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【關(guān)鍵詞】生物技術(shù) 微生物學(xué) 教學(xué)改革
【中圖分類號(hào)】G642 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1674-4810(2012)22-0014-02
微生物學(xué)是生物技術(shù)專業(yè)的一門重要的專業(yè)基礎(chǔ)課,因涉及面廣、實(shí)用性強(qiáng)、受益面寬、與生產(chǎn)實(shí)踐緊密聯(lián)系和發(fā)展迅速等特點(diǎn),在生命科學(xué)領(lǐng)域中越來越受重視,在整個(gè)學(xué)科設(shè)置中占據(jù)了重要的地位,對生命科學(xué)和生物工程技術(shù)的發(fā)展起著巨大的推動(dòng)作用。長沙醫(yī)學(xué)院生物技術(shù)本科專業(yè)開設(shè)于2010年,是一門新開專業(yè),如何結(jié)合醫(yī)學(xué)院實(shí)際情況及生物技術(shù)專業(yè)特點(diǎn)和科技發(fā)展的要求,讓學(xué)生及時(shí)掌握最新的微生物學(xué)理論知識(shí)和應(yīng)用技術(shù),是目前醫(yī)學(xué)院生物技術(shù)專業(yè)微生物學(xué)教學(xué)中亟須解決的問題之一。本文針對生物技術(shù)專業(yè)特點(diǎn),結(jié)合筆者的教學(xué)經(jīng)歷和實(shí)踐中遇到的問題,從三個(gè)方面提出自己的點(diǎn)滴體會(huì),期望能夠?qū)ξ以荷锛夹g(shù)專業(yè)微生物學(xué)的教學(xué)改革實(shí)踐有一定的指導(dǎo)意義。
一 明確課程地位、合理修訂教學(xué)大綱
1.課程地位
根據(jù)生物技術(shù)專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo),將微生物學(xué)作為生物技術(shù)的主要專業(yè)基礎(chǔ)課。微生物學(xué)課程的作用,一是為后續(xù)的專業(yè)課程學(xué)習(xí)奠定知識(shí)基礎(chǔ),實(shí)現(xiàn)專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo);二是為學(xué)生今后從事相關(guān)專業(yè)工作提供豐富的微生物學(xué)知識(shí)和實(shí)踐技能。學(xué)生只有具備了微生物學(xué)的基礎(chǔ)理論和實(shí)踐技能,才能更好地到與之相關(guān)的企事業(yè)單位從事生產(chǎn)經(jīng)營、科研和管理工作。
2.教學(xué)大綱
在教育改革思想的指導(dǎo)下,結(jié)合專業(yè)特點(diǎn),我們通過教學(xué)實(shí)踐不斷反思和總結(jié),重新修訂了醫(yī)學(xué)院“微生物學(xué)教學(xué)大綱”和“微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱”。在大綱中明確了本課程的性質(zhì)、目的和任務(wù),對某些章節(jié)內(nèi)容的學(xué)時(shí)數(shù)進(jìn)行了一定調(diào)整,突出了重點(diǎn)內(nèi)容,減少講授時(shí)數(shù),增加自學(xué)、研討時(shí)數(shù);對每一章內(nèi)容都從“掌握、熟悉、一般了解”三個(gè)層次進(jìn)行分解,形成知識(shí)結(jié)構(gòu)體系;每章結(jié)束后安排15分鐘在教師的引導(dǎo)下讓學(xué)生自己總結(jié)和討論章節(jié)內(nèi)容,調(diào)動(dòng)和培養(yǎng)學(xué)生的自主精神。例如,“原核微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)”中“細(xì)菌細(xì)胞壁組成結(jié)構(gòu)”等重點(diǎn)內(nèi)容更為突出,所占課時(shí)比例增加;學(xué)習(xí)“真核微生物”時(shí),讓學(xué)生查閱文獻(xiàn),寫出“酵母菌/霉菌在生產(chǎn)中的應(yīng)用”的綜述并安排小組討論;在學(xué)習(xí)“微生物遺傳”內(nèi)容中補(bǔ)充微生物的基因組結(jié)構(gòu)。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱中,筆者對實(shí)驗(yàn)順序做了適當(dāng)?shù)恼{(diào)整,將“培養(yǎng)基的配制”和“消毒滅菌”實(shí)驗(yàn)分別作為第一、第二個(gè)實(shí)驗(yàn);將“土壤中微生物的分離純化”與微生物的形態(tài)觀察如“革蘭氏染色”和“微生物菌落的觀察”等實(shí)驗(yàn)進(jìn)行有機(jī)組合,形成連續(xù)、系統(tǒng)的綜合大實(shí)驗(yàn)。同時(shí),為了培養(yǎng)學(xué)生的自主創(chuàng)新能力,實(shí)驗(yàn)教學(xué)中還加入了自主設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn),由學(xué)生分組進(jìn)行。教師提供幾個(gè)可選主題,學(xué)生也可以選擇自己感興趣的方向,最后通過查閱文獻(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行操作。大綱中明確規(guī)定,實(shí)驗(yàn)考核不及格不能參加理論課考試,實(shí)驗(yàn)技能考核占微生物學(xué)總成績的20%。
二 合理選擇教材,注重教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)化和更新
目前,國內(nèi)出版的微生物學(xué)教材很多,但真正適合生物技術(shù)專業(yè)的微生物學(xué)教材卻少見。另外,我國教材建設(shè)明顯滯后國外,出版周期長。為此,在準(zhǔn)備課堂教學(xué)之前,教師首先應(yīng)根據(jù)專業(yè)和學(xué)校的實(shí)際情況,選擇國內(nèi)外優(yōu)秀教材,同時(shí)要隨時(shí)關(guān)注和緊跟學(xué)科發(fā)展動(dòng)態(tài),及時(shí)優(yōu)化和更新教學(xué)內(nèi)容,保證教學(xué)內(nèi)容的先進(jìn)性、系統(tǒng)性和合理性。
1.教材的選擇和調(diào)整
教材是溝通教與學(xué)的橋梁,是教與學(xué)的基本依據(jù),選用具有系統(tǒng)、完整的微生物學(xué)學(xué)科知識(shí)體系和反映當(dāng)代微生物學(xué)領(lǐng)域最新成就的優(yōu)秀的教材,是確保微生物學(xué)教學(xué)質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。在教學(xué)實(shí)踐中我們選擇了袁生教授主編的《微生物學(xué)》(高等教育出版社,2009)作為教材進(jìn)行試用。該教材為普通高等教育“十一五”國家級規(guī)劃教材,在結(jié)合精品課程建設(shè),汲取、借鑒和參考國內(nèi)外一些優(yōu)秀教材的長處的基礎(chǔ)上,加強(qiáng)了對微生物現(xiàn)代分子生物學(xué)前沿、微生物多樣性等知識(shí),以及當(dāng)前熱點(diǎn)問題的介紹,并且在教材編排比例上做了新的嘗試,是一本內(nèi)容全面、簡明扼要、結(jié)構(gòu)合理,并適用于綜合性大學(xué)生物學(xué)、生物技術(shù)、生物工程等專業(yè)微生物學(xué)課程的教材。同時(shí),筆者將周德慶先生編寫的《微生物學(xué)教程》、武漢大學(xué)沈萍教授編寫的《微生物學(xué)》等作為參考教材,這兩部教材內(nèi)容較新、知識(shí)性強(qiáng),匯集了學(xué)科近期研究進(jìn)展,資料翔實(shí)、信息量大。既避免了單純靠一本教材所帶來的局限和不足,拓寬了學(xué)生在微生物學(xué)領(lǐng)域的視野,又加強(qiáng)了學(xué)生的自學(xué)能力。此外,還通過給學(xué)生提供一些相關(guān)的課外學(xué)習(xí)的參考資料和網(wǎng)站(如《微生物學(xué)通報(bào)》、生物谷論壇等),讓學(xué)生自主地了解微生物學(xué)的發(fā)展前沿與動(dòng)態(tài),從而激發(fā)學(xué)生對本課程的學(xué)習(xí)興趣。
2.根據(jù)教學(xué)需要,優(yōu)化更新教學(xué)內(nèi)容
微生物學(xué)課程由于其內(nèi)容龐雜、微觀形態(tài)學(xué)內(nèi)容較為抽象,在有限課時(shí)內(nèi)不可能面面俱到。因此,教學(xué)中容易出現(xiàn)主線不清、體系不嚴(yán)謹(jǐn)?shù)葐栴},而且如何在學(xué)時(shí)相對減少的條件下,處理好理論知識(shí)與實(shí)際應(yīng)用、經(jīng)典內(nèi)容與現(xiàn)代科技的發(fā)展及最前沿的研究內(nèi)容間的關(guān)系是進(jìn)行教學(xué)內(nèi)容改革首先遇到的問題。為此,首先,要深入研究和領(lǐng)會(huì)教學(xué)大綱,仔細(xì)鉆研分析教材,理清脈絡(luò),形成立體的知識(shí)結(jié)構(gòu)體系,突出重點(diǎn)和難點(diǎn),與實(shí)際應(yīng)用統(tǒng)一起來,然后再系統(tǒng)地、有側(cè)重點(diǎn)地傳授給學(xué)生,完成大綱的要求。其次,避免課程間內(nèi)容交錯(cuò)重疊。筆者對交叉內(nèi)容進(jìn)行了適當(dāng)?shù)膬?yōu)化整合。例如,“微生物的代謝”一章,生物共同的代謝途徑部分為生化課的重點(diǎn)內(nèi)容,以學(xué)生自學(xué)為主,教師重點(diǎn)講解微生物特有代謝途徑及其作用和應(yīng)用意義,如乙醇發(fā)酵、乳酸發(fā)酵、生物固氮等。又如“微生物遺傳變異與育種”章節(jié),對于在分子生物學(xué)課程重點(diǎn)“遺傳物質(zhì)及基因表達(dá)調(diào)控”等內(nèi)容僅作簡要概括或讓學(xué)生自學(xué)。此外,適當(dāng)補(bǔ)充微生物學(xué)在工業(yè)中的應(yīng)用等相關(guān)教學(xué)內(nèi)容,如在每講完一大類微生物時(shí),補(bǔ)充相關(guān)微生物工業(yè)和產(chǎn)品相關(guān)內(nèi)容,既提高了學(xué)生學(xué)習(xí)微生物學(xué)的興趣,又注重了學(xué)生實(shí)際能力的培養(yǎng)。
三 嘗試多種教學(xué)方法,選擇正確合適的教學(xué)方法
教學(xué)過程中,許多學(xué)生反映微生物學(xué)課程“聽得懂、理不清、記不住”。因此,繼續(xù)采用傳統(tǒng)“填鴨式”教學(xué)方法只會(huì)與教學(xué)目標(biāo)背道而馳,這就要求教師在教學(xué)過程中注重教學(xué)方法的改進(jìn),根據(jù)不同的教學(xué)內(nèi)容和知識(shí)點(diǎn)選擇適合的教學(xué)方法,形象生動(dòng)地將微生物學(xué)基本知識(shí)傳授給學(xué)生。在教學(xué)過程中,筆者嘗試過以下幾種教學(xué)方法。
1.歸納、對比式教學(xué)法
對于知識(shí)點(diǎn)零亂、分散且容易混淆的內(nèi)容,可以通過歸納與比較其間的異同,使知識(shí)點(diǎn)層次清晰、分明,也可減輕學(xué)生記憶的難度。如原核微生物與真核微生物的比較;真病毒與朊病毒的比較;G+細(xì)菌與G-細(xì)菌細(xì)胞壁的比較;細(xì)菌、酵母菌、霉菌、放線菌菌落特征的比較;消毒與滅菌的比較;體液免疫與細(xì)胞免疫的比較等。比如,G+細(xì)菌與G-細(xì)菌細(xì)胞壁的比較可從四個(gè)方面對兩者進(jìn)行比較和說明:細(xì)胞壁結(jié)構(gòu);肽聚糖含量與單體結(jié)構(gòu);革蘭氏染色反應(yīng);磷壁酸、LPS的有無等。歸納和比較法授課過程中引導(dǎo)學(xué)生自主列表比較,既能促進(jìn)學(xué)生對知識(shí)的掌握和鞏固,又能提高其自學(xué)能力。
