò),名為ARPANET,八十年代初期ARPA和美國國防部通信局研制成功用于異構(gòu)網(wǎng)絡(luò)的TCP/IP協(xié)議(網(wǎng)際傳輸控制協(xié)議),并投入使用;1986年在美國國會科學(xué)基金會的支持下,用通信線路把分布在各地的一些超級計(jì)算機(jī)連接起來,以NFSNET接替ARPANET;進(jìn)而又經(jīng)歷十幾年的發(fā)展形成Internet(互聯(lián)網(wǎng))。其應(yīng)用范圍也由最早的軍事、國防機(jī)構(gòu),拓展到科研教育機(jī)構(gòu),進(jìn)而迅速覆蓋了全球的各個領(lǐng)域。網(wǎng)絡(luò)把分散的資源融為有機(jī)整體,實(shí)現(xiàn)資源的全面共享和有機(jī)協(xié)作,使我們能夠透明地使用資源并按需獲取信息。 網(wǎng)絡(luò)可以構(gòu)造全球性和區(qū)域性的網(wǎng)絡(luò),有廣域網(wǎng)、城際網(wǎng)、企業(yè)內(nèi)部局域網(wǎng)等。網(wǎng)絡(luò)的根本特征就是實(shí)現(xiàn)資源共享,消除信息孤島。
(2)網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵技術(shù):網(wǎng)絡(luò)結(jié)點(diǎn)、寬帶網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)、資源管理和任務(wù)調(diào)度工具、應(yīng)用層的可視化工具。網(wǎng)絡(luò)結(jié)點(diǎn)是網(wǎng)絡(luò)計(jì)算資源的提供者,包括高端服務(wù)器、集群系統(tǒng)、MPP系統(tǒng)大型存儲設(shè)備、數(shù)據(jù)庫等。寬帶網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)是在網(wǎng)絡(luò)計(jì)算環(huán)境中,提供高性能通信的必要手段。資源管理和任務(wù)調(diào)度工具用來解決資源的描述、組織和管理等關(guān)鍵問題。任務(wù)調(diào)度工具根據(jù)當(dāng)前系統(tǒng)的負(fù)載情況,對系統(tǒng)內(nèi)的任務(wù)進(jìn)行動態(tài)調(diào)度,提高系統(tǒng)的運(yùn)行效率。網(wǎng)絡(luò)計(jì)算主要是科學(xué)計(jì)算,它往往伴隨著海量數(shù)據(jù)。如果把計(jì)算結(jié)果轉(zhuǎn)換成直觀的圖形信息,就能幫助研究人員擺脫理解數(shù)據(jù)的困難。這需要開發(fā)能在網(wǎng)絡(luò)計(jì)算中傳輸和讀取,并提供友好用戶界面的可視化工具。
(3)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)在醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)中的運(yùn)用:實(shí)驗(yàn)設(shè)備功能雷同的實(shí)驗(yàn)室,造成了實(shí)驗(yàn)場地、儀器設(shè)備、實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員等教學(xué)資源的極大浪費(fèi)。而通過網(wǎng)絡(luò)技術(shù)將醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)機(jī)聯(lián)網(wǎng)組成醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)室,既實(shí)現(xiàn)醫(yī)學(xué)機(jī)能信息資源的共享,同時也大大降低了實(shí)驗(yàn)成本。教師利用網(wǎng)絡(luò)技術(shù)可以方便地為一個班或幾個班的學(xué)生演示和操作醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn),大大提高了教學(xué)效率,而學(xué)生同樣可以利用網(wǎng)絡(luò)中的醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)機(jī)跟隨教師的演示進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,對提升學(xué)習(xí)效果也有一定的幫助。
二、計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)在醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
(1)醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是采用計(jì)算機(jī)虛擬仿真與網(wǎng)絡(luò)技術(shù)相結(jié)合,運(yùn)用服務(wù)器和客戶端的構(gòu)架模式,涵蓋了目前大部分醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)而建立的模擬仿真系統(tǒng)。包括生理實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、藥理實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、病理實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、人體實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目以及綜合實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目等。隨著醫(yī)學(xué)機(jī)能仿真技術(shù)的發(fā)展,利用計(jì)算機(jī)技術(shù)和網(wǎng)絡(luò)技術(shù)也便于對醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬系統(tǒng)進(jìn)行擴(kuò)充和升級,這樣可確保醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的長期生命力。
(2)醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)均應(yīng)包括該機(jī)能實(shí)驗(yàn)的總體介紹、原理、相關(guān)實(shí)驗(yàn)錄像、模擬實(shí)驗(yàn)過程、仿真實(shí)驗(yàn)操作等部分。全方位介紹了整個實(shí)驗(yàn),既注重整體,也著眼于細(xì)節(jié),便于學(xué)生對實(shí)驗(yàn)操作的充分理解和掌握。譬如利用血壓波形的核心模擬算法,對每一個波形的模擬都如此逼真,比如血壓模擬,不僅模擬出每個血壓波形的細(xì)節(jié):收縮期、舒張期、心房波等,而且連二級呼吸波也進(jìn)行了逼真的模擬。并且將刺激強(qiáng)度與反應(yīng)的關(guān)系,刺激頻率與反應(yīng)關(guān)系等實(shí)驗(yàn)波形和肌肉收縮圖形同步反映。為學(xué)生進(jìn)一步理解和掌握書本知識提供有益的幫助,大大提高學(xué)生的實(shí)踐操作能力。