2.實(shí)例教學(xué)法
教學(xué)中,要理論聯(lián)系實(shí)際,多引入與生產(chǎn)生活實(shí)際密切相關(guān)的熱點(diǎn)問題或有趣事例。例如,講到“蕈菌”的時(shí)候,可以查閱最新文獻(xiàn)向?qū)W生們介紹一些常見的食用蘑菇的培養(yǎng)過程,引出真菌繁殖的生活史;開始“病毒”一章的學(xué)習(xí)時(shí),通過簡單介紹當(dāng)時(shí)SARS流行情況,引出其病原體—冠狀病毒,講到“亞病毒”時(shí)引入瘋牛病的例子,激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)病毒的興趣。這樣,不僅活躍了課堂氣氛,還對學(xué)生起到開闊視野、拓寬思路、激發(fā)學(xué)習(xí)興趣的作用。
3.討論式教學(xué)法
教學(xué)過程中有些內(nèi)容與當(dāng)前熱點(diǎn)問題有關(guān),可以提前幾周布置作業(yè)給學(xué)生,讓學(xué)生通過查閱大量的相關(guān)資料寫成綜述或總結(jié)。如講到細(xì)菌耐藥性時(shí),可以讓學(xué)生查閱相關(guān)文獻(xiàn),總結(jié)和分析當(dāng)前細(xì)菌耐藥性研究的進(jìn)展,包括耐藥菌種、耐藥機(jī)理及可采取的措施等,上課時(shí)分組派代表發(fā)言討論,最后教師總結(jié)。這樣有利于提高學(xué)生查閱資料、綜合分析的能力,既加深了對知識(shí)的理解和記憶,又提高了學(xué)生的組織和表達(dá)能力。
4.多媒體課件的合理利用
微生物的微觀形態(tài)特點(diǎn)使得微生物學(xué)的教學(xué)變得抽象、難以理解,采用多媒體課件輔助教學(xué),可以把在顯微鏡下的影像信息搬到教室中,使課堂教學(xué)形象化,有助于學(xué)生理解和接受。如細(xì)菌、真菌、病毒的顯微世界及鞭毛運(yùn)動(dòng)、噬菌體復(fù)制、擔(dān)孢子形成的過程可以通過色彩豐富、生動(dòng)形象的動(dòng)畫展示,再配有優(yōu)美的音樂和解說,能夠有效激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性,提高講課效率。教學(xué)過程中要把握好板書與多媒體的有效結(jié)合,避免多媒體畫面富于變化而帶來的講授內(nèi)容條理不清晰的弊端,在板書清晰的主線框架的前提下正確合理地利用多媒體教學(xué)。
四 結(jié)束語
以上是筆者根據(jù)微生物學(xué)課程的教學(xué)基本要求,為搞好課程教學(xué)而進(jìn)行的一些改革實(shí)踐和探索,并且已取得了一定的效果。但由于醫(yī)學(xué)院生物技術(shù)專業(yè)開設(shè)時(shí)間不長,微生物學(xué)課程作為生物技術(shù)專業(yè)的重要基礎(chǔ)課程之一,教學(xué)改革工作任重道遠(yuǎn),今后還有許多工作要做,需要同仁在教學(xué)實(shí)踐中不斷改革、思考、總結(jié)和深化,使教學(xué)質(zhì)量不斷提高。
參考文獻(xiàn)
[1]沈萍、陳向東.微生物學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2009
關(guān)鍵詞:分子生物學(xué);食品;微生物
1分子生物學(xué)的概念闡述
分子生物學(xué)作為一種基礎(chǔ)性學(xué)科,將分子作為一種物質(zhì)來研究生命的相關(guān)現(xiàn)象,比如構(gòu)成細(xì)胞的物質(zhì),能夠發(fā)生何種物理和化學(xué)變化。在進(jìn)行探究的過程中,這種學(xué)科代表了人們由探究生命的出現(xiàn)和進(jìn)化,可以得到生命所表達(dá)的重要意義。
2分子生物學(xué)在食品微生物檢測中的應(yīng)用意義
分子生物學(xué)的各項(xiàng)研究成果已經(jīng)滲透進(jìn)了人們的實(shí)際生活中,而且起到了促進(jìn)社會(huì)發(fā)展,和為全世界解決實(shí)際問題的作用。比如將酶催化產(chǎn)生的反應(yīng)和原因運(yùn)用到各類化學(xué)工業(yè)活動(dòng)中,人工進(jìn)行酶的模擬并生成新的催化劑,不僅能針對性地解決問題,還可以在化學(xué)工業(yè)領(lǐng)域領(lǐng)導(dǎo)新的革命。除了在化學(xué)方面有所益處,對食品安全方面也有巨大意義,它能夠更新微生物檢測技術(shù),提升了食品安全,保障了食品加工過程中產(chǎn)品的質(zhì)量和人的健康。
3基于分子生物學(xué)方法的食品微生物檢測技術(shù)研究
3.1以電泳為主導(dǎo)技術(shù)的DNA圖譜技術(shù)
由于排列順序不同的DN段會(huì)在變性劑濃度不同的情況下發(fā)生改變,利用不一樣的解鏈行為,使排列順序不同的DN段會(huì)停留在不同位置的凝膠上這一特性,提出了DGGE技術(shù)來檢測核酸序列,在被變性劑染色成功后,會(huì)在凝膠的各個(gè)位置上出現(xiàn)條帶狀物體。這種技術(shù)已經(jīng)被越來越多相關(guān)企業(yè)運(yùn)用,進(jìn)行食品微生物的抽離或測定,檢測微生物的數(shù)量等。J.Theunissen和T.J.Britz等人2004年在南非對含益生菌對食物進(jìn)行了DGGE技術(shù)檢測[6];MilicaNikolic等人則在南非自制的山羊奶干酪中進(jìn)行了PCR-DGGE檢測。在DGGE之后出現(xiàn)的NA指紋圖譜技術(shù),也叫做溫度梯度凝膠電泳,不同于DGGE的凝膠中使用尿素和甲酰胺濃度梯度的方法,溫度梯度凝膠電泳使用了溫度梯度和在引物的5′端增加3050bpGC片段的新技術(shù)。這種新的方式可以有效地統(tǒng)計(jì)出某一區(qū)塊內(nèi),微生物的數(shù)量和品種,還可以檢測出其他未知的腸道細(xì)菌,雖然Zoetendal等人已將這項(xiàng)TGGE技術(shù)運(yùn)用在了人糞樣微生物的探究分析中,但是針對食品的運(yùn)用還很少。
4隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA技術(shù)(RAPD)
通過將隨機(jī)的引物進(jìn)行PCR反應(yīng),并加重靶細(xì)胞DNA的比例進(jìn)行分析,這一方法被稱為RAPD分析,它能夠讓研究人員了解DN段的大小和數(shù)量,再根據(jù)DNA在不同基因組中的差異做出判斷。這種方式能夠?qū)⑷緿NA基因定位成目標(biāo)對象,可以辨識(shí)極小的差別,非常適合運(yùn)用在研究成果少,特點(diǎn)不明顯的或是DNA序列不凸顯的真菌和乳酸菌的研究中。G.Spano等人利用RAPD-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)了隱藏在紅葡萄酒中的植物乳桿菌,Walczak等人利用RAPD分析法得出了非生產(chǎn)用酵母菌株與標(biāo)準(zhǔn)清酒假絲酵母菌株具有相近的遺傳特質(zhì)。此外,針對葡萄球菌、大腸埃希氏、沙門氏菌和志賀氏菌等研究,都采用了這種技術(shù)方法。
5基因探針檢測方法
1968年,華盛頓卡內(nèi)基學(xué)院的Britten等人研究提出了核酸分子雜交技術(shù),也叫做基因探針技術(shù),這種技術(shù)的提出為分子生物學(xué)的DNA分析方法奠定了基礎(chǔ),也成為了全球范圍內(nèi)被使用最多的分子生物學(xué)技術(shù)。基因探針是一種具有特定標(biāo)記的基因碎片,具有檢測功能的原理是采用了堿基的配對,通過退火讓兩條互補(bǔ)的核酸單鏈成為雙鏈。這種檢測技術(shù)可以用來檢測食品微生物,具有方便快捷,直接有效的特點(diǎn),使食物免遭致病性微生物的損害。病原體其本身具有特殊的核酸碎片,利用已經(jīng)做好分離和標(biāo)志的核酸探針,將與需要檢測的樣品結(jié)合過的標(biāo)記物進(jìn)行監(jiān)測,如果檢測的樣品中本身就有確定的病原體,那么探針和核酸序列就會(huì)有所結(jié)合。這種基因探針檢測技術(shù)的優(yōu)勢在于,能夠非常靈敏地檢測出不同,而且還具備了組織化學(xué)染色的特點(diǎn),即可被見的特性和可定位的特點(diǎn),所以能夠檢測出食品中的致病性細(xì)菌。就現(xiàn)在來說,世界各地都提出了各種能夠檢測食品微生物的基因探針,比如說Moseley等人提出的生物素標(biāo)記的沙門菌基因探針,以及Kerdahi等人提出的能夠測試出單核細(xì)胞增生的李斯特菌的,來自非放射性DNA探針,還有陳倩等人能夠檢測出ESIEC大腸桿菌的,根據(jù)HPI毒力島基因生成的rp-z探針。另外還有已轉(zhuǎn)變?yōu)樘厥馍唐返幕蛱结樤噭┖?。美國的GENETRAK公司采用特殊的基因探針對沙門菌、李斯特菌和大腸桿菌的rRNA進(jìn)行檢驗(yàn)[6],最后得出了脫氧核糖核酸雜交篩選比色法。主要檢驗(yàn)方式分為以下幾步:
(1)需要一種與細(xì)菌rRNA相反的基因探針和一份完成增菌培養(yǎng)的樣品,細(xì)菌溶解之后與帶有熒光素標(biāo)記的探針互相雜交。此時(shí)樣品中存在靶細(xì)菌rRNA,則帶有熒光素和多聚脫氧腺嘌呤核苷酸(polydA)的探針互相雜交將成立。
(2)將包被多聚脫氧胸腺嘧啶核苷酸(polydT)的固相載體測桿與雜交溶液反應(yīng),如果polydA和polydT間的堿基出現(xiàn)配對,那么雜交核酸分子就被固體載體獲得,并將這種分子培養(yǎng)在辣根過氧化酶-抗熒光素接合劑中,使探針上的熒光素與結(jié)合劑溶合。
(3)固體載體首先放置在酶底物-色原溶液,再由辣根過氧化酶與底物反應(yīng),最后用酸終止,在450nm處計(jì)量吸光度的多少,就能確定樣品中是否存在靶細(xì)菌。
6基因芯片
上世紀(jì)90年代中期出現(xiàn)的基因芯片技術(shù),也就是DNA微陣列(DNAmicroarray),使用微加工技術(shù)構(gòu)建出能將人工產(chǎn)生的基因片段,緊密結(jié)合的、排列有序的出現(xiàn)在硅片等載體上。再根據(jù)被熒光檢測系統(tǒng)掃描過的,和標(biāo)記樣品雜交后的芯片,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析檢測,得出定性、定量的結(jié)果。由于基因芯片技術(shù)能夠高度地自動(dòng)處理大量信息,所以能夠快捷準(zhǔn)確地檢測食品安全。運(yùn)用基因芯片技術(shù)進(jìn)行病原體檢測的有:Berger等人進(jìn)行的12株嗜酸乳桿菌檢測;Wang等人進(jìn)行能夠具有超強(qiáng)特異性和靈敏度的肺炎鏈球菌檢測;高興等人對痢疾志賀菌、鼠傷寒沙門菌、金黃色葡萄球菌、霍亂弧菌、肉毒梭菌、肺炎鏈球菌、布氏桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌等16種病原細(xì)菌進(jìn)行檢測。但就目前的技術(shù)來說,基因芯片的應(yīng)用還不夠完善,首先,基因芯片所需的設(shè)備價(jià)格不低,制作成本很高,普通實(shí)驗(yàn)室沒有足夠的經(jīng)濟(jì)能力可以負(fù)擔(dān)。其次,基因芯片的特異性還不夠明顯,假陽性和假陰性會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的精準(zhǔn)程度產(chǎn)生影響。最后,基因芯片技術(shù)在進(jìn)行過程中,各項(xiàng)數(shù)據(jù)和參數(shù)還沒有形成統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),對可重復(fù)性會(huì)產(chǎn)生影響。只有不斷完善自身解決上述問題,基因芯片技術(shù)才能被更廣泛地運(yùn)用在全世界的各個(gè)領(lǐng)域。伴隨著全球食品貿(mào)易的發(fā)展,檢測食品病原菌也越來越重要,只有更方便快捷地完成食品安全檢測,將分子生物學(xué)的檢測方法運(yùn)用于日常生活,才能更好地發(fā)揮這項(xiàng)學(xué)科的魅力,研究出真正實(shí)用的食品病原微生物快速檢測方法。
參考文獻(xiàn)
[5]陳倩,程伯琨.基因探針檢測食品中具有HPI毒力島的ESIEC大腸桿菌[J].食品科學(xué),2000,21(7):35.