(3)由于采用客戶/服務(wù)器的體系結(jié)構(gòu),并通過網(wǎng)絡(luò)將醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)機(jī)連接在一起組成醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)室,并在校園網(wǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行教學(xué)和實(shí)驗(yàn),既方便教師教學(xué),又方便學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作,最大限度地合理使用學(xué)校有限的教學(xué)資源。以我校的實(shí)際應(yīng)用為例:首先我們將醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)安裝到教室里的教學(xué)用機(jī)上,教師可以在進(jìn)行醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)方面教學(xué)時,通過學(xué)校的校園網(wǎng)絡(luò)在任何一間教室都能很方便地使用醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)中的資源和信息,極大地提升了醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)的教學(xué)效果,也充分激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。同時我們在學(xué)校計(jì)算機(jī)機(jī)房內(nèi)集中安裝組成醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)室,學(xué)生可以在教師的指導(dǎo)下進(jìn)行醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)操作,通過虛擬實(shí)驗(yàn),將一些平時不具備實(shí)際操作條件的醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)過程完整地展示給學(xué)生,不僅能加深學(xué)生對醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)知識的認(rèn)識和掌握,更能在一定程度上提高學(xué)生的實(shí)踐操作能力。
三、醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)在衛(wèi)生職業(yè)學(xué)校實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的前景展望
(1)由于醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)無需實(shí)驗(yàn)動物,無需實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備即可幫助學(xué)生理解實(shí)驗(yàn)的操作步驟以及實(shí)驗(yàn)效果,可以作為醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的一個有益補(bǔ)充。對教師而言起到輔助教學(xué)的作用,對學(xué)生而言,則起到加強(qiáng)知識的理解和強(qiáng)化作用。
(2)通過醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)對醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)的背景知識、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的用途、原理和操作進(jìn)行大量的介紹,既開闊了學(xué)生的視野,又為學(xué)生進(jìn)行探索性實(shí)驗(yàn)以及自主性設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)提供了新的科學(xué)指導(dǎo)。
(3)醫(yī)學(xué)機(jī)能虛擬實(shí)驗(yàn)還可以對相關(guān)醫(yī)學(xué)知識進(jìn)行模擬介紹,譬如信號采集的原理和性能指標(biāo),傳感器原理及各種傳感器介紹,試驗(yàn)試劑的配置,手術(shù)器械的介紹等。極大地豐富了學(xué)生的知識面,對他們今后的學(xué)習(xí)工作都起到很好的幫助作用。這也是我們傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)由于受實(shí)驗(yàn)場地、實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)等的局限所不能實(shí)現(xiàn)的。
參考文獻(xiàn):
[1]赫培峰等.《計(jì)算機(jī)仿真技術(shù)》.機(jī)械工業(yè)出版社
【關(guān)鍵詞】 益氣活血方藥;衰老;免疫;SOD;MDA
【Abstract】Objective To observe the impact of the Formula Benefiting Qi and Activating Blood Circulation on playing different roles about antiaging and to investigate its mechanisms. Methods The model groups were established by abdomen injection with Dgal. At the same time, the model dosage groups were administered with Formula Benefiting Qi and Activating Blood Circulation according to different dosage. After treatment 50 d, the weights of spleen and thymus glands were tested, and the levels of SOD and MDA of cortex were measured. Results The weights of spleens and thymus glands of rats in the dosage groups were increased compared with those in the model group (P<0.05).Compared with those of the model group, the levels of SOD were elevated more greatly (P<0.01) and the levels of MDA were decreased(P<0.01) in the dosage groups, but the function was different. Conclusions Benefiting Qi drug and Activating Blood drug plays the different role in the antiaging aspect, using the two kinds of medicine together in a proper dosage is more potent than using only one kind.
【Key words】Formula Benefiting Qi and Activating Blood Circulation; Aging; Immunity; SOD; MDA
“氣血失調(diào),氣虛血瘀”致衰老學(xué)說是近年來傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)提出的關(guān)于衰老機(jī)制的新學(xué)說。此學(xué)說一經(jīng)提出受到了醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注,一些學(xué)者也作了大量的相關(guān)研究,無論從動物實(shí)驗(yàn)還是臨床實(shí)驗(yàn)都證明益氣活血方藥能夠改善機(jī)體各系統(tǒng)器官的功能狀態(tài)從而延緩衰老〔1〕。本研究根據(jù)此學(xué)說“益氣活血”的治則和中醫(yī)“以藥效證”的原理,通過拆方,選擇益氣、活血的代表藥物作用于D半乳糖(Dgal)擬衰老大鼠模型,觀察兩種辨證在延緩衰老過程中發(fā)揮的作用,探討益氣活血法抗衰老的機(jī)制并為科學(xué)組方提供理論依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 動物
雄性健康SD大鼠,3月齡(體重200~250 g),SPF級(由復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供,許可證號:SDXK滬20020002)。將大鼠隨機(jī)分為①空白組②模型組③益氣藥大劑量組④益氣藥小劑量組⑤活血藥大劑量組⑥活血藥小劑量組⑦益氣活血大劑量組⑧益氣活血小劑量組,每組8只。
1.2 試劑
藥物:人參、黃芪、丹參、川芎(上海順天堂藥業(yè)有限公司提供)。試劑:Dgal(美國Sigma公司生產(chǎn),購于上海捷貝思基因技術(shù)有限公司);丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒(購于南京建成生物工程研究所,批號:20050607)。
1.3 方法
1.3.1 藥物制備
益氣藥:人參、黃芪水提,制成濃縮液(1 ml=1 g生藥材),4℃貯存?zhèn)溆??;钛帲捍ㄜ骸⒌?,?5%濃度的乙醇回流提取〔1〕,回收乙醇,制成濃縮液(1 ml=1 g生藥材),4℃貯存?zhèn)溆?。益氣?活血藥:人參、黃芪水提;川芎、丹參用75%濃度的乙醇回流提取,回收乙醇。合并濃縮液(1 ml=1 g生藥材),4℃貯存?zhèn)溆?。Dgal溶液的制備:在天平上稱量Dgal,用生理鹽水溶解配成5% Dgal溶液。
1.3.2 模型制備
①組:腹腔注射生理鹽水0.1 ml/100 g,連續(xù)50 d;②組:腹腔注射5% Dgal生理鹽水溶液,1 ml/100 g體重,1次/d,連續(xù)50 d;③~⑧組:在②組基礎(chǔ)上,同時用制備好的益氣藥大劑量(4.44 g·kg-1·d-1),益氣藥小劑量(0.74 g·kg-1·d-1),活血藥大劑量(3.91 g·kg-1·d-1),活血藥小劑量(0.65 g·kg-1·d-1),益氣活血大劑量(8.34 g·kg-1·d-1),益氣活血小劑量(1.39 g·kg-1·d-1)灌胃,每10天測體重1次,調(diào)整灌胃劑量,連續(xù)50 d。
1.3.3 胸腺、脾重量的測定
最末1次給藥2 h后處死實(shí)驗(yàn)大鼠,摘取胸腺、脾臟電子天平稱重。
1.3.4 大腦皮層SOD、MDA的測定
在冰臺上剝?nèi)〈竽X皮層,用冷生理鹽水沖洗標(biāo)本,用冷勻漿介質(zhì)研磨配成組織勻漿,按試劑盒所述操作。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
數(shù)據(jù)以x±s表示,顯著性檢驗(yàn)用方差分析(多個樣本均數(shù)的兩兩比較),用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。
2 結(jié) 果
2.1 胸腺、脾臟重量的測定
與模型組相比給藥各組胸腺和脾臟重量均有增加(P<0.05)。其中益氣藥加活血藥的大劑量組的作用明顯優(yōu)于其他給藥組(P<0.01)。見表1。
2.2 大腦皮層SOD、MDA的測定
與模型組相比各給藥組均顯著提高大腦皮層SOD活性(P<0.01)。其中小劑量的益氣藥加活血藥的作用優(yōu)于大劑量(P<0.05),其余各給藥組之間作用無差別(P>0.05)。說明單獨(dú)使用益氣藥或活血藥均有一定的提高機(jī)體SOD活性的作用,但其效果不如二者同時使用顯著。與模型組相比給藥各組均能降低機(jī)體MDA的含量(P<0.01),但作用有差別,其中益氣藥加活血藥的作用優(yōu)于其他藥物組,益氣藥加活血藥的小劑量組比大劑量組明顯,其他各給藥組之間統(tǒng)計(jì)學(xué)上作用無差別。見表1。表1 各組胸腺、脾臟重量、大腦皮層SOD、MDA的測定(略)
3 討 論
胸腺是免疫系統(tǒng)的中樞器官,對維持細(xì)胞免疫和調(diào)解免疫反應(yīng)起重要作用。機(jī)體的細(xì)胞免疫、體液免疫及非特異性免疫都和脾臟有密切關(guān)系。胸腺和脾臟的功能都和其質(zhì)量呈正相關(guān)性,且有增齡性萎縮的變化,模型組胸腺、脾臟的變化與此相符。因此,動態(tài)監(jiān)測胸腺和脾臟的質(zhì)量可用于機(jī)體免疫功能的評價〔2〕。通過該實(shí)驗(yàn)對比觀察發(fā)現(xiàn)益氣藥和活血藥在“益氣活血”法延緩衰老中發(fā)揮著不同效用,益氣藥對免疫器官的影響大于活血藥,主要表現(xiàn)為使胸腺、脾臟增重明顯。益氣活血藥合用的效果優(yōu)于單獨(dú)使用益氣藥。益氣活血藥對免疫器官的增重作用表明二者對提高免疫力,延緩衰老有明顯效果。益氣活血藥對免疫功能的影響主要表現(xiàn)為細(xì)胞免疫還是體液免疫有待進(jìn)一步的研究。