[關(guān)鍵詞] 微生物學(xué);教學(xué)改革;生物技術(shù);醫(yī)學(xué)院校
[中圖分類號(hào)] G424 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] C [文章編號(hào)] 1673-7210(2012)05(a)-0159-02
21世紀(jì)是生命科學(xué)世紀(jì),微生物學(xué)作為生命科學(xué)的重要學(xué)科之一,具有廣度的多交叉融合性和深度的多層次進(jìn)展性,因而起著生長點(diǎn)的作用,成為溝通臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的橋梁學(xué)科。如何圍繞微生物學(xué)知識(shí)體系的特點(diǎn)有效地提高其教學(xué)質(zhì)量,充實(shí)和完善學(xué)生對這一學(xué)科的知識(shí)積累,使踏入生物學(xué)大門的學(xué)生對微生物有一個(gè)較整體和廣泛的了解,初步掌握涉及微生物形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能、生理代謝、遺傳變異、生態(tài)分布、分類進(jìn)化等方面的知識(shí),為學(xué)習(xí)后續(xù)課程打下較為廣泛的知識(shí)基礎(chǔ)和開闊的視野,進(jìn)一步提高學(xué)生的科學(xué)素質(zhì),成為微生物學(xué)教學(xué)的關(guān)鍵。
1 把握微生物學(xué)知識(shí)特點(diǎn),提高教學(xué)質(zhì)量
大連醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)專業(yè)以培養(yǎng)具有廣博而堅(jiān)實(shí)的生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí),掌握細(xì)胞工程、發(fā)酵工程、基因工程、酶工程基本理論、基本技能和工藝技術(shù)過程,受到現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用開發(fā)研究的初步訓(xùn)練,具有良好的科學(xué)素質(zhì)和一定的創(chuàng)新能力,能在生物技術(shù)領(lǐng)域從事產(chǎn)業(yè)化工程設(shè)計(jì)、生產(chǎn)、管理和新技術(shù)研究、新產(chǎn)品開發(fā),以生物醫(yī)學(xué)見長的高級生物技術(shù)專業(yè)應(yīng)用型人才作為培養(yǎng)目標(biāo)?;诖碎_展了如下工作:
1.1 教材的選擇
教材是教學(xué)的藍(lán)本、重要載體和溝通橋梁,是學(xué)生在學(xué)校獲得系統(tǒng)知識(shí),進(jìn)行學(xué)習(xí)的主要材料,也是教師進(jìn)行教學(xué)的主要依據(jù)。一本優(yōu)秀的教材除了能夠全面系統(tǒng)闡述本學(xué)科的基本知識(shí)、基本理論和基本技能,幫助學(xué)生形成完整的知識(shí)體系外,還是學(xué)生對學(xué)習(xí)內(nèi)容感興趣,產(chǎn)生主動(dòng)學(xué)習(xí)愿望,主動(dòng)探索、合作交流的重要前提。面對龐大的微生物學(xué)教學(xué)內(nèi)容及有限的學(xué)時(shí),選擇一本內(nèi)容精煉、重點(diǎn)突出、脈絡(luò)清晰的教材具有重要的意義。通過專家充分討論,廣泛征求師生意見及參考相關(guān)院校的教學(xué)經(jīng)驗(yàn),最終確定了適合大連醫(yī)科大學(xué)生物技術(shù)專業(yè)的微生物學(xué)教材,即全國優(yōu)秀教材——周德慶先生主編的《微生物學(xué)教程》(第2版)為基本教材,代替原來的《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)》,該教材作為普通微生物基礎(chǔ)課教材,按照初學(xué)者的認(rèn)知規(guī)律構(gòu)建了一個(gè)牢固的“知識(shí)網(wǎng)絡(luò)”,有助于學(xué)生掌握微生物學(xué)的基本理論和基礎(chǔ)知識(shí),了解學(xué)科的發(fā)展、熱點(diǎn)和問題,為今后的學(xué)習(xí)及工作實(shí)踐打下深厚基礎(chǔ)[1-2]。同時(shí),推薦沈萍教授主編的《微生物學(xué)》作為參考書,鼓勵(lì)學(xué)生參閱一些國外優(yōu)秀生命科學(xué)教學(xué)用書,如Talaro等編撰的《Foundations in microbiology》、Lansing等編撰的《Microbiology》等,使學(xué)生廣泛的汲取相關(guān)專業(yè)知識(shí),同時(shí)還可進(jìn)一步提高專業(yè)外語水平。
1.2 突出重點(diǎn)和難點(diǎn),擴(kuò)大知識(shí)面
微生物學(xué)以微觀世界生物為研究對象,由于微生物種類繁多、形態(tài)微小、肉眼看不見,不易形成感性認(rèn)識(shí),而且微生物學(xué)理論具有相對獨(dú)立性,名詞概念新穎繁多,內(nèi)容相對抽象,這就決定了微生物學(xué)的教學(xué)內(nèi)容多且散亂,很多學(xué)生初次接觸這門知識(shí)反映“聽得懂、理不清、記不住”,學(xué)習(xí)有困難。因此,如何在學(xué)時(shí)少、內(nèi)容多的情況下,使學(xué)生既弄懂教學(xué)重點(diǎn),又提高學(xué)習(xí)興趣,是提高微生物學(xué)教學(xué)質(zhì)量的關(guān)鍵。為此,充分發(fā)揮教師的主導(dǎo)作用十分重要[3]。實(shí)際教學(xué)過程中,教師主要向?qū)W生介紹要點(diǎn)和難點(diǎn),特別要把涉及的名詞概念講述清楚,并在此基礎(chǔ)上要求學(xué)生全面閱讀教材內(nèi)容,例如課上重點(diǎn)介紹革蘭陽性菌和陰性菌的結(jié)果特點(diǎn),在此基礎(chǔ)上,由學(xué)生課后自己進(jìn)行比較總結(jié),熟悉染色的過程,進(jìn)而得出不同的染色結(jié)果產(chǎn)生的基礎(chǔ),這樣有利于培養(yǎng)學(xué)生的自學(xué)能力,創(chuàng)造獨(dú)立思考的空間,提高課堂吸收率,提高學(xué)習(xí)興趣。另外對于本科生,遵循注重知識(shí)點(diǎn)內(nèi)涵的詮釋,也注重其外延拓展的原則,使學(xué)生既獲得現(xiàn)有教材知識(shí),又開闊眼界,重點(diǎn)介紹成熟的為大家所公認(rèn)的最新理論、技術(shù),引導(dǎo)、啟發(fā)學(xué)生思考,培養(yǎng)學(xué)生對微生物學(xué)的興趣,擴(kuò)展知識(shí)面。
1.3 注重知識(shí)的整體性,構(gòu)建認(rèn)知網(wǎng)絡(luò)
微生物學(xué)的特點(diǎn)之一是整個(gè)知識(shí)結(jié)架構(gòu)的緊湊性,各章節(jié)間高度關(guān)聯(lián),構(gòu)成一個(gè)完整的知識(shí)體系。因此,在學(xué)生掌握基本概念、理論等抽象知識(shí)的基礎(chǔ)上,圍繞主線,展開橫向、縱向知識(shí)網(wǎng),分析各部分知識(shí)在整個(gè)體系中的地位與作用,將會(huì)清晰呈現(xiàn)知識(shí)脈絡(luò)。例如“微生物的生長及其控制”一章,首先與學(xué)生共同從微生物的種類和特點(diǎn)、微生物的營養(yǎng)和培養(yǎng)基、微生物的營養(yǎng)類型、培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原則和方法、微生物的新陳代謝等不同層次和水平加以分析和認(rèn)識(shí),才能使學(xué)生對微生物的生長及其控制有正確的認(rèn)識(shí)和理解。既有利于掌握重點(diǎn)、理解難點(diǎn),強(qiáng)化對基本理論的系統(tǒng)、全面認(rèn)識(shí),又有益于啟發(fā)學(xué)生思維,指導(dǎo)學(xué)習(xí),培養(yǎng)分析綜合的邏輯性、多維性、獨(dú)創(chuàng)性思維和判斷能力[4]。
2 重視實(shí)驗(yàn)教學(xué),提高教學(xué)質(zhì)量
微生物學(xué)是理論與實(shí)驗(yàn)并重的一門實(shí)踐性較強(qiáng)的課程,通過實(shí)驗(yàn)課的訓(xùn)練,使學(xué)生獲得細(xì)菌等微生物的感性認(rèn)識(shí),建立無菌觀念,掌握微生物實(shí)驗(yàn)的基本操作技能,有利于鞏固微生物學(xué)理論課的內(nèi)容,并能靈活運(yùn)用所學(xué)知識(shí)指導(dǎo)生產(chǎn)實(shí)踐。因此,我教研室緊扣專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo),對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和體系進(jìn)行了優(yōu)化,既保留了微生物實(shí)驗(yàn)中傳統(tǒng)的革蘭染色等內(nèi)容,又側(cè)重開設(shè)綜合性實(shí)驗(yàn),減少驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn);改善實(shí)驗(yàn)安排,使分散的實(shí)驗(yàn)有機(jī)地組合起來成為系列實(shí)驗(yàn),老師在每堂課前和課后都對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行總結(jié)、分析和下次實(shí)驗(yàn)布置。例如對糞便標(biāo)本進(jìn)行病原學(xué)鑒定,實(shí)驗(yàn)包括培養(yǎng)基的制備和無菌操作,又涉及細(xì)菌形態(tài)學(xué)觀察、血清學(xué)實(shí)驗(yàn)及生化鑒定等內(nèi)容,各個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容緊密銜接,使學(xué)生體會(huì)到微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)是一個(gè)連續(xù)、系統(tǒng)的知識(shí)體系,各實(shí)驗(yàn)之間有著潛在的聯(lián)系,也清楚的認(rèn)識(shí)到前面實(shí)驗(yàn)的成功與否將影響到以后實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行,從而增強(qiáng)責(zé)任感,培養(yǎng)學(xué)生分析問題、解決問題的能力。這樣做點(diǎn)面結(jié)合,使學(xué)生既掌握了基本的細(xì)菌人工培養(yǎng)法等基本技術(shù),又對細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本流程有了總體的概念,有利于提高教學(xué)質(zhì)量。
3 采用自學(xué)-討論-講解式教學(xué)法
俗話說:“授之以魚,不如授之以漁”,我教研室根據(jù)大學(xué)生自身和微生物學(xué)課程教學(xué)的特點(diǎn),嘗試采用以“自學(xué)-討論-講解”為主的教學(xué)方式。