大鼠大量連續(xù)注射Dgal,可出現(xiàn)與自然衰老相似的改變,并證實(shí)Dgal誘發(fā)的自由基氧化應(yīng)激損傷是擬衰老的主要原因,可引起體內(nèi)尤其是腦組織內(nèi)自由基含量升高〔3〕。大腦皮層SOD、MDA可以反映大腦自由基產(chǎn)生和老化程度,從而反映大腦的功能狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)表明,模型組大鼠大腦皮層SOD活性降低,MDA含量升高,說明衰老大鼠確實(shí)存在自由基代謝紊亂,抗氧化系統(tǒng)功能降低,氧化產(chǎn)物增加。單獨(dú)使用益氣藥或活血藥對提高SOD活性,減少M(fèi)DA的作用都不如二者共同使用效果明顯,且小劑量的益氣加活血藥比大劑量作用強(qiáng)。這說明適當(dāng)?shù)膭┝坎拍苁箍寡趸c氧化系統(tǒng)達(dá)到平衡,方藥中為加大療效一味增加君藥劑量是不可取的。其機(jī)制可進(jìn)一步從細(xì)胞分子水平分析。
總之,合理適量搭配益氣、活血藥可以提高機(jī)體免疫力,改善自由基代謝從而達(dá)到延緩衰老的目的。由于衰老是機(jī)體復(fù)雜綜合的生理現(xiàn)象,故益氣活血方藥的抗衰老作用一定還有更廣泛的內(nèi)在聯(lián)系,有待進(jìn)一步的研究。
參考文獻(xiàn)
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[關(guān)鍵詞] 子宮內(nèi)膜異位癥;GnRH-a治療;激素水平;基因表達(dá)
[中圖分類號] R713.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210(2015)07(b)-0072-04
[Abstract] Objective To analyze the effect of preoperative GnRH-a treatment on serological indexes and gene expression related to endometrial tissue of patients with endometriosis. Methods 82 cases of endometriosis patients from December 2012 to December 2014 in Hu'nan Provincial People's Hospital were selected as research objects, according to random indicator method, they were divided into observation group and control group, 41 cases in each group. Patients of the observation group received preoperative GnRH-a combined laparoscopic treatment, and patients of the control group were treated with pure laparoscopic. The hormone levels, disease related indicators and recurrence of related indicators, endometrial tissue gene expression of two groups were compared. Results E2, FSH, P, LH levels of patients in the observation group after treatment were significantly lower than those of the control group, the differences were statistically significant (P < 0.05); CA125, CA199 and TIMP-1,VEGF of patients in the observation group after treatment were significantly lower than those of the control group, the differences were statistically significant (P < 0.05); expression levels of eNOS, CD34, LIvin in the observation group were significantly lower than those of the control group, the differences were statistically significant (P < 0.05). Conclusion Preoperative GnRH-a treatment helps to reduce the hormone levels in patients with endometriosis, is good for removed completely under laparoscopic surgery, and reduces the possibility of postoperative recurrence.
[Key words] Endometriosis; GnRH-a treatment; Hormone levels; Gene expression
子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)是臨床痛經(jīng)及不孕的主要原因之一,是指內(nèi)膜細(xì)胞種植在不正常位置而形成的一種女性常見婦科疾病,好發(fā)于24~40歲的育齡期女性,患者可表現(xiàn)出痛經(jīng)、月經(jīng)異常、不孕等臨床癥狀。一般認(rèn)為病變體積較大或者發(fā)生在其他部位的子宮內(nèi)膜異位結(jié)節(jié),體積在2 cm以上者,不易用藥物控制病情,需手術(shù)治療,而目前腹腔鏡手術(shù)是首選的治療方式。由于重度EMs病變廣泛,可以伴有嚴(yán)重粘連,增加腔鏡下分離及清除病灶的難度,可能會造成病灶遺留,增加術(shù)后復(fù)發(fā)概率、降低手術(shù)治療效果[1]。促性腺激素釋放激素激動劑(GnRH-a)是目前認(rèn)為可以顯著增加腹腔鏡手術(shù)效果,降低手術(shù)難度的藥物,其被稱為“藥物性卵巢切除”,使用后早期可以使患者體內(nèi)激素水平達(dá)到類絕經(jīng)期水平,迅速縮小病灶,增加腹腔鏡手術(shù)切除異位內(nèi)膜的徹底性[2]。本研究主要分析術(shù)前GnRH-a治療對子宮內(nèi)膜異位癥患者血清學(xué)指標(biāo)及內(nèi)膜組織相關(guān)基因表達(dá)的影響,具體報(bào)道如下:
1 資料與方法
1.1 一般資料
選擇2012年12月~2014年12月于湖南省人民醫(yī)院接受住院治療的EMs患者82例為研究對象,均具有典型癥狀且影像學(xué)檢查見低回聲暗區(qū)的盆腔包塊,所有患者及家屬在了解研究過程后均簽署知情同意書。按照隨機(jī)數(shù)字表法將所有入組患者分為觀察組及對照組,每組各41例。觀察組患者年齡29~46歲,平均(37.28±4.81)歲,病程4~28個月,平均(7.12±0.74)個月;對照組患者年齡30~45歲,平均(36.15±4.63)歲,病程6~26個月,平均(7.57±0.93)個月。兩組患者的基線資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),具有可比性。
1.2 治療方法
兩組患者均接受腹腔鏡手術(shù)治療,建立CO2氣腹后置入相關(guān)器械,術(shù)中行盆腔全面探查,松解盆腔粘連,伴巧克力囊腫者行卵巢表面打孔并吸凈其中巧克力樣液體、剝離囊腫。對于較小病灶可以直接切除,部分患者需行輸卵管造口及成形術(shù)。觀察組患者在腹腔鏡手術(shù)前接受GnRH-a治療,具體如下:月經(jīng)第1天肌內(nèi)注射GnRH-a 3.6 mg,以后每月1次,持續(xù)3個月經(jīng)周期。對照組患者單純接受腹腔鏡子宮異位內(nèi)膜剝離治療,圍術(shù)期不添加其他藥物。
1.3 觀察指標(biāo)
1.3.1 激素水平 接受不同治療前后,抽取患者外周靜脈血,采用放射免疫法測定血清雌二醇(E2)、卵泡雌激素(FSH)、孕激素(P)、黃體生成素(LH)等水平。
1.3.2 疾病相關(guān)指標(biāo)及復(fù)發(fā)相關(guān)指標(biāo) 接受不同治療前后,抽取患者外周靜脈血,采用酶聯(lián)免疫吸附法測定疾病相關(guān)指標(biāo)CA125、CA199,復(fù)發(fā)相關(guān)指標(biāo)基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1(TIMP-1)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)水平。
1.3.3 內(nèi)膜組織基因表達(dá) 治療前及術(shù)中均留取子宮內(nèi)膜組織,測定其中內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、CD34、LIvin蛋白的表達(dá)情況。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 激素水平
治療前兩組患者的血清激素水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),治療后兩組患者的激素水平均低于治療前,且觀察組患者的E2、FSH、P、LH水平明顯低于對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。見表1。
2.2 疾病相關(guān)指標(biāo)及復(fù)發(fā)相關(guān)指標(biāo)
治療前兩組患者疾病相關(guān)指標(biāo)及復(fù)發(fā)相關(guān)指標(biāo)值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),兩組患者治療后的疾病相關(guān)指標(biāo)及復(fù)發(fā)相關(guān)指標(biāo)值低于治療前,且觀察組患者的CA125、CA199、TIMP-1、VEGF水平均顯著低于對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。見表2。
2.3 內(nèi)膜組織基因表達(dá)