首先,教師根據(jù)各章節(jié)的重點(diǎn)和難點(diǎn),每章給出1~3個(gè)思考題,讓學(xué)生在通讀教材的基礎(chǔ)上,結(jié)合參考書等資料,對問題進(jìn)行準(zhǔn)備。其次是課堂討論環(huán)節(jié),以自學(xué)為基礎(chǔ),充分調(diào)動(dòng)每個(gè)學(xué)生的積極性,啟發(fā)學(xué)生開拓思路,加深對自學(xué)內(nèi)容的消化理解,還可促進(jìn)學(xué)生交流學(xué)習(xí)方法,提高表達(dá)能力。最后,在自學(xué)和討論基礎(chǔ)上的教師講解過程主要圍繞教學(xué)要求,突出重點(diǎn),突破難點(diǎn),有意識(shí)地引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)一些學(xué)說、理論的提出、推演和完善過程,學(xué)習(xí)證明這些理論的實(shí)驗(yàn)方法和思路,學(xué)習(xí)前人敢于提出問題、善于解決問題的創(chuàng)造性思維方法和客觀、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)[5]。例如,證明基因突變自發(fā)性和不對應(yīng)性的Luria變量試驗(yàn)、Newcombe涂布實(shí)驗(yàn)及Lederberg影印平板培養(yǎng)法,介紹這些著名學(xué)者實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)之巧妙和方法創(chuàng)新之獨(dú)到,對培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維和科學(xué)精神,為將來從事科學(xué)研究打下基礎(chǔ)具有重要意義。
4 開展“微生物學(xué)自主實(shí)驗(yàn)”,激發(fā)學(xué)習(xí)興趣,提高學(xué)生的綜合能力
激發(fā)學(xué)習(xí)興趣、培養(yǎng)創(chuàng)新能力、提高微生物學(xué)綜合素質(zhì),是每位微生物學(xué)任課教師應(yīng)當(dāng)深刻思考的問題。在幾年的教學(xué)積累中,我教研室嘗試了在已有實(shí)驗(yàn)課的基礎(chǔ)上實(shí)施“微生物學(xué)自主實(shí)驗(yàn)”,主要開展了:“酸奶中乳酸桿菌的分離、計(jì)數(shù)及鑒定”、“市售鮮牛奶中抗生素殘留的檢測及方法比較”、“健康及疾病狀態(tài)下腸道菌群的變化”、“植物提取物對抗生素相關(guān)性菌群失調(diào)的調(diào)整作用”等實(shí)驗(yàn)。這些內(nèi)容是游離于正常實(shí)驗(yàn)教學(xué)計(jì)劃之外的,通過查閱文獻(xiàn),學(xué)生們在輔導(dǎo)老師的指導(dǎo)下,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案,利用周末等課余時(shí)間完成實(shí)驗(yàn),每周1~2次。這樣既賦予了學(xué)生課外活動(dòng)專業(yè)特色,也增加了課程實(shí)踐的趣味性,避免了課程實(shí)踐在教學(xué)計(jì)劃和教材內(nèi)容方面的局限性[6]。事實(shí)證明,學(xué)生對這種課外的實(shí)踐形式非常感興趣,而且投入了極大的熱情,大大激發(fā)了學(xué)生的科研興趣,給其提供了一個(gè)自己動(dòng)手、展示創(chuàng)新性和才能的平臺(tái),也提高了學(xué)生學(xué)習(xí)微生物學(xué)理論課的主動(dòng)性和創(chuàng)造性,這對于讓學(xué)生系統(tǒng)全面地掌握微生物學(xué)知識(shí)并加以合理運(yùn)用到實(shí)際生活學(xué)習(xí)中具有重要作用,同時(shí)提高了學(xué)生獨(dú)立分析問題和解決問題的能力,增強(qiáng)了團(tuán)結(jié)協(xié)作精神,豐富了課外生活,有助于綜合素質(zhì)的提高。通過對微生物的實(shí)際培養(yǎng)、觀察、分離和鑒定及應(yīng)用,增強(qiáng)了學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的科研精神,努力求索的積極態(tài)度。
以上教學(xué)方法的嘗試,符合 “三個(gè)面向”的素質(zhì)教育為核心的教學(xué)目標(biāo),在重視知識(shí)傳授的基礎(chǔ)上,更注重了對學(xué)生能力的培養(yǎng),提高了其綜合能力、分析能力和創(chuàng)造能力,體現(xiàn)了醫(yī)學(xué)院校生物技術(shù)專業(yè)的特點(diǎn)和優(yōu)勢,能夠適應(yīng)市場發(fā)展與競爭的需要,具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。
[參考文獻(xiàn)]
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關(guān)鍵詞:高效復(fù)合微生物 水解酸化 SBR 化工廢水
上海某化工試劑廠所排廢水不僅有機(jī)污染物濃度高,而且由于污染物主要為苯環(huán)類物質(zhì),導(dǎo)可生化性特別差。采用傳統(tǒng)活性污泥法的厭氧(水解酸化)—SBR工藝處理,COD一直未能達(dá)標(biāo),因此選用投加高效復(fù)合微生物的生物強(qiáng)化技術(shù)進(jìn)行了試驗(yàn)。
生物強(qiáng)化技術(shù)針對傳統(tǒng)生物處理技術(shù)不能有效處理有毒、有害、難降解污染物的不足,利用現(xiàn)代生物技術(shù)選育優(yōu)勢菌種,構(gòu)建基因工程菌以提高生物處理系統(tǒng)對難降解有機(jī)物的去除能力,并增強(qiáng)系統(tǒng)的穩(wěn)定性和耐沖擊能力。林則等[1]利用連續(xù)流紫外誘變技術(shù)直接對活性污泥進(jìn)行馴化,將這種污泥與普通馴化污泥進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)其具有很高的降解活性和抗毒性能力。黃霞等[2]針對焦化廢水中的3種難降解有機(jī)物(喹啉、異喹啉、吡啶)篩選了具有較高降解能力的優(yōu)勢菌種,采用無紡布—PVA復(fù)合載體對優(yōu)勢菌種進(jìn)行包埋固定,研究了包埋固定化優(yōu)勢菌種對相應(yīng)有機(jī)物的降解特性,結(jié)果表明經(jīng)優(yōu)勢菌種處理8h后3種難降解有機(jī)物的降解率>90%。劉建榮等[3]利用光合細(xì)菌(PSB)活性污泥法處理含酚廢水,投加PSB于活性污泥中,經(jīng)過苯酚誘導(dǎo)馴化可產(chǎn)生酚氧化酶,明顯地提高了除酚能力。
由于許多有毒、有害、難降解有機(jī)廢水所含的污染物并不單一,因而也并不是某單一菌種所能處理的。高效復(fù)合微生物技術(shù)就是通過投加人工培育的優(yōu)勢菌群并利用其高濃度、高活性以及微生物之間的各類共代謝作用來解除廢水的毒性,并通過打斷長鏈、破壞雜環(huán)和官能團(tuán)等提高廢水的可生化性,進(jìn)一步進(jìn)行降解去除。
1 試驗(yàn)材料與方法
水解酸化、SBR反應(yīng)器均由相同尺寸的有機(jī)玻璃柱構(gòu)成,內(nèi)徑為190mm,高為400mm,總?cè)莘e為11.3L,有效容積為10L。水解酸化反應(yīng)器進(jìn)水由高位水箱供給,從底部進(jìn)入,高位溢流出水,內(nèi)設(shè)攪拌器。SBR反應(yīng)器設(shè)有兩個(gè)曝氣頭(以壓縮空氣為氧源)、兩個(gè)排水口,分別可排出25%、50%的上清液。試驗(yàn)裝置如圖1所示。
高效復(fù)合微生物采用進(jìn)口菌種并經(jīng)進(jìn)一步人工培養(yǎng)馴化而成。試驗(yàn)中的高效復(fù)合微生物是由芽孢桿菌屬(Bacillus)、產(chǎn)堿假單胞菌屬(Pseudomonas)、硫桿菌屬(Thiobacillus)、無色桿菌屬(Achrommnabcter)、亞硝化單胞菌屬(Nitrobacter)、腸桿菌屬 (Enterobacter)及微球菌屬(Micococcus)等組成,試驗(yàn)時(shí)一次性投加,投加量根據(jù) 經(jīng)驗(yàn)確定為裝置有效容積的1/15,并加入適量的粉末活性炭作為載體?;钚蕴客瑫r(shí)具有富積 有機(jī)物和提高生物量的作用(整個(gè)試驗(yàn)過程中沒有補(bǔ)加高效復(fù)合微生物)。
為便于控制,試驗(yàn)用水為從各主要車間取水按比例人工配制而成(COD為2500~4000mg/L,BOD5/COD值為0.2左右,SS<300 mg/L,pH值為2.0左右),經(jīng)過焦炭和廢鐵屑構(gòu)成的鐵炭微電解還原以及投加石灰的混凝中和沉淀等預(yù)處理工藝后再進(jìn)入水解酸化反應(yīng) 器中。預(yù)處理的目的主要是提高廢水的可生化性、去除SS以及調(diào)節(jié)pH值。試驗(yàn)所用污泥 均經(jīng)過馴化,馴化方法與普通活性污泥法相同,先少量進(jìn)入試驗(yàn)用水,并按照微生物所需營養(yǎng)比(C、N、P比為100∶5∶1)加入一定量的甲醇、尿素以及磷酸鹽,同時(shí)逐漸增加進(jìn)水量,直至污泥對COD的去除率達(dá)到75%時(shí)馴化結(jié)束。馴化后厭氧酸化反應(yīng)器中MLSS達(dá)到5755mg/L,SBR反應(yīng)器中MLSS為12990 mg/L。MLSS的組成包括活性生物、代謝產(chǎn)物、吸附的有機(jī)物、無機(jī)物以及活性炭。
2 結(jié)果與分析
2.1 HRT對COD去除率的影響
通過調(diào)節(jié)進(jìn)水量來改變水解酸化反應(yīng)器的HRT以考察其對COD去除率的影響,結(jié)果如圖2所示。
由圖2可見,隨著HRT的延長,COD去除率逐步提高。當(dāng)HRT達(dá)到24h時(shí),COD去除率>50%,但在超過24h后繼續(xù)延長HRT,COD去除率已不再有明顯提高。由于化工試劑廢水成分非常復(fù)雜,富含大量難降解有機(jī)物和對菌種有毒、有害的物質(zhì),因此要取得較好的水解酸化效果,HRT必須足夠長。從該試驗(yàn)結(jié)果看,水解酸化反應(yīng)器的HRT應(yīng)滿足24h。
2.2 曝氣時(shí)間對COD去除率的影響
從水解酸化反應(yīng)器排出的廢水一次性進(jìn)入SBR反應(yīng)器進(jìn)行曝氣、沉淀,試驗(yàn)結(jié)果如圖3所示。
由圖3可見,隨著曝氣時(shí)間的延長,COD去除率逐步提高,當(dāng)曝氣時(shí)間達(dá)到18h后COD去除率達(dá)到88%,此時(shí)出水COD<100mg/L,達(dá)到國家排放標(biāo)準(zhǔn)。據(jù)此確定SBR反應(yīng)器的曝氣時(shí)間為18h,運(yùn)行方式為:進(jìn)水為1h、曝氣為18h、沉淀為2h、排水為1h、閑置 為2h。
2.3 高效復(fù)合微生物對COD的去除效果
將高效復(fù)合微生物技術(shù)與水解酸化工藝相結(jié)合,不僅體現(xiàn)了該工藝具有的提高廢水可生化性的特性,而且也顯示了高效復(fù)合微生物巨大的降解功能。表1反映出采用高效復(fù)合微生物和普通活性污泥時(shí),水解酸化工藝進(jìn)出水COD、BOD5及BOD5/COD的變化情況。
表1 高效復(fù)合微生物提高BOD5/COD值的效果 高效復(fù)合微生物 普通活性污泥 水解酸化進(jìn)水 水解酸化出水 水解酸化出水 COD(mg/L) BOD5(mg/L) BOD5/COD COD(mg/L) BOD5(mg/L) BOD5/COD BOD5(mg/L) BOD5/COD 2808 654 0.233 971 411 0.423 974 0.347 2774 663 0.239 910 380 0.418 976 0.352 2707 652 0.241 909 396 0.436 863 0.319 3065 778 0.254 944 377 0.400 1002 0.327 2862 738 0.258 880 376 0.428 961 0.336 2822 666 0.236 996 437 0.439 962 0.341 2960 595 0.201 1152 479 0.416 1003 0.339
由表1可見,投加高效復(fù)合微生物經(jīng)水解酸化后廢水的BOD5/COD值平均由0.237提高到0.423;而在相同的進(jìn)水條件下,普通活性污泥僅將該值提高到0.337,這主要是由于高效復(fù)合微生物具有更強(qiáng)的破壞雜環(huán)、打斷長鏈的功能。
經(jīng)酸化水解反應(yīng)器后,原有大分子或顆粒狀有機(jī)物被兼性異養(yǎng)菌水解為小分子易降解有機(jī)物(如低分子有機(jī)酸、醇等),使反應(yīng)器中pH值下降(平均下降0.2)。另外,從所測得的揮發(fā)酸 的數(shù)據(jù)也證明了反應(yīng)器中水解酸化程度較高(當(dāng)水溫為25℃、進(jìn)水COD為2 505.31mg/L時(shí),進(jìn)水VFA=6.74mg/L,上清液VFA=12.85mg/L)。
圖4反映出投加高效復(fù)合微生物后水解酸化、SBR反應(yīng)器對COD的去除情況。
經(jīng)過高效復(fù)合微生物處理后,水解酸化、SBR反應(yīng)器對COD的去除率分別平穩(wěn)地保持在61%、91%,出水COD<100mg/L。
2.4 高效復(fù)合微生物的脫氮效果
高效復(fù)合微生物的脫氮試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
表2 高效復(fù)合微生物的脫氮效果
mg/L 水解酸化進(jìn)水 水解酸化出水 SBR出水 氨氮 有機(jī)氮 亞硝酸鹽氮 硝酸鹽氮 氨氮 有機(jī)氮 亞硝酸鹽氮 硝酸鹽氮 氨氮 有機(jī)氮 亞硝酸鹽氮 硝酸鹽氮 41.89 30.2 1.128 0 65.18 24.53 0.017 0 0 11.09 9.881 1.293 39.2 32.49 0.181 0 68.54 20.17 0.025 0 0 12.21 0.296 1.563 50.81 30.01 0.08 0 63.95 17.81 0.061 0 0 9.76 0.082 1.082 39.76 31.21 1.024 0 63.39 16.38 0.054 0 0 7.98 1.253 1.254 48.16 34.28 0.088 0 64.85 28.27 0.061 0 0 11.2 1.597 1.328 45.31 32.75 0.098 0 64.5 25.64 0.065 0 0 10.24 2.564 0.987
從表2可以看出,經(jīng)過水解酸化反應(yīng)器后氨氮含量有所增加(平均增加47.27%),這部分氨氮主要是由有機(jī)氮轉(zhuǎn)化而來(有機(jī)氮平均減少30.47%)。經(jīng)過SBR反應(yīng)器后氨氮被100%去除,有機(jī)氮被去除52.96%,出水都達(dá)到了國家排放標(biāo)準(zhǔn)。硝酸鹽氮和亞硝酸鹽氮經(jīng)過水解酸化反應(yīng)器后變化不大,在SBR反應(yīng)器中也并未積累,說明高效復(fù)合微生物不僅具有較強(qiáng)的硝化能力,同時(shí)也具有較強(qiáng)的反硝化能力。整個(gè)工藝對總氮的去除率平均達(dá)到了83.93%,說明高效復(fù)合微生物技術(shù)具有非常強(qiáng)的脫氮能力。
2.5 高效復(fù)合微生物與普通活性污泥的比較
表3為在相同進(jìn)水水質(zhì)和運(yùn)行工況下高效復(fù)合微生物與普通活性污泥作用效果的比較。
表3 高效微生物與普通活性污泥作用效果比較 項(xiàng)目 高效復(fù)合微生物 普通活性污泥 原水(mg/L) 出水(mg/L) 去除率(%) 出水( mg/L) 去除率(%) COD 2536 98 96.13 823 67.54 BOD5 575 10 98.26 0 100 總氮 82.57 13.27 83.93 57.21 42.03 氨氮 45.31 0 100 25.82 43.01
從表3可以看出,采用普通活性污泥的出水COD>800mg/L,而BOD5卻為零(說明普通活性污泥對這部分COD已無能為力,對氨氮的去除率也非常低,而采用高效復(fù)合微生物時(shí)出水COD<100mg/L,脫氮效果也非常好,出水總氮和氨氮均可達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn)。
轉(zhuǎn)貼于 3 結(jié)論
① 將高效復(fù)合微生物技術(shù)應(yīng)用于厭氧水解酸化—SBR工藝處理化工試劑廢水是完全可行的,系統(tǒng)對COD、總氮、氨氮的去除率分別可達(dá)到93%、83.93%、100%,出水各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn)。
② 高效復(fù)合微生物能夠有效地提高廢水的可生化性(BOD5/COD值由0.237提高到0.423),比普通活性污泥具有更強(qiáng)的破壞雜環(huán)、打斷長鏈能力。
③ 水解酸化—SBR反應(yīng)器中投入高效復(fù)合微生物,同時(shí)必須滿足一定的HRT要求才能取得良好的效果。水解酸化HRT應(yīng)達(dá)到24h,SBR曝氣時(shí)間應(yīng)達(dá)到18h。
參考文獻(xiàn)
[1] 林則.紫外光誘變技術(shù)在廢水生化處理中的應(yīng)用研究[J].中國環(huán)境科學(xué),1993,13(3):22 9-232.
關(guān)鍵詞:微生物技術(shù)、污水處理、污染、凈化、應(yīng)用
隨著全球經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,污水處理成為社會(huì)廣泛關(guān)注的問題,尤其是近幾年來,河流及飲用水污染事件層出不窮。目前我國在處理污水問題上普遍采用物理化學(xué)法,相對于微生物處理技術(shù)來說,這種方法見效慢、有殘留,并且可能造成二次污染,處理效果不佳。而微生物作為一種有機(jī)生物,能夠通過自身的新陳代謝徹底分解污染物,不對水質(zhì)造成傷害,這也是微生物污水處理技術(shù)在近幾年中快速發(fā)展的根本原因。
在具體的應(yīng)用上,由于微生物種類繁多,處理方法和技術(shù)的選擇必須要根據(jù)污水的性質(zhì)、污染程度等多個(gè)因素制定,從而保證污水處理的高效性。
一、我國污水處理現(xiàn)狀
我國的污水主要可以分為生活污水和工業(yè)污水兩大類,但近些年來,隨著我國工業(yè)化進(jìn)程的不斷推進(jìn)以及排水管網(wǎng)的泄漏等問題,這兩類污水開始出現(xiàn)融合的趨勢,因此我國的污水處理是一個(gè)綜合的過程。我國住房和城鄉(xiāng)建設(shè)部的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,截止2014年初,全國城市建成的污水處理廠共計(jì)1736座,污水處理率達(dá)89.34%;縣城污水處理廠共計(jì)1504座,污水處理率僅有76.25%。從整體上說,污水處理廠覆蓋的區(qū)域在污水處理方面取得了一定的成效,但是對我國的國土面積而言,這些處理廠難以實(shí)現(xiàn)全面治理。
此外,污水處理技術(shù)的落后以及資金短缺等問題也在一定程度上制約著我國污水處理事業(yè)的進(jìn)程,尤其在微生物污水處理這種新型的技術(shù)層面,相關(guān)的應(yīng)用仍未達(dá)到因地制宜的效果。
二、微生物污水處理機(jī)制與凈化原理
針對不同的污染物,微生物的凈化方式也有所差異,主要包括以下三種:(1)降解有機(jī)物,部分細(xì)菌、真菌、藻類可通過吞食將污水中一些復(fù)雜的有機(jī)物轉(zhuǎn)化為簡單的無機(jī)物分子,從而實(shí)現(xiàn)各種生命元素在的自然循環(huán),維持生態(tài)平衡。這種方式可有效處理尿素、氨基酸、蛋白質(zhì)等含氮有機(jī)物,從而凈化城市生活污水。(2)代謝作用,污水中存在大量不能被微生物食用的有機(jī)污染物,其中有些可以作為代謝能源來維持微生物的生命活動(dòng)。例如,一些放線菌和桿菌在從廣泛存在于餐廳污水的脂肪中獲取新陳代謝所需能量的過程實(shí)際上也起到了污水凈化的作用。(3)去毒素作用,微生物主要通過改變污染物的分子結(jié)構(gòu)減弱其毒性。如對于洗衣粉中的有毒磷元素,微生物可以通過將無機(jī)磷酸鹽拆分為無毒性的有機(jī)酸和二氧化碳來去除。但是由于污水成分和微生物分解過程都較為復(fù)雜,這種處理方式可能產(chǎn)生有毒的中間物質(zhì),造成二次污染,因此在應(yīng)用過程中必須要進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)視。
三、微生物污水處理技術(shù)的應(yīng)用
1.微生物吸附技術(shù)
微生物吸附技術(shù)是利用某些微生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)特性,將自身或者其分泌物與污水中的懸浮物質(zhì)(如金屬離子)結(jié)合在一起,形成一種活性生物吸附劑,再人為地進(jìn)行固液分離。這種技術(shù)較為新穎,并且價(jià)格低廉,目前多應(yīng)用于大面積重金屬污水的處理。
微生物吸附技術(shù)在應(yīng)用過程中受到很多因素的影響:(1)溫度和pH值,這兩個(gè)因素會(huì)嚴(yán)重影響污水中重金屬離子的化學(xué)狀態(tài)和微生物的活性,從而影響氧化還原過程和沉淀反應(yīng)等;(2)吸附時(shí)間,研究表明,微生物吸附重金屬的過程僅需幾個(gè)小時(shí)(酵母菌吸附鎘離子、鋅離子的時(shí)間約為3小時(shí)),一般而言,適當(dāng)延長吸附時(shí)間可以提高吸附效率,因此在應(yīng)用中要在保持細(xì)胞活性的前提下適當(dāng)平衡吸附時(shí)間;(3)共存離子,污水的成分往往較為復(fù)雜,凈化水質(zhì)的一個(gè)關(guān)鍵在于保留原有的無害物質(zhì),如鈣離子、鈉離子、鉀離子等輕金屬離子,這就需要對污水成分和微生物的吸附性做一個(gè)全面的了解,防止過渡凈化。
2.微生物絮凝技術(shù)
微生物在生長和代謝過程中會(huì)產(chǎn)生一些功能性多糖和糖蛋白等具有絮凝功能的高分子有機(jī)物,可用于污水污泥的處理,有些微生物本身也是高效的絮凝劑,上世紀(jì)八十年代從紅平紅球菌得到的NOC-1使其研究最詳盡、效果最好的生物絮凝劑。
絮凝技術(shù)主要可以應(yīng)用于:(1)農(nóng)業(yè)污水處理,農(nóng)業(yè)廢水中BOD含量較多,因而處理難度較高,傳統(tǒng)處理技術(shù)難以奏效,而微生物絮凝劑對TN和TOC的去除率達(dá)到45%和75%,在一定程度上提高了處理效果;(2)廢水脫色處理,可溶性色素的去除一直是廢水處理的難點(diǎn),絮凝劑通過對色素的絮凝沉淀來實(shí)現(xiàn)污水脫色,處理后的水質(zhì)澄澈透明,方法也相對安全高效。