療前兩組患者內(nèi)膜組織基因表達(dá)值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P > 0.05),治療后兩組患者的內(nèi)膜組織基因表達(dá)值均低于對照組,且觀察組患者的eNOS、CD34、LIvin表達(dá)水平顯著低于對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)。見表3。
3 討論
EMs是一種臨床常見雌激素依賴性疾病,主要癥狀包括盆腔疼痛、不孕以及盆腔包塊,多發(fā)生于育齡期婦女,也是目前臨床不孕癥的主要病因之一。腹腔鏡手術(shù)以其小創(chuàng)傷、少并發(fā)癥等優(yōu)勢成為治療EMs的首選方式,單純的腹腔鏡手術(shù)治療雖然可以切除病灶,但是對于術(shù)后復(fù)發(fā)、殘留深部病灶等問題難以解決,需聯(lián)合藥物治療以提高治療效果[3-4]。GnRH-a屬于人工合成的十肽類化合物,與垂體GnRH受體親和力強(qiáng),活性較天然GnRH高50~100倍,可以促進(jìn)垂體細(xì)胞釋放LH及FSH[5]。GnRH-a用藥后以跟高的親和力率先占用GnRH受體并移入細(xì)胞內(nèi),除了首次給藥后點(diǎn)火效應(yīng)導(dǎo)致的LH、FSH短暫增高,其后導(dǎo)致細(xì)胞膜GnRH受體缺乏,F(xiàn)SH、LH分泌急劇降低,卵泡發(fā)育停止,最終體內(nèi)雌孕激素水平顯著降低,造成體內(nèi)激素水平處于類絕經(jīng)狀態(tài)、促進(jìn)異位子宮內(nèi)膜萎縮凋亡[6]。1982年Meldrum首次提出將GnRH-a用于EMs治療,目前較多研究也已經(jīng)證實(shí)GnRH-a可以有效緩解EMs患者臨床癥狀,結(jié)合單純腹腔鏡手術(shù)可能造成的子宮異位內(nèi)膜殘留的實(shí)際,目前較多學(xué)者提出可以將GnRH-a與腹腔鏡組成聯(lián)合治療方式用于EMs患者的治療,但是此方法的臨床效果研究多停留于實(shí)驗(yàn)階段,相關(guān)臨床報(bào)道仍較少[7]。
在本次研究中重點(diǎn)分析了GnRH-a應(yīng)用與否給患者帶來的臨床治療效果差異,主要比較在血清學(xué)及子宮內(nèi)膜基因表達(dá)方面的影響。在患者激素水平方面,治療前兩組患者的血清激素水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,觀察組患者在腹腔鏡手術(shù)之前應(yīng)用了GnRH-a,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其術(shù)后E2、FSH、P、LH水平明顯低于對照組,E2、FSH、P、LH的水平可以直接反應(yīng)患者的卵巢功能狀態(tài),上述結(jié)果提示GnRH-a應(yīng)用后對卵巢的功能抑制作用十分強(qiáng)烈。GnRH-a可以很好的調(diào)節(jié)垂體分泌作用,也被成為“暫時藥物性卵巢切除”,足見其對用藥后短期內(nèi)對卵巢功能抑制的徹底性,與上述結(jié)果中各項(xiàng)血清激素水平大幅降低至絕經(jīng)期水平吻合,通過顯著降低患兒激素水平來迅速縮小病灶體積,為后續(xù)腹腔鏡手術(shù)操作創(chuàng)造有利條件,從而達(dá)到手術(shù)切除徹底及減少術(shù)后復(fù)發(fā)的作用[8-9]。
腫瘤標(biāo)志物CA199為許多黏膜細(xì)胞的組成成分,目前廣泛應(yīng)用于消化系統(tǒng)腫瘤診斷及治療監(jiān)測,近年來其在婦產(chǎn)科疾病中的價值已經(jīng)越來越受到重視,許多學(xué)者已經(jīng)將CA199作為卵巢惡性腫瘤的輔助診斷指標(biāo)[10]。CA125對于EMs的診斷具有參考價值,在月經(jīng)期其水平會升高,故在EMs患者中其水平將顯著上升。EMs病灶組織與腫瘤細(xì)胞的生長方式極為類似,故TIMP-1、VEGF均可作為子宮內(nèi)膜侵襲轉(zhuǎn)移能力的客觀指標(biāo),用于判斷治療后的復(fù)況[11]。上述結(jié)果顯示治療前兩組患者的各項(xiàng)指標(biāo)水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,觀察組患者治療后的CA125、CA199、TIMP-1、VEGF水平均顯著低于對照組,可見GnRH-a聯(lián)合腹腔鏡手術(shù)可以更為徹底的切除病灶,也為減少遠(yuǎn)期疾病復(fù)發(fā)奠定了良好的基礎(chǔ)[12]。
近年來的理論認(rèn)為,GnRH-a不僅可以通過經(jīng)典途徑(垂體分泌效應(yīng))抑制內(nèi)膜細(xì)胞生長,還能夠直接作用于內(nèi)膜細(xì)胞本身發(fā)揮作用[13-14]。CD34為血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性標(biāo)志物,可以反映子宮內(nèi)膜新生毛細(xì)血管的生長情況,其水平越高水平新生毛細(xì)血管越豐富[15]。已經(jīng)有研究發(fā)現(xiàn)正常子宮內(nèi)膜與異位子宮內(nèi)膜中均有CD34表達(dá),但是異位子宮內(nèi)膜中的CD34表達(dá)量明顯更為豐富,說明異位子宮內(nèi)膜具有更強(qiáng)的種植生長能力。eNOS主要分布于神經(jīng)細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞中,為生理情況下合成NO的主要來源,已經(jīng)有研究證實(shí)在EMs患者的子宮內(nèi)膜上皮中,eNOS表達(dá)較正常子宮內(nèi)膜明顯增高。