微生物絮凝劑作為無毒環(huán)保的污水處理用劑,應(yīng)用前景廣闊,但是其成本相對較高,技術(shù)上也面臨更高的難度,因此這種方式目前仍未實(shí)現(xiàn)普遍應(yīng)用。
3.固定化酶和固定化細(xì)菌技術(shù)
固定化酶和固定化細(xì)菌技術(shù)統(tǒng)稱為固定化微生物技術(shù),它指的是在保持生物活性的前提下,通過將游離的微生物固定于限定的載體來提高微生物濃度并反復(fù)利用的方法。固定方式包括包埋法、交聯(lián)法、自固定化法、符合固定化法等,@種技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)在于微生物密度高、設(shè)備小型化、產(chǎn)物易分離,成本較低,目前被廣泛應(yīng)用于包括水污染、大氣污染、土壤污染在內(nèi)的環(huán)境污染問題??傮w來說,固定化技術(shù)應(yīng)用的限制較少,但是在一些復(fù)雜的污水處理問題中,為了保證治理效率和循環(huán)利用,微生物和載體都必須具備高度的環(huán)境適應(yīng)能力,因此針對不同的水質(zhì),要合理選擇微生物和載體。
4.高效降解菌技術(shù)
高效降解菌技術(shù)實(shí)際上是對以上三種技術(shù)的延伸,高效降解菌指的是利用生物工程的培養(yǎng)技術(shù),對具有降解能力的細(xì)菌進(jìn)行一段時(shí)間的人工培育和多代選擇,最終得到強(qiáng)化的菌群。相比于原始的降解菌來說,經(jīng)過培育和篩選的菌群具備更強(qiáng)的適應(yīng)能力和繁殖能力,污水處理的效率也大大增強(qiáng)。
除了同種菌類的培育,不同細(xì)菌的共同培養(yǎng)也是當(dāng)前生物技術(shù)研究的一個(gè)重要領(lǐng)域,它旨在將不同細(xì)菌的特性結(jié)合在一起形成一種更為高效和全面的污水處理技術(shù)。但是這種技術(shù)可能會(huì)引發(fā)一些未知的生物風(fēng)險(xiǎn),在相關(guān)研究不夠深入的前提下絕不可貿(mào)然應(yīng)用于實(shí)踐當(dāng)中。
5.電極生物膜法
這種技術(shù)的原理是,將微生物固定在電極表面,由于微生物有吸附生長的特性,其表面會(huì)生成一層生物膜。在接通電流后,污水中的雜質(zhì)由于受到生物膜的吸附而接觸到電流,從而被降解為其他物質(zhì)。研究結(jié)果表明,這種方式對氮、磷等污染物有較好的去除效果,成本低廉,目前在城鄉(xiāng)生活污水處理領(lǐng)用的應(yīng)用比較廣泛。除了脫氮效果理想以外,電極生物膜法還能實(shí)現(xiàn)雜質(zhì)的反硝化,為解決當(dāng)前城市污水因反硝化和釋磷作用引發(fā)的惡性競爭有機(jī)物問題提供了思路。
電極生物膜法的缺點(diǎn)在于對設(shè)備和技術(shù)的要求較高,電流的強(qiáng)弱會(huì)影響微生物的活性,從而弱化其對污染物的吸附效果,在廣泛應(yīng)用之前應(yīng)該進(jìn)行適量的試驗(yàn),尋求最佳方案。
結(jié)語
總體來說,相對于傳統(tǒng)污水處理技術(shù)而言,微生物技術(shù)的處理效果理想,安全性較強(qiáng),不易形成二次污染,而且有效避免了水資源浪費(fèi)的現(xiàn)象。因此,其在污水處理事業(yè)中的應(yīng)用已經(jīng)成為不可逆轉(zhuǎn)的趨勢。當(dāng)然,目前微生物污水處理技術(shù)仍然存在一些技術(shù)上的難關(guān)和條件的限制,這有待于生物工程科學(xué)的發(fā)展和相關(guān)領(lǐng)域的深入研究。對社會(huì)而言,積極提倡應(yīng)用微生物來治理污水有利于促進(jìn)微生物技術(shù)的完善,有利于推進(jìn)我國污水治理的進(jìn)程,最終實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的目標(biāo)。
參考文獻(xiàn):
[1]吳昊.關(guān)于微生物在污水處理中的應(yīng)用[J].生物技術(shù)世界,2015.06
關(guān)鍵詞:含油污水處理;微生物;環(huán)保
中圖分類號(hào):U664.9+2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):
油田注水已由原來的籠統(tǒng)注水發(fā)展到分層、分質(zhì)注水,并且層位逐漸增加,對油田含油污水的水質(zhì)要求更高,要求有更好、更干凈的水回注地下,特別是對低滲透油層—薄差層、過渡層,對污水水質(zhì)要求更高,使“干凈”的污水注入到這些層位補(bǔ)充能量驅(qū)油,從而提高油田的采收率。隨著油田綜合含水率的升高,污水處理量逐漸增大,已形成了龐大的污水處理系統(tǒng),同時(shí)隨著油田含油污水含聚濃度的增大,穩(wěn)定注入水質(zhì)指標(biāo)難度進(jìn)一步增大。近年來為滿足油田生產(chǎn)的需要,對污水處理系統(tǒng)進(jìn)行了大規(guī)模的改建和擴(kuò)建,增加了深度處理系統(tǒng),各種提高水質(zhì)的水處理藥劑不斷提高投加量,以此來滿足低滲透油層的需求,但是污水水質(zhì)全面達(dá)標(biāo)還是非常困難,在綜合考慮不能無限制增加處理規(guī)模、改建污水處理設(shè)施和加大投加藥劑的基礎(chǔ)上,建立了第一座以微生物強(qiáng)化處理為主體的聚合物污水處理站—某聯(lián)污水處理站,更好的解決油田含油污水站出水水質(zhì)問題。自從2011年10月投產(chǎn)以來,該站外輸水質(zhì)的含油和雜質(zhì)指標(biāo)均始終保持在5mg/L以下,為油田污水的達(dá)標(biāo)處理提供了新的思路。
1 微生物污水處理技術(shù)原理
、圖1 微生物降解原理示意圖
因含油污水中成分復(fù)雜,含難處理、難生化降解的有機(jī)污染污較多,可生化性差,雜菌較多且競爭性較強(qiáng),因此一般微生物通過競爭難以形成優(yōu)勢菌群,而且在高含鹽量、高粘度的含聚污水中難以生長繁殖,因而一般生化處理難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化應(yīng)用。油田設(shè)計(jì)院通過篩選及有效配伍獲得特種微生物聯(lián)合菌群,在有氧的條件及適宜的環(huán)境中,細(xì)菌將含聚污水中的溶解性有機(jī)物通過自身的生命過程—氧化、還原、合成等把復(fù)雜的有機(jī)物降解成簡單的無機(jī)物(H2O和CO2等),放出的能量一部分作為自身生存與繁殖的生命之源。在適宜的條件(20℃--40℃)下微生物便以有機(jī)物為營養(yǎng),實(shí)現(xiàn)生命的新陳代謝,達(dá)到凈化污水的目的,確保優(yōu)質(zhì)的出水水質(zhì)。經(jīng)微生物處理后的污泥已達(dá)到了環(huán)保要求,減少了后續(xù)污泥處理系統(tǒng)的投資費(fèi)用及運(yùn)行管理等費(fèi)用。降低了運(yùn)行成本,勞動(dòng)強(qiáng)度小,抗沖擊性能強(qiáng),污泥量小,是一種無害化處理的方法。
2 微生物污水處理技術(shù)工藝流程及主要參數(shù)
2.1微生物污水處理技術(shù)主要工藝流程
某聯(lián)污水處理站設(shè)計(jì)規(guī)模為50000m3/d,目前完工的一期工程為25000m3/d,工藝流程圖見圖2。該工藝流程采用的是“來水氣浮裝置微生物反應(yīng)池固液分離裝置濾罐回注”的處理工藝。放水站來水首先經(jīng)過高效氣浮裝置去除90%的污油,出水進(jìn)入微生物反應(yīng)池,微生物處理系統(tǒng)中投加特種微生物,對污水中的油及其有機(jī)物污染物進(jìn)行最大限度的生物降解,出水經(jīng)過固液分離裝置分離水中固體懸浮物,其中分離的污泥通過污泥處理系統(tǒng)處理后的低污染污泥裝車外運(yùn),污水進(jìn)入石英砂過濾罐進(jìn)行一級過濾后,出水達(dá)到深度污水外輸水質(zhì)要求后外輸回注。
圖2 微生物處理工藝流程
2.2高效氣浮裝置原理及技術(shù)參數(shù)
高效氣浮裝置在—定的壓力條件下,利用高壓溶氣釋放的微氣泡,與污水中的油及懸浮物等不斷碰撞,使其粘附在微氣泡上,隨氣泡一起上浮到水面,形成浮油,利用刮油機(jī)刮至污油槽回收利用;污水進(jìn)入泥水分離區(qū),比重大的污泥沉入底部由刮泥機(jī)刮出,分離后的污水進(jìn)入微生物反應(yīng)池。
圖3 高效氣浮裝置工藝流程
規(guī)格型號(hào):BGF-480;最大處理水量:450m3/h ;數(shù)量:3臺(tái);水力停留時(shí)間:3~5min;回流比:15-25%;進(jìn)水含 油:≤1000mg/l;出水含油:≤100mg/L;進(jìn)水懸浮物:≤300mg/l;出水懸浮物:≤200mg/L。
2.3微生物反應(yīng)池技術(shù)參數(shù)
型號(hào)規(guī)格:BYCS-2500-J;數(shù)量:5組(每組3級,并聯(lián)運(yùn)行);溶解氧:≥2mg/L;生物填料填充度≥80%;總停留時(shí)間:8小時(shí);進(jìn)水含油≤100mg/L;出水含油≤5mg/L。
3運(yùn)行情況及效果
某聯(lián)污水處理站自2009年8月開始建造,2011年10月28日投產(chǎn),運(yùn)行至今已經(jīng)8個(gè)月,目前來水較少,日處理量約11000 m3/d,未達(dá)到一期設(shè)計(jì)量二分之一,且來水含油遠(yuǎn)低于設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn),外輸水質(zhì)一直穩(wěn)定,運(yùn)行水質(zhì)保持低于“5、5、2”標(biāo)準(zhǔn)。分析表明,來水含油最高72mg/l,最低19.5mg/l,平均31.9mg/l,懸浮物最高103mg/l,最低76mg/l,平均92.1mg/l,經(jīng)過氣浮及微生物處理之后含油最高20mg/l,最低9.8mg/l,平均12.5mg/l,懸浮物最高25mg/l,最低6mg/l,平均15.3mg/l,已經(jīng)達(dá)到了普通污水的“20、20”的標(biāo)準(zhǔn),再經(jīng)過一級石英砂過濾處理之后,外輸水質(zhì)最高2.5mg/l,最低1mg/l,平均2.1mg/l,懸浮物最高3mg/l,最低1mg/l,平均2.1mg/l,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于深度污水外輸標(biāo)準(zhǔn)的“5、5”,并且外輸水質(zhì)持續(xù)穩(wěn)定在“3、3”以下,說明除油效果良好,具有在油田生產(chǎn)推廣的價(jià)值。
4結(jié)論
(1)采用微生物技術(shù)處理油田污水可確保達(dá)到 “5.5.2”水質(zhì)指標(biāo)要求乃至更低,有利于油田開發(fā)。
(2)利用微生物處理含油污水,菌群成本低,而且運(yùn)行成本低于原工藝。
(3)經(jīng)微生物處理后,污水中的有毒有害物質(zhì)得到徹底降解,其最終產(chǎn)物為H2O和CO2等無機(jī)物,可減少由于加藥處理使采出水進(jìn)一步復(fù)雜化的現(xiàn)象。微生物處理后產(chǎn)生的污泥具有環(huán)保,減少外排污染的特性。
微生物采油技術(shù)引起了微生物學(xué)界、石油工業(yè)界、石油地質(zhì)界和地球
關(guān)鍵詞:微生物采油、技術(shù)發(fā)展、機(jī)理、特點(diǎn)、方向
一、引言
微生物原油采收率技術(shù),就是利用微生物在油藏中的活動(dòng)、代謝作用及代謝物作用于油藏殘余油,對原油、巖石、水界面性質(zhì)的作用,改變原油的流動(dòng)性,促進(jìn)低滲透帶的滲透率,提高采收率的高新生物技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)的關(guān)鍵,是注入的微生物菌種能否在地層條件下生長繁殖,微生物代謝產(chǎn)物能否有效地改善原油流動(dòng)性質(zhì),還有液固界面性質(zhì)。
二、微生物增加石油采收率的概述
微生物提高采收率的各種技術(shù)的總稱是MEOR。凡是與微生物有關(guān)的采油技術(shù)均屬于MEOR。國內(nèi)外微生物提高采收率方式大致有兩種。一類是地面法,在地面建立發(fā)酵反應(yīng)罐,為微生物提供必須的營養(yǎng)物質(zhì),通過微生物代謝作用產(chǎn)生生物產(chǎn)物(主要是生物表面活性劑和生物聚合物),將生物產(chǎn)物注入地層從而達(dá)到提高采收率的目的。另一類是地下法(油層法) ,指直接將微生物注入到油層,使其在油層中產(chǎn)生各種代謝產(chǎn)物,只要供給微生物足夠的營養(yǎng)物質(zhì),代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)速度就會(huì)大于被微生物降解的速度。
三、微生物提高石油采收率的特點(diǎn)
(一)、微生物以水為生長介質(zhì),以質(zhì)量較次的糖蜜作為營養(yǎng),實(shí)施方便,可從注水管線或油套環(huán)形空間將菌液直接注入地層,不需對管線進(jìn)行改造和添加專用注入設(shè)備;
(二)、由于微生物在油藏中可隨地下流體自主移動(dòng),作用范圍比聚合物驅(qū)大,注入井后不必加壓,不損傷油層,無污染,提高采收率顯著。
(三)、以吞吐方式可對單井進(jìn)行微生物處理,解決邊遠(yuǎn)井、枯竭井的生產(chǎn)問題,提高孤立井產(chǎn)量和邊遠(yuǎn)油田采收率;
(四)、微生物可解決油井生產(chǎn)中多種問題,如降粘、防蠟、解堵、調(diào)剖,最后提高采收率的代謝產(chǎn)物在油層內(nèi)產(chǎn)生,利用率高,且易于生物降解,具有良好的生態(tài)特性。
四、微生物采油新技術(shù)的機(jī)理
(一)、油田化學(xué)劑與微生物采油技術(shù)
在油田開發(fā)的各個(gè)階段都會(huì)使用不同性質(zhì)的化學(xué)劑。當(dāng)大量化學(xué)劑進(jìn)入油藏后,將發(fā)生物理變化和化學(xué)變化,對微生物采油過程可能產(chǎn)生不同的影響。化學(xué)劑既可引起微生物生存環(huán)境的改變,又可改變生物的生理(呼吸作用、蛋白質(zhì)、核酸及影響微生物生長的大分子物質(zhì)的合成)以及影響微生物細(xì)胞壁的功能,因此影響微生物的生長,降低采收率。
(二)、微生物驅(qū)油的機(jī)理
微生物提高原油采收率作用涉及到復(fù)雜的生物、化學(xué)和物理過程,除了具有化學(xué)驅(qū)提高原油采收率的機(jī)理外,微生物生命活動(dòng)本身也具有提高采收率機(jī)理。雖然目前的研究不斷深入,但仍然無法對微生物采油技術(shù)各個(gè)細(xì)節(jié)進(jìn)行量化描述,據(jù)分析,主要包括以下幾個(gè)方面:
1、原油乳化機(jī)理
微生物的代謝產(chǎn)物表面活性劑、有機(jī)酸及其它有機(jī)溶劑,能降低巖石一油一水系統(tǒng)的界面張力,形成油一水乳狀液(水包油),并可以改變巖石表面潤濕性、降低原油相對滲透率和粘度,使不可動(dòng)原油隨注入水一起流動(dòng)。有機(jī)酸能溶解巖石基質(zhì),提高孔隙度和滲透率,增加原油的流動(dòng)性,并與鈣質(zhì)巖石產(chǎn)生二氧化碳,提高滲透率。其它溶劑能溶解孔隙中的原油,降低原油粘度。
2、微生物調(diào)剖增油機(jī)理
微生物代謝生成的生物聚合物與菌體一起形成微生物堵塞,堵塞高滲透層,調(diào)整吸水剖面,增大水驅(qū)掃油效率,降低水油比,起到宏觀和微觀的調(diào)剖作用,可以有選擇地進(jìn)行封堵,改變水的流向,達(dá)到提高采收率的效果。在較大多孔隙中,微生物易增殖,生長繁殖的菌體和代謝物與重金屬形成沉淀物,具有高效堵塞作用。
3、生物氣增油機(jī)理
代謝產(chǎn)生的CO、CO2、Nz、H、CH和C3H等氣體,可以提高地層壓力,并有效地融入原油中,形成氣泡膜,降低原油粘度,并使原油膨脹,帶動(dòng)原油流動(dòng),還可以溶解巖石,擠出原油,提高滲透率。
4、中間代謝產(chǎn)物的作用
微生物及中間代謝產(chǎn)物如酶等,可以將石油中長鏈飽和烴分解為短鏈烴,降低原油的粘度,并可裂解石蠟,減少石蠟沉積,增加原油的流動(dòng)性。脫硫脫氮細(xì)菌使原油中的硫、氮脫出,降低油水界面張力,改善原油的流動(dòng)性。
5、界面效應(yīng)
微生物粘附到巖石表面上而生成沉積膜,改善巖石孔隙壁面的表面性質(zhì),使巖石表面附著的油膜更容易脫落,并有利于細(xì)菌在孔隙中成活與延伸,擴(kuò)大驅(qū)油面積,提高采收率。
(三)、理論研究
二十世紀(jì)八十年代,國外的Islam、Zhang和Chang等建立了微生物采油的數(shù)學(xué)模型并開展了相應(yīng)的數(shù)值模擬研究。Zhang模型優(yōu)于Islam模型在于可描述微生物在地層中的活動(dòng),卻難于現(xiàn)場模擬。Chang模型是三維三相五組分,能描述微生物在地層中的行為,不能描述在油藏中的增產(chǎn)機(jī)理。并且物理模擬研究基本上是應(yīng)用化學(xué)驅(qū)的物理模型試驗(yàn)裝置及試驗(yàn)過程。微生物驅(qū)油模型的核心是巖心管部分,其長度影響微生物的生長繁殖。應(yīng)建立大型巖心模型,使微生物充分繁殖,便于分析研究微生物的驅(qū)油效果。
五、MEOR營養(yǎng)液的配制和菌種的篩擇
(一)、菌種的篩擇
菌種篩選是微生物采油技術(shù)的關(guān)鍵。菌種篩選主要向兩方面發(fā)展,一是提高菌種耐溫性,以適合更廣的油藏范圍;二是提供部分無機(jī)營養(yǎng)物,希望以原油為碳源,降低注入營養(yǎng)成本。微生物采油技術(shù)采用的細(xì)菌按來源可以分為兩類:一是天然細(xì)菌,以油田環(huán)境為主,包括油田污水、采出油泥沙、地下巖心、長期被原油污染的土壤,淺海油井附近的水和土壤等。主要目的是利用它們某些方面的特性,如嗜鹽性、耐溫性等。另外,由于內(nèi)源微生物驅(qū)油直接應(yīng)用地層中的細(xì)菌,菌種類復(fù)雜,屬于一種獨(dú)立的選擇方式。二是人工培植的工程細(xì)菌,可以通過紫外線照射、全DNA轉(zhuǎn)化、添加生長因子、反復(fù)馴化等手段,提高天然細(xì)菌在某一方面的特性,如耐高溫、耐鹽性、富產(chǎn)表面活性劑、富產(chǎn)氣體等,從而培養(yǎng)出新的細(xì)菌。用于MEOR的微生物可以是好氧菌、厭氧菌,也可以是兼性厭氧菌。在MEOR實(shí)施的過程中,可以單獨(dú)使用某一菌種,但為了發(fā)揮微生物的協(xié)同作用,更多的是使用配伍性較好的混合菌種。在選擇的過程中應(yīng)遵循的原則必須適應(yīng)油藏的環(huán)境條件。
(二)、營養(yǎng)液的配制
營養(yǎng)液的配制主要根據(jù)選用的菌種、地層條件和工程的目的來確定。 菌種不同, 通常所需要的營養(yǎng)物質(zhì)也不一樣, 微生物一般都需要含磷化合物、含氮化合物、含碳化合物、硫、各種微量金屬元素、氫等地層中可能缺乏這些營養(yǎng)物質(zhì)中的一種或幾種。因此, 營養(yǎng)液的組分主要包括地層中缺乏的營養(yǎng)物質(zhì)。
六、微生物采油技術(shù)的前景
(一)、井筒技術(shù)目的是為了更好的保護(hù)微生物,能起到一定的防蠟效果,工藝簡單,適合大規(guī)模的應(yīng)用。與此同時(shí),應(yīng)篩選代謝物質(zhì)能起到較強(qiáng)液化作用的菌種最為適宜。
(二)、單井吞吐,它的作用對象是近井的地下層,需要菌種在地下層完成新陳代謝,篩選的微生物的類型應(yīng)以厭氧及兼性厭氧為主,同時(shí)要求具備耐溫性,現(xiàn)場實(shí)際應(yīng)用時(shí)需要補(bǔ)充營養(yǎng)劑,然后關(guān)井相對的時(shí)間。
(三)、好氧微生物驅(qū),其又被稱為空氣輔助型微生物驅(qū)。在有氧條件下,該菌種的代謝加快,向地下層排放空氣的同時(shí)菌種會(huì)消耗掉一定程度的氧氣,并將石油中的結(jié)構(gòu)進(jìn)行氧化。
七、源微生物的采油工藝
國內(nèi)油田已進(jìn)人高含水開發(fā)期,是采用內(nèi)源微生物驅(qū)油還是采用外源微生物驅(qū)油,要根據(jù)具體油藏內(nèi)的微生物群落進(jìn)行分析。若具體油藏中內(nèi)存在有益微生物驅(qū)油的微生物群落,宜采用內(nèi)源微生物驅(qū)油工藝,我國國內(nèi)致力于運(yùn)用最新微生物采油技術(shù)。
八、結(jié)語
結(jié)合上面的論述,我國的采油油田,使用微生物技術(shù)采油的都取得了很好的效果。微生物采油也確實(shí)發(fā)揮出了技術(shù)先進(jìn)的優(yōu)勢,這種技術(shù)的發(fā)展必將引領(lǐng)我國的石油行業(yè)走向輝煌。
參考文獻(xiàn):
【關(guān)鍵詞】:食品;微生物;快速檢測
1、食品微生物檢驗(yàn)環(huán)境
進(jìn)行食品微生物檢驗(yàn)必須要確保食品微生物檢驗(yàn)環(huán)境的無菌,達(dá)到無菌條件則須先進(jìn)行消毒,主要任務(wù)是將微生物進(jìn)行滅活,避免微生物再次生長。我國現(xiàn)在主要使用的消毒技術(shù)有紫外線消毒,紫外線消毒主要為:在室溫下,220V,30W紫外燈下方垂直位置lm處的253.7nm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)≥70μW/cm2。臭氧消毒主要為:封閉無菌室內(nèi),無人條件下內(nèi)作業(yè)。
2、免疫學(xué)方法
2.1免疫層析技術(shù)
免疫層析技術(shù)是一種新興的免疫測定技術(shù),檢測原理為在膜的毛細(xì)管作用下,被檢測對象發(fā)生移動(dòng),方向朝著另一端,在此過程中,抗原和抗體會(huì)結(jié)合、固化、分離,最后根據(jù)顏色變化檢測食品。目前較為受歡迎的為膠體金免疫層技術(shù),并且已廣泛運(yùn)用在食品產(chǎn)業(yè)中。該技術(shù)具有操作簡單、無污染等優(yōu)點(diǎn),,采用免疫層析技術(shù)檢測布氏桿菌、沙門氏菌等細(xì)菌能夠獲得良好的效果。
2.2免疫磁珠技術(shù)
抗對抗免疫磁珠分離法將為磁珠微球技術(shù)和免疫化學(xué)技術(shù)兩種技術(shù)有機(jī)結(jié)合,該技術(shù)比免疫層次技術(shù)更加的快速、高效。
2.3酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)