Livin是凋亡抑制蛋白家族的新成員,可以參與細(xì)胞凋亡的調(diào)控[16-17]。Livin在正常成人的多數(shù)終末組織中低表達(dá)或者不表達(dá),而在惡性腫瘤組織中則呈高表達(dá),可以阻斷細(xì)胞凋亡的過程。Alvarado-Díaz等[18]的研究中顯示Livin蛋白主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),在異位子宮內(nèi)膜中呈高表達(dá)。上述研究結(jié)果顯示,治療前兩組患者的eNOS、CD34、LIvin表達(dá)水平均較高,治療后均有所降低,但是觀察組患者的上述指標(biāo)值降低幅度明顯高于對照組,可見GnRH-a聯(lián)合腹腔鏡手術(shù)可以更為有效的抑制異位子宮內(nèi)膜的生長并促進(jìn)其凋亡,治療效果較單純腹腔鏡手術(shù)更為徹底。
綜上所述,術(shù)前GnRH-a治療有助于降低EMs患者的激素水平,有利于腹腔鏡手術(shù)的病灶徹底切除,同時降低術(shù)后復(fù)發(fā)可能性,值得在日后臨床實(shí)踐中推廣應(yīng)用。
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[中圖分類號] R192.3[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B[文章編號] 1005-0515(2011)-11-289-01
醫(yī)學(xué)影像學(xué)自德國物理學(xué)家倫琴發(fā)現(xiàn)X線以來僅100余年的歷史,影像學(xué)發(fā)展卻相當(dāng)迅速,尤其是近30年來,CT、MR、超聲、PET等新技術(shù)不斷涌現(xiàn),使其在臨床應(yīng)用的范圍不斷擴(kuò)大,已成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中發(fā)展最快的學(xué)科之一,而醫(yī)學(xué)影像學(xué)課程建設(shè)及有關(guān)影像學(xué)專業(yè)人才培養(yǎng)問題也日益受到重視。
傳統(tǒng)影像學(xué)專業(yè)的人才培養(yǎng)目標(biāo)不是培養(yǎng)單純以影像技術(shù)為主的專業(yè)技術(shù)人才就是培養(yǎng)單純以臨床診斷為主的專業(yè)診斷人才。隨著影像技術(shù)及現(xiàn)代影像設(shè)備的飛速發(fā)展,尤其是介入治療的發(fā)展和普遍應(yīng)用,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)影像學(xué)已由原來的臨床輔助檢查技術(shù)轉(zhuǎn)變成為與內(nèi)科、外科并列的第三大臨床治療技術(shù)。中國工程院院士劉玉清教授在報(bào)告中說,21世紀(jì)醫(yī)學(xué)影像學(xué)的發(fā)展方向是由以大體形態(tài)學(xué)為主向生理、功能、代謝和基因成像過渡。因此,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)人才要求既有影像學(xué)的專業(yè)知識和實(shí)踐能力也要有堅(jiān)實(shí)的臨床理論及臨床思維能力。專業(yè)發(fā)展方向的轉(zhuǎn)型對影像專業(yè)人才的要求也有了改變。多年的臨床經(jīng)驗(yàn)告訴我們單純的技術(shù)人才和單純的診斷人才都是不能適應(yīng)現(xiàn)代影像學(xué)發(fā)展的需求。我校根據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)影像學(xué)發(fā)展的趨勢及目前醫(yī)院對影像專業(yè)人才的特殊要求,結(jié)合我校的實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)研及論證,在原來的四年制醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)的基礎(chǔ)上增設(shè)了五年制臨床醫(yī)學(xué)(影像方向)專業(yè),并研究制定出新的人才培養(yǎng)方案。此方案的培養(yǎng)目的是培養(yǎng)集影像技術(shù)與臨床診斷于一體的綜合性專業(yè)人才。
1 培養(yǎng)目標(biāo)的改變 四年制醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo)是:培養(yǎng)適應(yīng)現(xiàn)代化建設(shè)需要的德、智、體、美全面發(fā)展,具有較扎實(shí)的專業(yè)基本理論和基本技能,較強(qiáng)的實(shí)踐能力和創(chuàng)新意識,面向基層醫(yī)療衛(wèi)生單位,能從事醫(yī)學(xué)影像技術(shù)工作的高級應(yīng)用型專門人才。
五年制臨床醫(yī)學(xué)(影像方向)專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)是:培養(yǎng)適應(yīng)現(xiàn)代化建設(shè)需要的德、智、體、美全面發(fā)展,具有基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)基本知識、基本理論和基本技能,較強(qiáng)實(shí)踐能力、科研能力和創(chuàng)新意識,面向基層醫(yī)療衛(wèi)生單位,能在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域從事影像技術(shù)及診斷工作的高素質(zhì)應(yīng)用型專門人才。