該技術(shù)主要是將放射免疫技術(shù)和熒光技術(shù)有效結(jié)合,采用該技術(shù)檢測時(shí),通過充分利用抗原抗體的特異性,將免疫酶染色,進(jìn)而得出相應(yīng)的結(jié)果,實(shí)現(xiàn)食品中微生物的檢測。
2.4免疫熒光技術(shù)
免疫熒光技術(shù)熒光標(biāo)記活性抗原體,在顯微鏡下可看到明顯的熒光,進(jìn)而檢測食品微生物。免疫熒光法主要用于檢測沙門氏菌,具有用時(shí)短、操作簡單等優(yōu)點(diǎn)。
3、細(xì)菌計(jì)數(shù)法
3.1流式法
流式法主要利用激光技術(shù)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞濃度的識(shí)別。流式法主要有以下幾個(gè)步驟:(1)采用激光技術(shù)照射樣品;(2)密切觀察樣品是否存在反射;(3)分析樣品,包括細(xì)胞大小與散射光間的關(guān)系、細(xì)胞膜抗原強(qiáng)度和激光亮度間關(guān)系;(4)得出最終的結(jié)論,并詳細(xì)記錄結(jié)果。采用流式法,不僅可以觀測到微生物的形狀,同時(shí)還可以明確微生物數(shù)量。該技術(shù)主要應(yīng)用于檢測牛奶中的菌落數(shù)。在檢測過程中,檢測結(jié)果一定程度上會(huì)受到蛋白質(zhì)的影響,采用流式法可有效解決這一問題,可在短時(shí)間內(nèi)快速檢測出牛奶中的細(xì)菌及活性酶,近年來該技術(shù)逐漸成熟,希望該技術(shù)能得到推廣。
3.2固定式計(jì)數(shù)法
固定計(jì)數(shù)法,又稱為SPC計(jì)數(shù)法,通常采用該方法檢測單個(gè)微生物或革蘭氏陰性菌,該方法的特點(diǎn)是比較細(xì)膩。
4、傳感器檢測法
4.1基因傳感器法
基因傳感器法主要是指將一個(gè)已知核苷酸序列的半單鏈DNA分子固定在傳感器上,并使其與另外一條互補(bǔ)的目標(biāo)DNA雜交,進(jìn)而組成一條雙鏈DNA,并通過換能器反映傳達(dá)出的物理信號(hào)?;騻鞲衅鞣▋?yōu)點(diǎn)在于操作簡單、靈敏度高。目前我國基因傳感器有很多種,主要包括兩種類型的基因傳感器,一種為電極電化學(xué)式DNA傳感器,另一種為石英晶體振蕩器。
4.2生物傳感器
采用生物傳感器檢測,被測分子與生物接收器上的敏感材料接觸,并產(chǎn)生一系列的化學(xué)反應(yīng),之后會(huì)傳達(dá)出一系列信號(hào),如顏色、離子強(qiáng)度等。該檢測方法具有較高的靈敏度。檢測食品中少量的金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和沙門氏菌等,可以采用酶免疫電流型生物傳感器,能夠獲得良好的檢測效果。代謝法
4.3阻抗法
采用阻抗法檢測,首先需要花費(fèi)一定的時(shí)間培養(yǎng)相關(guān)微生物,使原來的惰性底物成為活性底物,此時(shí)培養(yǎng)基的阻抗性會(huì)有所降低,電導(dǎo)性會(huì)有所上升。之后操作人員應(yīng)觀察阻抗的變化情況,并分析檢測微生物。該方法優(yōu)點(diǎn)在于檢測效率高。
4.4放射法
放射法是一項(xiàng)全新的檢測方法,它將物理原理和化學(xué)方法充分結(jié)合,在檢測過程中,首先完成細(xì)菌培養(yǎng),并進(jìn)行標(biāo)記,之后發(fā)生化學(xué)反應(yīng),生成一氧化碳,通過分析一氧化碳,得出結(jié)論。該方法的優(yōu)點(diǎn)在于準(zhǔn)確度高、應(yīng)用范圍廣。
4.5干片法
干片法是⒁恍┪蘚Φ母叻腫硬牧戲湃朧稱分校監(jiān)測食品中的微生物,該方法主要以微生物即高分子學(xué)為基礎(chǔ),是一種綜合性檢測方法。由于該方法非常簡單、易操作,且攜帶方便、成本低,該方法是食品微生物檢測一種常見的方法。
5、快速檢測方法的不足
通過以上對不同檢測技術(shù)的分析可知,不同的快速檢測技術(shù)有其獨(dú)特的優(yōu)勢和最佳的使用范圍,很多的快速檢測技術(shù)具有食品專一性,對于一個(gè)特定的食品檢測性能最佳。但與此同時(shí),許多檢測手段又在某些方面存在一定的局限性。比如,PCR及其衍生技術(shù)所需的儀器設(shè)備價(jià)格非常昂貴,非一般實(shí)驗(yàn)室能承受,所以限制了其在我國食品檢測領(lǐng)域的大面積推廣及應(yīng)用;基因芯片技術(shù)不僅儀器設(shè)備成本高,而且操作過程對實(shí)驗(yàn)人員的要求也比較高;很多檢測手段不能同時(shí)做到“定性”和“定量”分析;免疫學(xué)方法雖然速度較快、靈敏度也較高,但容易呈現(xiàn)假陽性、假陰性。所以,現(xiàn)在有關(guān)食品微生物快速檢測亟待解決的問題主要是降低成本,提高自動(dòng)化水平,降低對操作人員的要求與束縛,同時(shí),最主要的問題是要提高檢測設(shè)備的靈敏度,增強(qiáng)對微生物的識(shí)別特異性,增強(qiáng)設(shè)備的通用性等。
結(jié)論:
隨著生活水平的不斷提高,人們對食品質(zhì)量安全提出了更高的要求,同時(shí)食品安全關(guān)系到人們的身體健康,對社會(huì)的和諧發(fā)展具有重要作用,所以必須加強(qiáng)對食品微生物的檢測,避免食品中的微生物對人們的身體健康產(chǎn)生威脅。檢測人員應(yīng)根據(jù)具體的情況,選擇正確的檢測方法,能準(zhǔn)確、快速檢測出食品中有害物質(zhì),提高食品微生物檢測水平,保證人們的生命安全。
【參考文獻(xiàn)】:
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1免疫學(xué)的方法
在食品微生物的檢測當(dāng)中免疫學(xué)技術(shù)主要是建立在抗原、抗體特異性結(jié)合的反應(yīng)基礎(chǔ)上,并且以免疫放大技術(shù)為輔,利用病原體刺激生成免疫球蛋白。這種方法的優(yōu)勢在于不需要進(jìn)行樣品選擇性增菌之后分離,就可直接進(jìn)行篩選,具備了靈敏度高的特點(diǎn),按照檢測方法的差異可以分為凝集反應(yīng)、免疫擴(kuò)散反應(yīng)和免疫熒光反應(yīng)等。
1.1凝集反應(yīng)凝集反應(yīng)從本質(zhì)上來講也是利用抗原、抗體相結(jié)合的原理,將特異性抗體包被于乳膠顆粒之上,進(jìn)而產(chǎn)生了肉眼可見、便于觀察的凝集反應(yīng)。這種方法因其特異性需要獲得較純的細(xì)菌培養(yǎng)物,然后使培養(yǎng)物和致敏乳膠發(fā)生反應(yīng),通常應(yīng)用于大腸桿菌類細(xì)菌中H7和O157的鑒定。
1.2免疫擴(kuò)散反應(yīng)免疫擴(kuò)散反應(yīng)的本質(zhì)是生成一種不溶性的抗原、抗體復(fù)合物,是將抗體放入固體或者液體的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),生成一種肉眼可見的沉淀性物質(zhì),這種反應(yīng)需要在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行,在實(shí)際的食品微生物檢測方法中,應(yīng)用了這一技術(shù)的有VIP免疫擴(kuò)散的試劑條還有Salmonella1-2的TestTM,這一類產(chǎn)品在實(shí)際當(dāng)中應(yīng)用也頗為廣泛。
1.3免疫熒光反應(yīng)免疫熒光學(xué)反應(yīng)的本質(zhì)是一種免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù),利用熒光素對檢測抗原或者抗體進(jìn)行標(biāo)記,而后產(chǎn)生的特異性抗原反應(yīng)能夠形成帶有熒光的抗原、抗體結(jié)合物,在儀器中得到檢驗(yàn)。這種方法在實(shí)際應(yīng)用的過程中按情況不同可以分為直接方法和間接方法。直接方法就是直接在檢測的樣品上滴加已知特異性的熒光標(biāo)記抗血清,在洗滌之后進(jìn)行觀察。間接方法就是將細(xì)菌特異性抗體上滴加在檢測樣本上,經(jīng)過反應(yīng)后再洗滌,然后加入熒光標(biāo)記第二抗體,實(shí)現(xiàn)檢測。這種方法因其熒光性更加有利于觀察,也因其特異性主要適用于沙門氏菌、葡萄球菌、李斯特菌以及單核細(xì)胞增生的李斯特氏菌等方面的檢測。
2分子生物學(xué)法
2.1聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)是一種體外的選擇性DNA或RNA擴(kuò)增技術(shù)。其根本目的就是將人工無法培養(yǎng)出的微生物進(jìn)行相應(yīng)DNA或者RNA的片段擴(kuò)增,通過檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的含量來快速檢測飼料當(dāng)中存在的致病菌含量。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)簡稱為PCR,可以直接對樣品當(dāng)中的肉毒梭菌、大腸桿菌、乳酸桿菌和痢疾桿菌進(jìn)行檢測,PCR能夠克服核酸定量敏感性低的缺點(diǎn),分析出極為微量的DNA,對任何模板的標(biāo)本都能夠?qū)崿F(xiàn)定量擴(kuò)增及分析。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)克服了基因探針技術(shù)靈敏度不高的缺陷,其中引入的Taq聚合酶還能夠簡化反應(yīng)程序,實(shí)現(xiàn)半自動(dòng)化。以同位素標(biāo)記基因探針的PCR反應(yīng)為例,這種方法應(yīng)用于水源E.Coli的檢測,能夠使檢測量達(dá)到100%,能夠快速檢驗(yàn)出食品當(dāng)中帶有污染的病原,并能夠保證其準(zhǔn)確性。美國杜邦快利康公司已經(jīng)建立了BAX+病原菌的檢測系統(tǒng),PCR技術(shù)在細(xì)菌檢測方面的應(yīng)用前景十分廣闊。
2.2核酸探針技術(shù)核酸探針本身是一種帶標(biāo)記的DNA特異性片段,核酸探針技術(shù)的原理是利用堿基互補(bǔ)的原則,使核酸探針和目的DNA進(jìn)行雜交,最終以特定方法進(jìn)行標(biāo)記物測定,核算探針技術(shù)大致可以分為非放射性標(biāo)記和放射性標(biāo)記兩大類。核酸探針具有特異性。傳統(tǒng)的檢測方法都是以基因表達(dá)產(chǎn)物為檢測目標(biāo),會(huì)受到多種因素的干擾,檢測病毒要在組織培養(yǎng)之后對蛋白質(zhì)的囊膜進(jìn)行檢測,還須采取超低溫的保存技術(shù),但仍然會(huì)因其一些編碼蛋白的基因變化,核算探針則避免了這一復(fù)雜的程序,無需改變目的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),更方便應(yīng)用。但是要注意這其中要將RNA除外,因?yàn)镽NA探針不耐受堿處理,需要采取不同的方法來制備出檢測用的RNA。核酸探針特異性主要取決于使用條件和堿基序列,還會(huì)受到探針長度的影響,其敏感性主要受標(biāo)記系統(tǒng)和探針本身的控制,延長培養(yǎng)的時(shí)間也能夠提高探針靈敏度。在當(dāng)前的核酸探針應(yīng)用過程中還存在一些問題,要實(shí)現(xiàn)更快更簡潔的制備還需要一段時(shí)間的研究和探討,逐步克服因待檢菌種繁多而產(chǎn)生的核酸探針制備問題,突破局限性。
3結(jié)語