新專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo)是培養(yǎng)面向基層醫(yī)療衛(wèi)生單位,能在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域從事影像技術(shù)及診斷工作的高素質(zhì)應(yīng)用型專門人才。是因?yàn)榛鶎俞t(yī)療衛(wèi)生單位的影像科不像上級醫(yī)院有專門的影像診斷專業(yè)人才和影像技術(shù)人才,在基層醫(yī)院因?yàn)槿藛T少,往往沒有區(qū)分,大都需要“雙肩挑”。因此沒有過硬的醫(yī)學(xué)影像技術(shù)和臨床診斷知識是不受歡迎的。因此新的培養(yǎng)目標(biāo)是適應(yīng)基層醫(yī)療單位對醫(yī)學(xué)影像學(xué)人才的需求的。
2 課程設(shè)置的改變 在課程設(shè)置方面改變了原來的“公共基礎(chǔ)課專業(yè)基礎(chǔ)課臨床專業(yè)課影像專業(yè)課影像專業(yè)見習(xí)實(shí)習(xí)”的模式,采用的是“公共基礎(chǔ)課專業(yè)基礎(chǔ)課臨床專業(yè)課臨床專業(yè)見習(xí)實(shí)習(xí)影像專業(yè)課影像專業(yè)見習(xí)實(shí)習(xí)”的模式。學(xué)生進(jìn)校后首先學(xué)習(xí)公共基礎(chǔ)課,增強(qiáng)他們的人文素養(yǎng),然后依次學(xué)習(xí)專業(yè)基礎(chǔ)課和臨床專業(yè)課,接著下附屬醫(yī)院見習(xí)實(shí)習(xí)臨床專業(yè),再返校學(xué)習(xí)專業(yè)課,最后下附屬醫(yī)院進(jìn)行專業(yè)見習(xí)實(shí)習(xí)。
從課程順序上我們不難看出,新的培養(yǎng)方案在學(xué)習(xí)專業(yè)課之前增設(shè)了一階段的臨床專業(yè)見習(xí)實(shí)習(xí)。學(xué)生接受了一定的臨床經(jīng)驗(yàn)及臨床思維方式的培養(yǎng),再來學(xué)習(xí)專業(yè)知識,學(xué)生們無論是學(xué)習(xí)態(tài)度還是學(xué)習(xí)方法都會有驚人的轉(zhuǎn)變,理論結(jié)合臨床,學(xué)起來有的放矢,事半功倍。
3 課時設(shè)計(jì)的改變 公共基礎(chǔ)課基本沒變,學(xué)科基礎(chǔ)課總學(xué)時增加了三百余學(xué)時,專業(yè)課總學(xué)時增加了近兩百學(xué)時,其中增加的部分主要為臨床專業(yè)基礎(chǔ)課及臨床專業(yè)課,影像專業(yè)課增設(shè)了一門《醫(yī)學(xué)影像圖像處理》。隨著PACS建設(shè)的逐步普及并與HIS、RIS的整合,影像科和整個醫(yī)院的工作流程發(fā)生了很大的變化。PACS建成后可逐步做到無片化和無紙化,使影像學(xué)信息非常方便地在網(wǎng)上傳輸、并進(jìn)行會診和教學(xué)病例討論,使圖像信息資源得到充分的共享,因此增加臨床專業(yè)知識及影像圖像知識勢在必行。
4 學(xué)位授予的改變 四年制醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo)是培養(yǎng)從事醫(yī)學(xué)影像技術(shù)工作的高級應(yīng)用型專門人才,是技術(shù)類專業(yè),因此學(xué)位授予的是理學(xué)學(xué)士。五年制臨床醫(yī)學(xué)(影像方向)專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)是培養(yǎng)能在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域從事影像技術(shù)及診斷工作的高素質(zhì)應(yīng)用型專門人才,是醫(yī)療專業(yè),因此學(xué)位授予的是醫(yī)學(xué)學(xué)士。授予理學(xué)學(xué)士的畢業(yè)生日后只能考取技師類執(zhí)照,從事技術(shù)類工作。而授予醫(yī)學(xué)學(xué)士的畢業(yè)生日后可以考取醫(yī)師類執(zhí)照,就業(yè)范圍遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于授予理學(xué)學(xué)士的畢業(yè)生。我校在07級的學(xué)生中就逐步開始實(shí)行這種新的專業(yè)培養(yǎng)方案,迄今為止,無論是就業(yè)還是招生,五年制臨床醫(yī)學(xué)(影像方向)專業(yè)的前景都要優(yōu)于四年制醫(yī)學(xué)影像學(xué)專業(yè)。
參考文獻(xiàn)
級別:統(tǒng)計(jì)源期刊
榮譽(yù):Caj-cd規(guī)范獲獎期刊
級別:部級期刊
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級別:北大期刊
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